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卷果涩荠MsVPl基因的克隆及其耐盐功能分析

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
中英文缩略词表第8-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1 植物盐害第12-13页
        1.1 细胞膜的伤害第12页
        1.2 渗透伤害第12页
        1.3 矿质离子吸收受阻第12-13页
        1.4 光合作用下降第13页
    2 植物耐盐机理第13-15页
        2.1 植物避盐第13-14页
        2.2 渗透调节第14-15页
            2.2.1 无机渗透调节第14页
            2.2.2 有机渗透调节第14-15页
    3 十字花科植物第15-17页
        3.1 十字花科植物功能基因的克隆第16-17页
            3.1.1 抗旱基因的克隆第16页
            3.1.2 耐盐基因的克隆第16-17页
            3.1.3 耐寒基因第17页
    4 卷果涩荠(Malcolmia scorpioides)研究现状第17-18页
    5 H~+-ppase研究现状第18-20页
        5.1 H~+-PPase的种类和分布第18页
        5.2 H~+-PPase酶结构和生化特点第18-19页
        5.3 V-H~+-PPase的功能第19-20页
            5.3.1 质子泵第19页
            5.3.2 参与蔗糖的生物合成第19页
            5.3.3 控制植物生长素的运输第19-20页
        5.4 转H~+-PPase基因植物研究进展第20页
    本研究的目的和意义第20-22页
第二章 卷果涩荠与拟南芥抗逆性比较第22-31页
    1 实验材料第22页
        1.1 材料第22页
        1.2 主要仪器设备第22页
    2 方法第22-23页
        2.1 种子的消毒及种植第22页
        2.2 实验设计与方法第22-23页
        2.3 数据的收集与处理第23页
    3 实验结果与分析第23-30页
        3.14℃春化处理对卷果涩荠根长的影响第23-24页
        3.2 低温处理对卷果涩荠的影响第24-25页
        3.3 NaCl胁迫处理对两种种子萌发率和表型的影响第25-27页
        3.4 PEG6000模拟干旱胁迫处理两种种子萌发率和表型的影响第27-29页
        3.5 干旱处理下拟南芥、卷果涩荠植株存活率的影响第29-30页
    4 小结第30-31页
第三章 卷果涩荠VP1基因的克隆与生物信息学分析第31-43页
    1 材料与方法第31-32页
        1.1 材料第31页
        1.2 方法第31-32页
            1.2.1 卷果涩荠RNA的提取和cDNA的合成第31页
            1.2.2 卷果涩荠VP1基因部分序列的获得第31页
            1.2.3 卷果涩荠VP1基因 5’cDNA和 3’cDNA的获得第31-32页
            1.2.4 卷果涩荠VP1基因开放阅读框(ORF)的扩增第32页
            1.2.5 生物信息学分析第32页
    2 结果与分析第32-42页
        2.1 卷果涩荠全长序列第32-35页
        2.2 卷果涩荠MsVP1基因及编码的氨基酸序列结构特征分析第35-37页
        2.3 卷果涩荠MsVP1氨基酸的跨膜结构分析第37-38页
        2.4 卷果涩荠VP1蛋白保守序列预测第38页
        2.5 卷果涩荠VP1蛋白质理化性质分析第38页
        2.6 卷果涩荠VP1疏水性分析第38-39页
        2.7 同源性和进化树分析第39-40页
        2.8 卷果涩荠MsVP1蛋白的二级结构分析第40-41页
        2.9 三级结构建模第41-42页
    3 小结第42-43页
第四章 卷果涩荠MsVP1基因的表达分析第43-49页
    1 材料与方法第43-44页
        1.1 材料第43页
            1.1.1 植物材料第43页
            1.1.2 试剂与仪器第43页
        1.2 方法第43-44页
            1.2.1 引物合成第43页
            1.2.2 卷果涩荠UBQ5基因的克隆及测序第43-44页
            1.2.4 卷果涩荠RNA的提取及cDNA第一链的合成第44页
    2 结果分析第44-48页
        2.1 卷果涩荠UBQ5基因的克隆和测序第44-45页
        2.2 卷果涩荠MsVP1基因的表达分析第45-48页
    3 小结第48-49页
第五章 转MsVP1基因植物耐盐性研究第49-60页
    1 材料第49页
        1.1 材料第49页
        1.2 主要仪器设备第49页
    2 方法第49-54页
        2.1 植物表达载体pBI121::MsVP1的构建第49-52页
            2.1.1 pBI121载体质粒和PMD-T::MsVP1质粒提取第49页
            2.1.2 pBI121载体质粒和PMD-T::MsVP1质粒XbaⅠ/Sac Ⅰ双酶切。第49-50页
            2.1.3 载体大片段和目的基因片段的连接第50页
            2.1.4 连接产物转化大肠杆菌TOP10感受态第50-51页
            2.1.5 植物表达载体pBI121::MsVP1质粒转化农杆菌感受态第51-52页
        2.2 农杆菌介导的烟草的转化第52-53页
            2.2.1 烟草无菌苗的获得第52页
            2.2.2 农杆菌的活化第52页
            2.2.3 农杆菌侵染液的制备第52页
            2.2.4 侵染烟草第52页
            2.2.5 烟草抗性苗的获得第52页
            2.2.6 转基因烟草的PCR检测第52-53页
        2.3 转MsVP1基因烟草的耐盐性分析第53-54页
            2.3.1 转基因烟草的盐处理第53页
            2.3.2 相关生理指标的测定第53-54页
    3 结果与分析第54-59页
        3.1 植物表达载体pBI121::MsVP1的构建第54-55页
            3.1.1 pBI121载体质粒和PMD-T::MsVP1质粒XbaⅠ/SacⅠ双酶切第54页
            3.1.2 植物表达载体pBI121::MsVP1的PCR鉴定及双酶切鉴定第54-55页
            3.1.3 植物表达载体pBI121::MsVP1转化农杆菌GV3101第55页
        3.2 转MsVP1基因烟草的获得第55页
        3.3 盐胁迫对转基因烟草形态的影响第55-57页
        3.4 盐胁迫下转基因烟草生理指标的测定第57-59页
            3.4.1 相对含水量的测定第57页
            3.4.2 丙二醛(MDA)含量的测定第57-58页
            3.4.3 NaCl胁迫下烟草叶绿素a、叶绿素b的测定第58-59页
    小结第59-60页
第六章 结论与讨论第60-62页
参考文献第62-67页
附录 主要溶液、培养基配制第67-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页
在学期间主要参与的研究项目第69页
在学期间发表的文章第69-70页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第70页

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