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小麦CO-like基因TaCO9的克隆、表达分析及功能标记开发

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 综述第11-24页
    1.1 小麦重要基因克隆第11-13页
    1.2 植物成花相关基因研究第13-18页
        1.2.1 拟南芥 CONSTANS 基因第14-15页
        1.2.2 拟南芥 FT 基因第15页
        1.2.3 小麦 Ppd-1 基因第15-16页
        1.2.4 小麦 Hd1 基因(拟南芥 COSTANS 同源基因)第16-17页
        1.2.5 春化途径第17-18页
    1.3 比较基因组学第18-22页
        1.3.1 比较基因组学研究第18-20页
        1.3.2 禾本科植物的比较基因组学研究第20-22页
    1.4 本研究的目的及意义第22-23页
    1.5 本研究的技术路线图第23-24页
第二章 小麦 CO-like 基因 TaCO9 的克隆与序列分析第24-37页
    2.1 实验材料与仪器第24-25页
        2.1.1 材料第24页
        2.1.2 试剂及常用耗材第24页
        2.1.3 仪器设备第24页
        2.1.4 引物设计与合成第24-25页
    2.2 小麦 TaCO9 基因的克隆第25-29页
        2.2.1 基因组 DNA 的提取第25页
        2.2.2 小麦总 RNA 提取第25-26页
        2.2.3 cDNA 合成第26页
        2.2.4 TaCO9 基因克隆第26-29页
    2.3 结果与分析第29-35页
        2.3.1 目的片段的 PCR 扩增第29-30页
        2.3.2 目的基因测序结果第30-34页
        2.3.3 TaCO9 基因的结构和功能预测第34-35页
    2.4 讨论第35-37页
第三章 小麦 TaCO9 基因的空间结构预测及系统进化分析第37-41页
    3.1 实验方法第37页
    3.2 结果与分析第37-40页
    3.3 讨论第40-41页
第四章 TaCO9 基因的表达分析第41-47页
    4.1 实验材料第41页
    4.2 表达载体、表达菌株及荧光染料第41页
    4.3 小麦 TaCO9 基因的原核表达第41-43页
        4.3.1 原核表达引物的设计第41页
        4.3.2 PCR 扩增第41页
        4.3.3 抽提重组 T 质粒(碱裂解法)第41-42页
        4.3.4 pEASY-E1 载体连接第42页
        4.3.5 重组子鉴定第42页
        4.3.6 转化 DE3 表达菌株第42页
        4.3.7 IPTG 诱导表达第42-43页
        4.3.8 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第43页
    4.4 小麦 TaCO9 基因在不同组织中表达第43-44页
        4.4.1 实时定量引物的设计第43页
        4.4.2 cDNA 的合成第43页
        4.4.3 PCR 扩增第43-44页
    4.5 结果与分析第44-45页
        4.5.1 小麦 TaCO9 基因原核表达载体的构建及重组子鉴定第44页
        4.5.2 目的基因表达产物的 SDS-PAGE 分析第44-45页
        4.5.3 小麦 TaCO9 基因在不同组织中的表达情况第45页
    4.6 讨论第45-47页
第五章 小麦 TaCO9 基因突变位点的发现及功能标记开发第47-53页
    5.1 实验材料第47页
    5.2 TaCO9 功能标记的设计与应用第47-48页
        5.2.1 基因组 DNA 的提取第47页
        5.2.2 宁春 4 号与西农 889 对比测序第47页
        5.2.3 突变位点染色体定位第47页
        5.2.4 TaCO9 基因等位变异分布及其与性状的关联第47-48页
        5.2.5 功能标记验证第48页
    5.3 结果与分析第48-51页
        5.3.1 宁春 4 号与西农 889 TaCO9 基因核酸序列差异第48-49页
        5.3.2 TaCO9 基因突变序列的染色体定位第49页
        5.3.3 功能标记的设计及运用第49-50页
        5.3.4 基因型与表型统计第50-51页
        5.3.5 关联分析第51页
        5.3.6 功能标记验证第51页
    5.4 讨论第51-53页
第六章 结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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