| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 诱导多能干细胞形成机制的研究 | 第12-13页 |
| 1.2 iPS 细胞诱导体系的建立 | 第13-14页 |
| 1.3 受体细胞的选取 | 第14-15页 |
| 1.4 诱导细胞重编程的多种方式 | 第15-20页 |
| 1.4.1 使用传统的病毒性载体及腺病毒载体诱导 iPS 细胞 | 第15-16页 |
| 1.4.2 使用改进的病毒性载体诱导 iPS 细胞 | 第16-17页 |
| 1.4.3 使用 piggyBac 转座子诱导 iPS 细胞 | 第17页 |
| 1.4.4 使用质粒载体诱导 iPS 细胞 | 第17-18页 |
| 1.4.5 使用蛋白质诱导 iPS 细胞 | 第18-19页 |
| 1.4.6 使用 mRNA 诱导 iPS 细胞 | 第19页 |
| 1.4.7 采用 miRNA 诱导 iPS 细胞 | 第19-20页 |
| 1.5 提高 iPS 细胞诱导效率的方法 | 第20-23页 |
| 1.5.1 表观遗传途径调控 | 第21-22页 |
| 1.5.2 细胞信号通路途径调控 | 第22-23页 |
| 1.6 iPS 细胞存在的问题及展望 | 第23-26页 |
| 1.6.1 iPS 细胞存在的主要问题 | 第23-24页 |
| 1.6.2 iPS 细胞的应用及展望 | 第24-26页 |
| 2 病毒包装体系的优化及病毒滴度的测定 | 第26-41页 |
| 2.1 材料与方法 | 第26-32页 |
| 2.1.1 材料与仪器 | 第26页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 实验所用溶液 | 第26-27页 |
| 2.1.4 感受态的制备 | 第27页 |
| 2.1.5 质粒的转化及提取 | 第27-28页 |
| 2.1.6 293T 细胞的复苏 | 第28-29页 |
| 2.1.7 293T 细胞的传代培养 | 第29页 |
| 2.1.8 磷酸钙法制备病毒的优化 | 第29-31页 |
| 2.1.9 使用 QuickShuttle 转染试剂制备病毒及相关优化 | 第31页 |
| 2.1.10 病毒滴度的测定 | 第31-32页 |
| 2.1.11 数据分析 | 第32页 |
| 2.2 结果与分析 | 第32-39页 |
| 2.2.1 293T 细胞的复苏 | 第32页 |
| 2.2.2 磷酸钙法制备病毒的优化 | 第32-36页 |
| 2.2.3 使用 QuickShuttle 转染试剂制备病毒及相关优化 | 第36-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 3 人 iPS 细胞的诱导 | 第41-55页 |
| 3.1 材料与方法 | 第41-46页 |
| 3.1.1 材料与仪器 | 第41页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 3.1.3 实验所用溶液 | 第42页 |
| 3.1.4 hFFCs 的原代培养 | 第42-43页 |
| 3.1.5 hFFCs 的传代培养及冻存 | 第43-44页 |
| 3.1.6 MEFs 的原代培养和传代培养 | 第44页 |
| 3.1.7 饲养层的制备 | 第44-45页 |
| 3.1.8 病毒感染 hFFCs | 第45-46页 |
| 3.1.9 重编程过程的观察 | 第46页 |
| 3.2 结果与分析 | 第46-52页 |
| 3.2.1 hFFCs 的原代培养 | 第46-47页 |
| 3.2.2 hFFCs 的传代培养及冻存 | 第47-48页 |
| 3.2.3 MEFs 的原代培养及传代培养 | 第48-49页 |
| 3.2.4 饲养层的制备 | 第49-50页 |
| 3.2.5 病毒感染 hFFCs | 第50-52页 |
| 3.2.6 重编程过程的观察 | 第52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-54页 |
| 3.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 附录A 主要仪器设备 | 第66-68页 |
| 在学研究成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
