| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| 英文摘要 | 第12-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 文献回顾 | 第20-34页 |
| 1. 肾综合征出血热 | 第20-21页 |
| 2. 汉坦病毒感染后诱导的机体免疫应答 | 第21-22页 |
| 3. 肾综合征出血热疫苗的研制现状 | 第22-23页 |
| 4. 汉坦病毒结构蛋白及其免疫学特性 | 第23-26页 |
| 5. 本课题组前期的研究基础 | 第26-28页 |
| 6. 腺病毒载体 | 第28-30页 |
| 7. 提高嵌合基因表达与递呈的策略 | 第30-34页 |
| 正文 | 第34-59页 |
| 1 材料 | 第34-37页 |
| ·菌种及细菌基因组 | 第34页 |
| ·工具酶 | 第34页 |
| ·质粒及载体 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·细胞及抗体 | 第35页 |
| ·细菌、细胞培养及冻存用液 | 第35页 |
| ·常用缓冲液 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-45页 |
| ·依据GenBank 设计合成引物 | 第38页 |
| ·PCR 扩增获得HSP70C 基因 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增获得Ub 基因 | 第39页 |
| ·转移载体的构建 | 第39-40页 |
| ·重组腺病毒DNA 的构建 | 第40页 |
| ·HEK293 细胞的培养 | 第40-41页 |
| ·重组腺病毒DNA 转染HEK293 细胞 | 第41-42页 |
| ·重组腺病毒的PCR 鉴定 | 第42页 |
| ·重组腺病毒的单斑纯化 | 第42-43页 |
| ·使用终点稀释法测定病毒的滴度 | 第43-44页 |
| ·免疫荧光法检测表达产物 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-55页 |
| ·HSP70C 基因的PCR 扩增及测序结果 | 第45-46页 |
| ·Ub 基因的PCR 扩增结果 | 第46-48页 |
| ·pShuttle 重组质粒的构建 | 第48-50页 |
| ·重组腺病毒DNA 的PCR 鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组腺病毒的PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| ·HEK293 细胞的CPE 现象 | 第52-53页 |
| ·单斑纯化与重组腺病毒滴度的测定 | 第53页 |
| ·表达产物的免疫荧光检测结果 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| ·关于腺病毒载体的构建 | 第55页 |
| ·关于转录调控优化序列 | 第55-56页 |
| ·HSP70C 与Ub | 第56-57页 |
| ·关于重组腺病毒的单斑纯化 | 第57页 |
| ·关于病毒滴度的测定 | 第57-58页 |
| ·还需进一步通过动物实验验证HSP70C 及Ub 增强提呈的能力 | 第58-59页 |
| 小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 个人简历和研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |