| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第16-32页 |
| 1.1 组织工程概述 | 第16-23页 |
| 1.1.1 组织工程基本原理 | 第16-18页 |
| 1.1.2 组织工程的研究内容 | 第18-22页 |
| 1.1.3 组织工程研究中亟待解决的问题 | 第22-23页 |
| 1.1.4 组织工程的发展前景 | 第23页 |
| 1.2 生长因子固定化 | 第23-26页 |
| 1.2.1 生长因子固定化的意义 | 第23-24页 |
| 1.2.2 生长因子固定化的方法及特点 | 第24-25页 |
| 1.2.3 生长因子固定化的发展前景 | 第25-26页 |
| 1.3 血管内皮生长因子及血管组织工程 | 第26-27页 |
| 1.3.1 血管内皮生长因子家族及作用机制 | 第26页 |
| 1.3.2 血管组织工程 | 第26-27页 |
| 1.4 多巴胺 | 第27-28页 |
| 1.5 固相合成技术 | 第28-29页 |
| 1.6 转肽酶 | 第29-30页 |
| 1.7 研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 应用基因工程技术构建含有血管内皮生长因子基因的质粒 | 第32-44页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第32-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.2.1 实验技术路线 | 第34-35页 |
| 2.2.2 构建含VEGF-Sor及VEGF基因的质粒 | 第35-37页 |
| 2.2.3 将构建的质粒转入大肠杆菌表达系统 | 第37-38页 |
| 2.3 实验结果 | 第38-41页 |
| 2.3.1 引物合成 | 第38-39页 |
| 2.3.2 目的基因的合成 | 第39页 |
| 2.3.3 线性载体的获取 | 第39-40页 |
| 2.3.4 构建含目的基因的质粒并转入大肠杆菌表达系统 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 血管内皮生长因子的表达与纯化 | 第44-56页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第44-46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-50页 |
| 3.2.1 实验技术路线 | 第46页 |
| 3.2.2 筛选高表达菌株 | 第46-47页 |
| 3.2.3 大肠杆菌扩增 | 第47页 |
| 3.2.4 目的蛋白诱导表达 | 第47-48页 |
| 3.2.5 蛋白质纯化 | 第48-49页 |
| 3.2.6 凝血酶切去组蛋白标签 | 第49-50页 |
| 3.2.7 蛋白质检测 | 第50页 |
| 3.2.8 冻干 | 第50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-54页 |
| 3.3.1 筛选高表达菌株 | 第50页 |
| 3.3.2 对数增殖期的测定 | 第50-51页 |
| 3.3.3 Ni柱层析 | 第51-52页 |
| 3.3.4 蛋白质检测 | 第52-53页 |
| 3.3.5 切割组蛋白标签并纯化 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 固相合成的方法合成DOPA多肽 | 第56-63页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第56-57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 4.2.1 技术路线 | 第57-58页 |
| 4.2.2 填充Rink酰胺柱 | 第58页 |
| 4.2.3 固相合成线性多肽 | 第58-59页 |
| 4.2.4 将合成的线性多肽从固相载体上洗脱 | 第59页 |
| 4.2.5 DOPA多肽的纯化与检测 | 第59页 |
| 4.2.6 DOPA多肽的保存 | 第59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-61页 |
| 4.3.1 DOPA多肽的检测 | 第59-60页 |
| 4.3.2 DOPA多肽的保存 | 第60-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 转肽酶介导的VEGF及DOPA多肽的连接 | 第63-77页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第63-65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65-70页 |
| 5.2.1 实验技术路线 | 第65页 |
| 5.2.2 转肽酶反应 | 第65-66页 |
| 5.2.3 VEGF-DOPA的纯化 | 第66页 |
| 5.2.4 VEGF-DOPA的表征 | 第66-67页 |
| 5.2.5 VEGF-DOPA的生物活性研究 | 第67-70页 |
| 5.3 实验结果 | 第70-75页 |
| 5.3.1 VEGF-DOPA纯化 | 第70页 |
| 5.3.2 VEGF-DOPA的表征 | 第70-74页 |
| 5.3.3 VEGF-DOPA的生物活性 | 第74-75页 |
| 5.4 讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 经血管内皮生长因子修饰的材料的生物学活性研究 | 第77-87页 |
| 6.1 材料与仪器 | 第77-79页 |
| 6.2 实验方法 | 第79-82页 |
| 6.2.1 实验技术路线 | 第79页 |
| 6.2.2 金属材料 | 第79-80页 |
| 6.2.3 生长因子的粘附特性的测定 | 第80-81页 |
| 6.2.4 生长因子的固定化 | 第81页 |
| 6.2.5 生物材料的生物学活性测定 | 第81-82页 |
| 6.3 实验结果 | 第82-85页 |
| 6.3.1 QCM-D测定VEGF-DOPA对生物材料的亲和力 | 第82-84页 |
| 6.3.2 免疫化学发光测定固定化的生长因子 | 第84页 |
| 6.3.3 修饰后的生物材料的生物学活性测定 | 第84-85页 |
| 6.4 讨论 | 第85-87页 |
| 第七章 结论与创新点 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
