中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
1 引言 | 第12-34页 |
·SARS 冠状病毒(SARS-COV)简介 | 第12-24页 |
·趋化因子的研究进展 | 第24-32页 |
·哺乳动物细胞表达系统简介 | 第32-34页 |
2 材料和方法 | 第34-53页 |
·试验材料 | 第34-37页 |
·菌株细胞 | 第34页 |
·载体 | 第34页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34-35页 |
·试验所用溶液及其配制 | 第35-37页 |
·试验方法 | 第37-53页 |
·真核表达载体pEGFP-N1/SARS-COVN 的构建 | 第37-44页 |
·真核表达载体pdsRed2-N1/CXCL16 的构建 | 第44页 |
·真核表达载体pcDNA3.1HisA/SARS-COVN-GFP 的构建 | 第44页 |
·组织RNA 的提取 | 第44-45页 |
·CXCL12 基因的RT-PCR 扩增 | 第45-46页 |
·CXCR4 基因基因的扩增 | 第46页 |
·GP5 基因片段的扩增 | 第46页 |
·pcDNA3.1-CXCL12 重组质粒的构建与鉴定 | 第46页 |
·重组质粒pcDNA3.1-CXCR4 的构建 | 第46-47页 |
·重组质粒pEGFP-N1- GP5 的构建 | 第47页 |
·真核表达载体pcDNA3.1HisA/SARS-COVN-GFP的转染及SARS-COVN-GFP 融合蛋白的表达纯化 | 第47-49页 |
·表达产物的亚细胞定位检测 | 第49-50页 |
·重组质粒pcDNA3.1-CXCR4、pcDNA3.1-CXCL12 和pEGFP-N1-GP5 转染293FT 细胞 | 第50页 |
·IFA 检测猪CXCR4 和CXCL12 的瞬时表达 | 第50-51页 |
·GP5 在细胞外与表达的CXCR4 结合的实验 | 第51页 |
·CXCL12 融合蛋白的表达纯化及Westernblot 鉴定 | 第51页 |
·微孔隔离小室( Transwell)检测表达的重组CXCL12 蛋白的趋化活性 | 第51-52页 |
·微孔隔离小室( Transwell)检测表达的CXCL12 蛋白对不同种属的单个核细胞的趋化能力 | 第52-53页 |
3 结果 | 第53-66页 |
·基因的扩增 | 第53-56页 |
·CXCL16、SARS-COVN、SARS-COVN-GFP 基因的扩增 | 第53-54页 |
·CXCR4 基因的RT-PCR 扩增 | 第54页 |
·CXCL12 基因的RT-PCR 扩增 | 第54-55页 |
·GP5 基因的扩增 | 第55-56页 |
·重组质粒的构建和酶切鉴定 | 第56-58页 |
·pEGFP-N1/SARS-COVN、pdsRed2-N1/CXCL16、pcDNA3.1HisA-/SARS-COVN-GFP 的构建和鉴定 | 第56-57页 |
·重组质粒pcDNA3.1-CXCR4 和pcDNA3.1-CXCL12 的构建与鉴定 | 第57页 |
·重组质粒pEGFP-N1- GP5 的构建 | 第57-58页 |
·SARS-COVN-GFP 融合蛋白的检测 | 第58页 |
·CXCL16 和SARS-COVN 在293FT 细胞中存在共定位 | 第58-60页 |
·SARS-COVN 在细胞外与表达的CXCL16 结合与定位 | 第60-61页 |
·重组质粒pcDNA3.1-CXCR4 瞬时表达的IFA 检测 | 第61-62页 |
·重组质粒pEGFP-N1- GP5 的瞬时表达 | 第62页 |
·GP5 在细胞外与表达的CXCR4 结合的实验 | 第62-63页 |
·重组质粒pcDNA3.1-CXCL12 瞬时表达的IFA 检测 | 第63-64页 |
·纯化的CXCL12 融合蛋白的Westernblot检测 | 第64页 |
·重组CXCL12 蛋白趋化活性的检测 | 第64-66页 |
4 讨论 | 第66-69页 |
·CXCL16 与SARS-CoV N 蛋白在细胞内外相互作用的研究 | 第66-67页 |
·CXCL12 和CXCR4 的真核表达 | 第67-69页 |
5 结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
个人简介 | 第80页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第80页 |