| 摘要 | 第2-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 大麦遗传转化的研究 | 第10-11页 |
| 1.2 遗传转化方法 | 第11-13页 |
| 1.2.1 基因枪法 | 第11-12页 |
| 1.2.2 农杆菌浸染法 | 第12-13页 |
| 1.3 大麦再生体系的研究 | 第13-16页 |
| 1.3.1 花药及小孢子培养 | 第13页 |
| 1.3.2 幼穗培养 | 第13-14页 |
| 1.3.3 原生质体培养 | 第14页 |
| 1.3.4 幼胚培养 | 第14-15页 |
| 1.3.5 成熟胚培养 | 第15-16页 |
| 1.4 土壤盐碱化的现状与危害 | 第16-17页 |
| 1.5 盐胁迫对植株的危害 | 第17-19页 |
| 1.5.1 盐胁迫对种子萌发的影响 | 第17-18页 |
| 1.5.2 盐胁迫对植物生长发育的影响 | 第18-19页 |
| 1.5.3 盐胁迫对植物光合作用的影响 | 第19页 |
| 1.6 植物体内离子选择性吸收和区隔化 | 第19-20页 |
| 1.7 Na~+/H~+逆向转运蛋白的研究 | 第20-21页 |
| 1.7.1 Na~+/H~+逆向转运蛋白的分子结构与功能 | 第20页 |
| 1.7.2 Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的研究 | 第20-21页 |
| 1.8 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 1.9 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 大麦成熟胚再生体系的优化 | 第24-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 外植体材料 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂与药品 | 第24页 |
| 2.1.3 仪器设备与耗材 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 培养基组成 | 第24页 |
| 2.2.2 培养方法 | 第24-25页 |
| 2.2.3 不同诱导培养基对大麦成熟胚再生的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.4 培养基中 2,4-D浓度梯度设置 | 第26页 |
| 2.2.5 培养基中Ag~+浓度梯度设置 | 第26-27页 |
| 2.2.6 培养基中ABA浓度梯度设置 | 第27页 |
| 2.2.7 数据统计方法 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.3.1 不同诱导培养基对出愈率的的影响 | 第27-28页 |
| 2.3.2 不同诱导培养基上的愈伤组织分化情况 | 第28-30页 |
| 2.3.3 培养基中 2，4-D浓度对大麦成熟胚再生的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.4 培养基中Ag~+ 浓度对大麦成熟胚再生的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.5 培养基中ABA浓度对大麦成熟胚再生的影响 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 HgNHX1基因植物表达载体的构建与转化 | 第36-51页 |
| 3.1 试验材料与试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.1 培养基 | 第36页 |
| 3.1.2 试验材料 | 第36页 |
| 3.1.3 主要试剂及常用酶 | 第36页 |
| 3.1.4 菌株与质粒载体 | 第36-37页 |
| 3.1.5 仪器与设备 | 第37页 |
| 3.2 试验方法 | 第37-44页 |
| 3.2.1 盐生草总RNA的提取 | 第37页 |
| 3.2.2 引物设计与合成 | 第37页 |
| 3.2.3 目的基因的克隆 | 第37-38页 |
| 3.2.3.1 扩增目的片段 | 第37-38页 |
| 3.2.3.2 目的片段的回收 | 第38页 |
| 3.2.4 目的片段连接克隆载体 | 第38-39页 |
| 3.2.4.1 回收产物加A尾 | 第38-39页 |
| 3.2.4.2 连接克隆载体 | 第39页 |
| 3.2.5 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第39-40页 |
| 3.2.6 蓝白斑筛选及测序 | 第40页 |
| 3.2.7 植物表达载体pBI-HgNHX1的构建 | 第40-42页 |
| 3.2.7.1 质粒DNA的提取 | 第40-41页 |
| 3.2.7.2 质粒的双酶切 | 第41页 |
| 3.2.7.3 目的片段与植物表达载体pBI121连接 | 第41-42页 |
| 3.2.7.4 连接产物转化大肠杆菌 | 第42页 |
| 3.2.7.5 蓝白斑筛选和重组质粒的双酶切鉴定 | 第42页 |
| 3.2.8 pBI-HgNHX1的农杆菌转化 | 第42-43页 |
| 3.2.8.1 农杆菌感受态细胞LBA4404的制备 | 第42页 |
| 3.2.8.2 pBI-HgNHX1的农杆菌转化 | 第42-43页 |
| 3.2.9 农杆菌介导烟草的遗传转化 | 第43-44页 |
| 3.2.9.1 烟草叶片组织的准备 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-49页 |
| 3.3.1 目的基因的克隆 | 第44-46页 |
| 3.3.1.1 总RNA的提取 | 第44页 |
| 3.3.1.2 HgNHX1基因的获得 | 第44-46页 |
| 3.3.2 植物表达载体的构建 | 第46-48页 |
| 3.3.2.1 表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.3.2.2 pBI-HgNHX1载体的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3.3 农杆菌介导烟草叶片的遗传转化 | 第48-49页 |
| 3.3.3.1 pBI-HgNHX1转化农杆菌 | 第48页 |
| 3.3.3.2 农杆菌浸染烟草叶片 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 4.1 大麦成熟胚再生体系的优化研究 | 第51页 |
| 4.2 HgNHX1基因植物表达载体的构建及遗传转化 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-62页 |
| 附图 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64-65页 |
| 导师简介 | 第65-66页 |
