| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第8-13页 |
| 1 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 油桐的应用及研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 油桐的应用 | 第13-14页 |
| 1.1.2 油桐的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2 植物脂肪酸生物合成代谢 | 第18-21页 |
| 1.2.1 植物脂肪酸的种类 | 第18-19页 |
| 1.2.2 植物脂肪酸生物合成代谢过程 | 第19-21页 |
| 1.3 β-酮脂酰-ACP还原酶基因(KAR)家族的研究现状 | 第21-24页 |
| 1.3.1 KAR的生化特征分析 | 第21页 |
| 1.3.2 KAR的结构特征分析 | 第21-22页 |
| 1.3.3 KAR的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.3.4 KAR的研究展望 | 第23-24页 |
| 1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第24-26页 |
| 1.4.1 目的与意义 | 第24-25页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第25-26页 |
| 2 油桐KAR基因的克隆及生物信息学分析 | 第26-47页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第26页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 油桐种子总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 油桐种子总RNA电泳检测 | 第28页 |
| 2.2.3 普通反转录合成cDNA第一条链 | 第28-29页 |
| 2.2.4 油桐种子KAR基因全长的扩增 | 第29-32页 |
| 2.2.5 油桐种子基因组中KAR基因的扩增 | 第32-34页 |
| 2.2.6 油桐KAR基因的生物信息学分析 | 第34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-45页 |
| 2.3.1 油桐种子KAR基因cDNA的克隆 | 第34-36页 |
| 2.3.2 油桐种子KAR基因组的克隆 | 第36页 |
| 2.3.3 油桐种子KAR基因的生物信息学分析 | 第36-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-47页 |
| 3 油桐KAR基因的时空表达模式分析 | 第47-55页 |
| 3.1 材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 3.1.2 载体与菌株 | 第47页 |
| 3.1.3 试剂 | 第47页 |
| 3.1.4 仪器设备 | 第47-48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 3.2.1 油桐不同发育时期种子和不同组织总RNA的提取 | 第48页 |
| 3.2.2 荧光定量反转录合成cDNA第一条链 | 第48页 |
| 3.2.3 荧光定量特异引物的设计和内参基因的筛选 | 第48-49页 |
| 3.2.4 内参基因及目的基因片段的克隆 | 第49页 |
| 3.2.5 实时荧光定量分析 | 第49-50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-54页 |
| 3.3.1 总RNA提取 | 第50-51页 |
| 3.3.2 内参基因和目的基因的克隆 | 第51-52页 |
| 3.3.3 实时荧光定量引物特异性检测 | 第52页 |
| 3.3.4 油桐KAR基因与内参基因的标准曲线 | 第52页 |
| 3.3.5 油桐KAR基因在不同组织中的表达模式分析 | 第52-53页 |
| 3.3.6 油桐KAR基因在种子不同发育时期的表达模式分析 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 4 油桐KAR基因的亚细胞定位分析 | 第55-63页 |
| 4.1 材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第55页 |
| 4.1.2 载体与菌株 | 第55-56页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第56页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-60页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第56页 |
| 4.2.2 基因片段的扩增 | 第56-57页 |
| 4.2.3 油桐KAR基因的亚细胞定位预测分析 | 第57页 |
| 4.2.4 亚细胞定位表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 4.2.5 亚细胞定位表达重组子电转化农杆菌 | 第58-59页 |
| 4.2.6 本氏烟草的培养 | 第59页 |
| 4.2.7 农杆菌侵染烟草叶片 | 第59-60页 |
| 4.2.8 蛋白亚细胞定位观察 | 第60页 |
| 4.3 结果与分析 | 第60-62页 |
| 4.3.1 油桐KAR蛋白的亚细胞结构预测分析 | 第60页 |
| 4.3.2 亚细胞定位表达载体质粒提取与检测 | 第60-61页 |
| 4.3.3 油桐KAR蛋白的亚细胞定位观察 | 第61-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 5 油桐KAR蛋白家族两个成员之间的互作关系分析 | 第63-72页 |
| 5.1 材料 | 第63-64页 |
| 5.1.1 载体与菌株 | 第63-64页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第64页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第64页 |
| 5.2 实验方法 | 第64-67页 |
| 5.2.1 酵母表达载体制备 | 第64页 |
| 5.2.2 酵母表达重组子的制备 | 第64-65页 |
| 5.2.3 酵母感受态的制备 | 第65页 |
| 5.2.4 酵母双载体共转化 | 第65-66页 |
| 5.2.5 酵母自激活检测 | 第66页 |
| 5.2.6 酵母双杂交 | 第66页 |
| 5.2.7 酵母双杂交显色反应 | 第66-67页 |
| 5.3 结果与分析 | 第67-70页 |
| 5.3.1 酵母表达载体的制备 | 第67页 |
| 5.3.2 酵母表达载体的构建 | 第67-68页 |
| 5.3.3 酵母双杂交自激活检测 | 第68-69页 |
| 5.3.4 Vf_KAR1和Vf_KAR2蛋白的互作关系分析 | 第69-70页 |
| 5.4 讨论 | 第70-72页 |
| 6 总结 | 第72-74页 |
| 6.1 结论 | 第72页 |
| 6.2 创新点 | 第72页 |
| 6.3 研究展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 附录A 部分药品配制方法 | 第81-83页 |
| 附录 攻读硕士学位期间的主要学术成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
