| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 水禽细小病毒病原学研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 分类地位 | 第10页 |
| 1.1.2 形态特征及理化特性 | 第10-11页 |
| 1.1.3 宿主范围及培养特性 | 第11页 |
| 1.1.4 分子生物学特征 | 第11-13页 |
| 1.2 水禽细小病毒流行病学研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 主要临床症状及病理变化 | 第13-14页 |
| 1.2.2 诊断方法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 防制 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| 2.1 材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 病毒、临床样品和实验动物 | 第17页 |
| 2.1.2 主要分子生物学试剂和常用生化试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 细胞培养溶液 | 第17-18页 |
| 2.1.4 工程菌培养及质粒转化用溶液 | 第18-19页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 病原的PCR检测及纯净性检测 | 第20-21页 |
| 2.2.2 SD株鸭胚毒的分离与鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.3 动物回归试验 | 第22页 |
| 2.2.4 SD株细胞毒的分离与鉴定 | 第22-23页 |
| 2.2.5 SD株全基因组各片段重组质粒的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.6 SD株全基因组序列的拼接及分析 | 第25页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR引物及探针的设计 | 第25-26页 |
| 2.2.8 PCR反应体系的优化及标准曲线的绘制 | 第26-27页 |
| 2.2.9 荧光定量PCR检测方法的验证 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-47页 |
| 3.1 DPVSD株的分离与鉴定 | 第29-33页 |
| 3.1.1 发病鸭的流行病学及临床特征 | 第29页 |
| 3.1.2 病原PCR检测及纯净性检测结果 | 第29-30页 |
| 3.1.3 鸭胚分离毒PCR鉴定结果 | 第30-31页 |
| 3.1.4 EID50测定结果 | 第31页 |
| 3.1.5 动物回归试验结果 | 第31-32页 |
| 3.1.6 细胞分离毒PCR鉴定结果 | 第32-33页 |
| 3.1.7 细胞分离毒IFA检测结果 | 第33页 |
| 3.2 DPVSD株全基因组序列的测定与分析 | 第33-41页 |
| 3.2.1 各片段PCR电泳结果 | 第33-34页 |
| 3.2.2 全基因组序列特征分析 | 第34-36页 |
| 3.2.3 NS基因序列特征分析 | 第36-38页 |
| 3.2.4 VP基因序列特征分析 | 第38-41页 |
| 3.2.5 ITR区序列特征分析 | 第41页 |
| 3.2.6 潜在糖基化位点预测分析 | 第41页 |
| 3.3 DPVTaq-Man实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第41-47页 |
| 3.3.1 Taq-Man实时荧光定量PCR引物的验证 | 第41-42页 |
| 3.3.2 标准品的制备 | 第42页 |
| 3.3.3 反应体系的优化结果 | 第42-43页 |
| 3.3.4 标准曲线的绘制 | 第43-44页 |
| 3.3.5 特异性试验结果 | 第44-45页 |
| 3.3.6 敏感性试验结果 | 第45页 |
| 3.3.7 重复性试验结果 | 第45-46页 |
| 3.3.8 临床样品检测结果 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 DPVSD株的分离与鉴定 | 第47-48页 |
| 4.2 DPVSD株基因组全序的测定与分析 | 第48页 |
| 4.3 DPVTaq-Man实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 中文详细摘要 | 第59-60页 |
