| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 问题的提出 | 第12页 |
| 1.2 研究背景 | 第12-22页 |
| 1.2.1 脑缺血 | 第12-13页 |
| 1.2.2 脑缺血与HIF1α,VEGF及NGF | 第13-22页 |
| 1.3 本文研究的主要内容、目标及方法 | 第22-23页 |
| 第2章 基于HIF1α,VEGF,NGF基因启动子的报告基因质粒的构建 | 第23-40页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 启动子的克隆 | 第24-26页 |
| 2.2.2 pHp1-E2,pHp2-E2,pNp-E2,pHp1-Luc,pHp2-Luc,pNp-Luc质粒的构建 | 第26-29页 |
| 2.2.3 pVp-E2,pVp-Luc质粒的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.4 重组子的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.5 质粒提取 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-39页 |
| 2.3.1 启动子的克隆 | 第34-36页 |
| 2.3.2 重组质粒的鉴定 | 第36-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第3章 以HIF1α,VEGF,NGF基因为靶点的药物筛选细胞模型的建立 | 第40-52页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-45页 |
| 3.2.1 细胞培养与转染 | 第40-41页 |
| 3.2.2 细胞冻存与复苏 | 第41-42页 |
| 3.2.3 稳定细胞株的筛选 | 第42-43页 |
| 3.2.4 细胞荧光强度检测 | 第43页 |
| 3.2.5 细胞荧光素酶活性检测 | 第43-44页 |
| 3.2.6 细胞模型的功能鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-50页 |
| 3.3.1 重组质粒的功能研究 | 第45页 |
| 3.3.2 稳定细胞株的建立 | 第45-46页 |
| 3.3.3 细胞模型的功能鉴定 | 第46-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第4章 中药单体的活性筛选 | 第52-58页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第52-53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-54页 |
| 4.2.1 药物单体的细胞毒性检测 | 第53-54页 |
| 4.2.2 药物单体诱导的基因转录活性测定 | 第54页 |
| 4.3 实验结果 | 第54-57页 |
| 4.3.1 待测单体的细胞毒性 | 第54-56页 |
| 4.3.2 待测单体对基因转录活性的影响 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第72页 |
