摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩写词表 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-33页 |
1.1 木质纤维素的开发利用 | 第13-14页 |
1.2 纤维素的结构 | 第14页 |
1.3 纤维素的微生物降解 | 第14-22页 |
1.3.1 纤维素降解微生物 | 第14-16页 |
1.3.2 纤维素降解策略 | 第16-20页 |
1.3.3 纤维素吸附 | 第20-22页 |
1.4 滑动 | 第22-25页 |
1.4.1 Myxococcus xanthus | 第22-23页 |
1.4.2 Flavobacterium johnsoniae | 第23-25页 |
1.5 Cytophaga hutchinsonii研究背景 | 第25-30页 |
1.5.1 Cytophaga hutchinsonii的系统发育及特性 | 第25-27页 |
1.5.2 C. hutchinsonii的研究进展 | 第27-30页 |
1.6 论文的立题和工作思路 | 第30-33页 |
第二章 C. HUTCHINSONII滑动和纤维素降解突变株的筛选 | 第33-45页 |
2.1 材料和方法 | 第33-40页 |
2.1.1 菌种 | 第33页 |
2.1.2 培养基及缓冲液 | 第33-34页 |
2.1.3 主要试剂与仪器 | 第34-35页 |
2.1.4 实验操作过程中用到的质粒与引物 | 第35页 |
2.1.5 Tn4351接合转化 | 第35-36页 |
2.1.6 C. hutchinsonii在软琼脂表面的扩散 | 第36页 |
2.1.7 C. hutchinsonii在滤纸表面的降解 | 第36页 |
2.1.8 E. coli感受态制备及热激转化 | 第36-37页 |
2.1.9 分子生物学基本操作及常用反应体系 | 第37-38页 |
2.1.10 反向PCR | 第38-39页 |
2.1.11 蛋白序列分析软件 | 第39-40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-42页 |
2.2.1 C. hutchinsonii的接合转化 | 第40页 |
2.2.2 突变子表型筛选 | 第40-41页 |
2.2.3 Tn4351插入位点确定 | 第41-42页 |
2.2.4 Tn4351插入位点基因分析 | 第42页 |
2.3 总结与讨论 | 第42-45页 |
2.3.1 C. hutchinsonii接合转化 | 第43页 |
2.3.2 突变子表型分析 | 第43-45页 |
第三章 CHU_1798的功能研究 | 第45-74页 |
3.1 材料和方法 | 第45-55页 |
3.1.1 菌种 | 第45页 |
3.1.2 培养基与缓冲液 | 第45-46页 |
3.1.3 试剂与仪器 | 第46-47页 |
3.1.4 实验用到的质粒与引物 | 第47-48页 |
3.1.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第48-49页 |
3.1.6 蛋白浓度测定-考马斯亮蓝法 | 第49页 |
3.1.7 C. hutchinsonii感受态细胞的制备及电击转化 | 第49-50页 |
3.1.8 C. hutchinsonii生长曲线测定 | 第50页 |
3.1.9 菌体对结晶纤维素Avicel PH101吸附率的测定 | 第50-51页 |
3.1.10 C. hutchinsonii在软、硬琼脂表面的扩散 | 第51页 |
3.1.11 显微观察C. hutchinsonii在软琼脂表面的菌落扩散 | 第51页 |
3.1.12 显微观察C. hutchinsonii在玻璃表面的滑动 | 第51-52页 |
3.1.13 C. hutchinsonii在硬琼脂滤纸表面的降解 | 第52页 |
3.1.14 C. hutchinsonii在软琼脂滤纸表面的降解 | 第52页 |
3.1.15 双层平板检测C. hutchinsonii纤维素降解试验 | 第52页 |
3.1.16 扫描电镜观察C. hutchinsonii在纤维素纤维上的排列 | 第52-53页 |
3.1.17 C. hutchinsoni总RNA的提取与反转录 | 第53页 |
3.1.18 菌体表面纤维素酶活测定 | 第53-54页 |
3.1.19 胞外分泌蛋白的SDS-PAGE | 第54页 |
3.1.20 C. hutchinsonii全膜蛋白与纤维素外膜吸附蛋白的SDS-PAGE | 第54-55页 |
3.1.21 蛋白序列分析软件 | 第55页 |
3.2 结果及分析 | 第55-71页 |
3.2.1 CHU_1798基因的敲除及敲除验证 | 第55-56页 |
3.2.2 RT-PCR分析CHU_1798敲除产生的极性效应 | 第56-58页 |
3.2.3 CHU_1798敲除株的表型测定 | 第58-65页 |
3.2.4 CHU_1798及临近基因分析 | 第65-66页 |
3.2.5 CHU_1798蛋白序列分析 | 第66-68页 |
3.2.6 探究C. hutchinsonii滑动与纤维素降解的关系 | 第68-71页 |
3.3 总结与讨论 | 第71-74页 |
3.3.1 CHU_1798影响C. hutchinsonii的菌落扩散运动及单个菌体在玻璃表面的运动关键基因 | 第71-72页 |
3.3.2 C. hutchinsonii的运动机制分析 | 第72页 |
3.3.3 C. hutchinsonii的滑动能力不影响菌体的纤维素降解,影响在纤维素纤维上的定植过程 | 第72-74页 |
全文总结及展望 | 第74-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
在读期间论文发表情况 | 第83-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第86页 |