| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| 1 AGR2基因及蛋白简介 | 第13-18页 |
| 1.1 AGR2因的发现和结构 | 第13-14页 |
| 1.2 AGR2蛋白的结构、定位和表达 | 第14-17页 |
| 1.3 AGR2蛋白的相互作用分子 | 第17-18页 |
| 2 AGR2蛋白的生物学功能 | 第18-23页 |
| 2.1 AGR2蛋白在发育和疾病中的作用 | 第18-19页 |
| 2.2 AGR2蛋白在肿瘤中的作用 | 第19-21页 |
| 2.3 AGR2蛋白发挥作用涉及的信号通路 | 第21-23页 |
| 3 AGR2在肿瘤诊断中的应用前景 | 第23-25页 |
| 3.1 检测血液和尿液中的AGR2 | 第23-24页 |
| 3.2 适配体技术鉴定AGR2 | 第24页 |
| 3.3 AGR2相关的免疫治疗 | 第24-25页 |
| 4 基因表达谱芯片简介 | 第25-30页 |
| 4.1 原理 | 第25-26页 |
| 4.2 基因芯片在肿瘤研究中的意义 | 第26-30页 |
| 4.2.1 基因芯片用于预后判断 | 第27页 |
| 4.2.2 基因芯片用于肿瘤的分子分型 | 第27-28页 |
| 4.2.3 基因芯片用于抗肿瘤药物筛选 | 第28-30页 |
| 第二章 材料和方法 | 第30-44页 |
| 1 实验材料 | 第30-36页 |
| 1.1 细胞株 | 第30页 |
| 1.2 菌种与质粒 | 第30页 |
| 1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 1.4 主要仪器 | 第31-33页 |
| 1.5 主要溶液 | 第33-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-44页 |
| 2.1 质粒构建和蛋白表达 | 第36页 |
| 2.2 AGR2蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| 2.3 考马斯亮蓝染色 | 第37-38页 |
| 2.4 细胞培养 | 第38页 |
| 2.5 RTCA实验 | 第38-39页 |
| 2.6 Western Blot实验 | 第39-40页 |
| 2.7 免疫组织化学染色 | 第40-41页 |
| 2.8 RNA的抽提 | 第41-42页 |
| 2.9 基因表达谱芯片 | 第42-43页 |
| 2.10 实时荧光定量PCR | 第43-44页 |
| 第二章 结果分析与讨论 | 第44-63页 |
| 1 pGEX4T-1-△SP-AGR2质粒的构建和原核表达 | 第44-47页 |
| 1.1 pGEX4T-1-△SP-AGR2质粒构建 | 第44-45页 |
| 1.2 测序验证 | 第45-46页 |
| 1.3 GST-AGR2融合蛋白的纯化及GST标签的切除 | 第46-47页 |
| 2 IHC证实AGR2在乳腺癌组织中高表达 | 第47-48页 |
| 3 RTCA结果分析 | 第48-53页 |
| 3.1 抑制剂SB203580与AGR2蛋白 | 第50-51页 |
| 3.2 抑制剂GSK690693与AGR2蛋白 | 第51-52页 |
| 3.3 抑制剂H-89与AGR2蛋白 | 第52-53页 |
| 4 Western blot结果分析 | 第53-54页 |
| 5 表达谱芯片的结果分析 | 第54-63页 |
| 5.1 RNA质检结果 | 第54-55页 |
| 5.2 Q-RT-PCR验证 | 第55-57页 |
| 5.3 差异基因聚类分析 | 第57-59页 |
| 5.4 差异基因GO分析 | 第59-60页 |
| 5.5 差异基因相关性分析 | 第60-63页 |
| 第四章 总结与展望 | 第63-64页 |
| 1 总结 | 第63页 |
| 2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
