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绿原酸对氧化应激损伤人视网膜色素上皮细胞保护作用的分子机制

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
中英文缩略词第9-10页
第1章 前言第10-13页
第2章 材料与方法第13-27页
    2.1 主要实验设备第13-14页
    2.2 实验材料第14页
        2.2.1 细胞株第14页
    2.3 主要试剂第14-15页
    2.4 主要溶液及试剂配制第15-18页
        2.4.1 PBS 缓冲液第15-16页
        2.4.2 10%胎牛血清 DMEM 培养液第16页
        2.4.3 4%SDS 溶液第16页
        2.4.4 Tris·HCl 缓冲液(0.5mol/L pH6.8)第16页
        2.4.5 Tris·HCl 缓冲液(1.5mol/L pH8.8)第16页
        2.4.6 1×TBST 缓冲液第16页
        2.4.7 封闭液第16-17页
        2.4.8 5×电泳缓冲液第17页
        2.4.9 5×转移缓冲液第17页
        2.4.10 12%分离胶(5ml)第17页
        2.4.11 5%浓缩胶(2ml)第17-18页
        2.4.12 2.0%琼脂糖凝胶第18页
    2.5 实验方法第18-27页
        2.5.1 人视网膜色素上皮细胞 ARPE-19 细胞培养第18-19页
        2.5.2 过氧化氢(H_2O_2)体外培养建立 ARPE-19 细胞氧化应激损伤模型第19页
        2.5.3 实验分组及药物干预处理第19-20页
        2.5.4 WST-1 实验检测绿原酸对 ARPE-19 细胞活力的影响第20页
        2.5.5 WST-1 实验检测绿原酸对氧化应激损伤 ARPE-19 细胞活力的影响第20页
        2.5.6 流式细胞仪检测每个实验组的细胞凋亡率第20-21页
        2.5.7 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各实验组细胞 Bcl-2 基因及Caspase-3 基因表达第21-24页
        2.5.8 蛋白印记法(Western blot)检测各实验组细胞 Bcl-2 及 Caspase-3蛋白表达第24-26页
        2.5.9 灰度值和统计学分析第26-27页
第3章 实验结果第27-34页
    3.1 绿原酸对 ARPE-19 细胞毒性的影响第27-28页
    3.2 绿原酸对氧化应激损伤 ARPE-19 细胞活力的影响第28-29页
    3.3 采用流式细胞仪检测每个实验组 ARPE-19 细胞的凋亡率第29-31页
    3.4 通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测每个实验组细胞的 Bcl-2 和Caspase-3 基因表达水平第31-32页
    3.5 通过蛋白印记法(Western blot)检测每个实验组细胞的 Bcl-2 和Caspase-3 蛋白表达水平第32-34页
第4章 讨论第34-39页
    4.1 年龄相关性黄斑变性第34页
    4.2 氧化应激与细胞凋亡第34-36页
    4.3 ARPE-19 细胞氧化应激损伤模型的建立第36-37页
    4.4 绿原酸对氧化应激损伤人视网膜色素上皮 ARPE-19 细胞的保护作用及机制第37-39页
第5章 结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-45页
攻读学位期间的研究成果第45-46页
综述第46-53页
    参考文献第51-53页

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