摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英文缩略词 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第10-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-27页 |
2.1 主要实验设备 | 第13-14页 |
2.2 实验材料 | 第14页 |
2.2.1 细胞株 | 第14页 |
2.3 主要试剂 | 第14-15页 |
2.4 主要溶液及试剂配制 | 第15-18页 |
2.4.1 PBS 缓冲液 | 第15-16页 |
2.4.2 10%胎牛血清 DMEM 培养液 | 第16页 |
2.4.3 4%SDS 溶液 | 第16页 |
2.4.4 Tris·HCl 缓冲液(0.5mol/L pH6.8) | 第16页 |
2.4.5 Tris·HCl 缓冲液(1.5mol/L pH8.8) | 第16页 |
2.4.6 1×TBST 缓冲液 | 第16页 |
2.4.7 封闭液 | 第16-17页 |
2.4.8 5×电泳缓冲液 | 第17页 |
2.4.9 5×转移缓冲液 | 第17页 |
2.4.10 12%分离胶(5ml) | 第17页 |
2.4.11 5%浓缩胶(2ml) | 第17-18页 |
2.4.12 2.0%琼脂糖凝胶 | 第18页 |
2.5 实验方法 | 第18-27页 |
2.5.1 人视网膜色素上皮细胞 ARPE-19 细胞培养 | 第18-19页 |
2.5.2 过氧化氢(H_2O_2)体外培养建立 ARPE-19 细胞氧化应激损伤模型 | 第19页 |
2.5.3 实验分组及药物干预处理 | 第19-20页 |
2.5.4 WST-1 实验检测绿原酸对 ARPE-19 细胞活力的影响 | 第20页 |
2.5.5 WST-1 实验检测绿原酸对氧化应激损伤 ARPE-19 细胞活力的影响 | 第20页 |
2.5.6 流式细胞仪检测每个实验组的细胞凋亡率 | 第20-21页 |
2.5.7 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各实验组细胞 Bcl-2 基因及Caspase-3 基因表达 | 第21-24页 |
2.5.8 蛋白印记法(Western blot)检测各实验组细胞 Bcl-2 及 Caspase-3蛋白表达 | 第24-26页 |
2.5.9 灰度值和统计学分析 | 第26-27页 |
第3章 实验结果 | 第27-34页 |
3.1 绿原酸对 ARPE-19 细胞毒性的影响 | 第27-28页 |
3.2 绿原酸对氧化应激损伤 ARPE-19 细胞活力的影响 | 第28-29页 |
3.3 采用流式细胞仪检测每个实验组 ARPE-19 细胞的凋亡率 | 第29-31页 |
3.4 通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测每个实验组细胞的 Bcl-2 和Caspase-3 基因表达水平 | 第31-32页 |
3.5 通过蛋白印记法(Western blot)检测每个实验组细胞的 Bcl-2 和Caspase-3 蛋白表达水平 | 第32-34页 |
第4章 讨论 | 第34-39页 |
4.1 年龄相关性黄斑变性 | 第34页 |
4.2 氧化应激与细胞凋亡 | 第34-36页 |
4.3 ARPE-19 细胞氧化应激损伤模型的建立 | 第36-37页 |
4.4 绿原酸对氧化应激损伤人视网膜色素上皮 ARPE-19 细胞的保护作用及机制 | 第37-39页 |
第5章 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
综述 | 第46-53页 |
参考文献 | 第51-53页 |