| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号与缩略语说明 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 第一节 三苯甲烷类染料及孔雀石绿简介 | 第13-18页 |
| 1 三苯甲烷类染料概述 | 第13-14页 |
| 2 三苯甲烷类染料污染及危害 | 第14-15页 |
| 3 孔雀石绿的结构、性质及用途 | 第15-16页 |
| 4 孔雀石绿的危害 | 第16-17页 |
| 5 孔雀石绿及关联产物的检测 | 第17-18页 |
| 5.1 分光光度法 | 第17页 |
| 5.2 高效液相色谱法 | 第17-18页 |
| 5.3 高效液相色谱-质谱法 | 第18页 |
| 第二节 三苯甲烷类染料及孔雀石绿的降解研究进展 | 第18-22页 |
| 1 吸附法 | 第18-19页 |
| 2 光催化氧化 | 第19-20页 |
| 3 生物法 | 第20-21页 |
| 3.1 具有降解脱色能力的真菌 | 第20页 |
| 3.2 具有降解脱色能力的细菌 | 第20-21页 |
| 3.3 降解脱色混合菌 | 第21页 |
| 4 微生物降解三苯甲烷类染料的展望 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 第二章 孔雀石绿降解菌的分离、鉴定及其降解特性研究 | 第27-49页 |
| 第一节 孔雀石绿降解菌株K4-W和K9的分离与鉴定 | 第27-41页 |
| 1 材料与方法 | 第27-29页 |
| 1.1 培养基与试剂 | 第27页 |
| 1.2 孔雀石绿降解菌的分离 | 第27-28页 |
| 1.3 降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第28页 |
| 1.4 降解菌株16S rRNA基因序列的测定 | 第28-29页 |
| 1.5 降解菌株系统发育地位的确定 | 第29页 |
| 1.6 菌体生长量的测定 | 第29页 |
| 1.7 孔雀石绿的含量测定 | 第29页 |
| 2 结果与讨论 | 第29-40页 |
| 2.1 孔雀石绿降解菌株的分离 | 第29-30页 |
| 2.2 降解菌株K4-W和K9的菌落形态及生理生化特征 | 第30-31页 |
| 2.3 菌株K4-W和K9的16S rRNA基因扩增 | 第31-32页 |
| 2.4 降解菌株K4-W和K9的鉴定结果 | 第32-34页 |
| 2.5 环境条件对降解菌株K4-W和K9生长的影响 | 第34-39页 |
| 2.6 菌株K4-W和K9对抗生素的耐受性 | 第39-40页 |
| 3 小结 | 第40-41页 |
| 第二节 孔雀石绿降解菌株K4-W和K9的降解特性研究 | 第41-47页 |
| 1 材料与方法 | 第41页 |
| 1.1 培养基与试剂 | 第41页 |
| 1.2 菌体生长量的测定 | 第41页 |
| 1.3 孔雀石绿及其他染料的含量测定 | 第41页 |
| 1.4 种子液培养 | 第41页 |
| 2 结果与讨论 | 第41-47页 |
| 2.1 菌株K4-W和K9的生长和孔雀石绿降解的关系 | 第41-42页 |
| 2.2 孔雀石绿起始浓度对K4-W和K9降解孔雀石绿的影响 | 第42-43页 |
| 2.3 温度对K4-W和K9降解孔雀石绿的影响 | 第43-44页 |
| 2.4 接种量对K4-W和K9降解孔雀石绿的影响 | 第44-45页 |
| 2.5 金属离子对K4.W和K9降解孔雀石绿的影响 | 第45-46页 |
| 2.6 K4-W和K9对不同染料的降解情况 | 第46-47页 |
| 3 小结 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 三苯甲烷还原酶基因(tmr2)的克隆及表达 | 第49-63页 |
| 1 材料和方法 | 第49-54页 |
| 1.1 培养基与试剂 | 第49页 |
| 1.2 菌株与质粒 | 第49-50页 |
| 1.3 菌体基因组DNA的提取 | 第50页 |
| 1.4 质粒DNA的小量提取 | 第50-51页 |
| 1.5 普通感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第51页 |
| 1.6 三苯甲烷还原酶基因的引物设计和PCR扩增 | 第51-52页 |
| 1.7 PCR产物的纯化及酶切 | 第52页 |
| 1.8 表达载体pET29a的制备 | 第52页 |
| 1.9 酶连及酶连产物的转化 | 第52-53页 |
| 1.10 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第53页 |
| 1.11 酶活分析 | 第53-54页 |
| 2 结果与讨论 | 第54-60页 |
| 2.1 PCR法克隆三苯甲烷还原酶基因 | 第54-55页 |
| 2.2 序列测定与比较分析 | 第55页 |
| 2.3 tmr2基因在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第55-60页 |
| 3 小结 | 第60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 第四章 三苯甲烷还原酶基因(tmr2)的侧翼序列扩增及分析 | 第63-69页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| 1.1 培养基与试剂 | 第63页 |
| 1.2 菌株与质粒 | 第63页 |
| 1.3 菌体基因组DNA和质粒DNA的提取 | 第63-64页 |
| 1.4 侧翼序列SEFA-PCR引物设计和PCR扩增 | 第64-65页 |
| 1.5 PCR产物的TA克隆 | 第65页 |
| 1.6 序列分析 | 第65页 |
| 2 结果与讨论 | 第65-66页 |
| 2.1 tmr2基因侧翼序列的扩增及分析 | 第65-66页 |
| 3 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 全文总结 | 第69-71页 |
| 附录一 文中所用培养基及试剂配方 | 第71-73页 |
| 附录二 相关DNA序列 | 第73-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表或已接收的论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
