| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 中英文对照和缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 细胞凋亡及凋亡免疫原性研究 | 第12-15页 |
| 1.1.1 细胞凋亡概念及其特征 | 第12页 |
| 1.1.2 关于凋亡免疫原性的传统研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 免疫原性凋亡及其特征 | 第13-15页 |
| 1.2 癌症及癌症治疗 | 第15-16页 |
| 1.2.1 癌症疾病现状 | 第15页 |
| 1.2.2 癌症治疗方法 | 第15-16页 |
| 1.2.3 免疫原性凋亡与肿瘤治疗 | 第16页 |
| 1.3 艰难梭菌及其毒素 | 第16-18页 |
| 1.3.1 艰难梭菌及其毒素 | 第16-17页 |
| 1.3.2 艰难梭菌毒素B的促凋亡特性 | 第17-18页 |
| 1.4 HSP及HSP与凋亡免疫原性 | 第18-19页 |
| 1.4.1 热激蛋白简介 | 第18页 |
| 1.4.2 热激蛋白的免疫学功能 | 第18-19页 |
| 1.5 研究意义和创新点 | 第19-20页 |
| 1.6 研究内容 | 第20页 |
| 1.7 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 TcdB引起的免疫原性凋亡体系中有HSPs的分泌 | 第21-33页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2.1 细胞和毒素 | 第21页 |
| 2.2.2 主要药品和试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 实验设备和耗材 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.3.1 溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.3.2 实验器皿的无菌处理 | 第24页 |
| 2.3.3 细胞复苏 | 第24-25页 |
| 2.3.4 细胞传代 | 第25页 |
| 2.3.5 细胞冻存 | 第25页 |
| 2.3.6 毒素处理细胞 | 第25页 |
| 2.3.7 细胞样品及上清样品收集和处理 | 第25-26页 |
| 2.3.8 western blot实验步骤 | 第26-27页 |
| 2.3.9 流式细胞仪检测HSPs外翻 | 第27页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第27-32页 |
| 2.4.1 TcdB在全细胞水平不引起HSPs表达的变化 | 第27-28页 |
| 2.4.2 TcdB引起HSP70，HSP90 的胞外分泌 | 第28-29页 |
| 2.4.3 TcdB的浓度不影响HSP70，HSP90 的分泌 | 第29-30页 |
| 2.4.4 HSP70 与HSP90 的后继分泌能力 | 第30-31页 |
| 2.4.5 TcdB不引起HSP70，HSP90 外翻到膜上 | 第31-32页 |
| 2.5 本章小结 | 第32-33页 |
| 第三章 HSPs影响凋亡CT26 细胞的免疫原性 | 第33-42页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.2.1 细胞、毒素及小鼠 | 第33页 |
| 3.2.2 主要的药品和试剂 | 第33-34页 |
| 3.2.3 主要实验设备及耗材 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.3.1 溶液的配制 | 第34-35页 |
| 3.3.2 实验器皿的无菌处理 | 第35页 |
| 3.3.3 细胞的复苏 | 第35页 |
| 3.3.4 细胞传代 | 第35页 |
| 3.3.5 细胞冻存 | 第35页 |
| 3.3.6 动物的随机编号 | 第35-36页 |
| 3.3.7 免疫小鼠的抗原准备及腹股沟注射小鼠 | 第36-37页 |
| 3.3.8 活细胞准备及背部皮下注射 | 第37页 |
| 3.3.9 肿瘤体积测定 | 第37页 |
| 3.3.10 DC细胞的分离 | 第37-38页 |
| 3.3.11 脾细胞的制备 | 第38页 |
| 3.3.12 肿瘤与DC共孵育体外激活T细胞 | 第38页 |
| 3.3.13 Elisa检测 | 第38-39页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第39-41页 |
| 3.4.1 HSP70 和HSP90 影响TcdB处理的肿瘤细胞的免疫原性 | 第39-40页 |
| 3.4.2 HSPs对于体外肿瘤与DC共孵育激活T细胞起作用 | 第40-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 HSPs影响DC成熟 | 第42-53页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料 | 第42-44页 |
| 4.2.1 细胞和毒素及小鼠 | 第42页 |
| 4.2.2 主要的药品和试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.3 实验设备与材料 | 第43-44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-46页 |
| 4.3.1 溶液的配制 | 第44页 |
| 4.3.2 实验材料和器皿的无菌处理 | 第44页 |
| 4.3.3 细胞复苏 | 第44页 |
| 4.3.4 细胞传代 | 第44页 |
| 4.3.5 细胞冻存 | 第44-45页 |
| 4.3.6 DC细胞的分离 | 第45页 |
| 4.3.7 DC吞噬实验样品准备及流式操作 | 第45页 |
| 4.3.8 DC成熟实验样品准备及流式操作 | 第45页 |
| 4.3.9 DC迁移实验样品准备及免疫荧光染色 | 第45-46页 |
| 4.3.10 免疫共沉淀 | 第46页 |
| 4.4 实验结果和讨论 | 第46-51页 |
| 4.4.1 HSPs不影响DC的吞噬 | 第46-47页 |
| 4.4.2 HSPS影响DC的成熟 | 第47-50页 |
| 4.4.3 HSPs不影响DC迁移 | 第50页 |
| 4.4.4 HSP70 能与DC表面的TLR4 相互作用 | 第50-51页 |
| 4.5 本章小结 | 第51-53页 |
| 结论与展望 | 第53-55页 |
| 结论 | 第53页 |
| 展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附件 | 第62页 |
