摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第9-29页 |
1.1 橡胶草的生物学研究现状 | 第9-13页 |
1.1.1 橡胶草的形态研究 | 第9-10页 |
1.1.2 橡胶草的栽培研究 | 第10页 |
1.1.3 橡胶草的染色体研究 | 第10页 |
1.1.4 橡胶草乳管系统的研究 | 第10-11页 |
1.1.5 橡胶草的生理及产胶机制研究 | 第11-12页 |
1.1.6 橡胶草的分子生物学研究现状 | 第12-13页 |
1.2 高等植物3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)的研究进展 | 第13-26页 |
1.2.1 HMG-CoA还原酶的重要作用 | 第13-15页 |
1.2.2 HMG-CoA还原酶的结构特征 | 第15-17页 |
1.2.3 HMG-CoA还原酶的克隆研究 | 第17-19页 |
1.2.4 植物HMGR基因的差别表达及其与植物类异戊二烯代谢途径的关系 | 第19-21页 |
1.2.5 HMG-CoA还原酶的调控 | 第21-26页 |
1.3 基因表达的定量分析方法 | 第26-27页 |
1.3.1 RNA印迹 | 第26页 |
1.3.2 核糖核酸酶保护分析 | 第26页 |
1.3.3 实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
1.3.4 cDNA微阵列技术 | 第27页 |
1.3.5 蛋白质印迹 | 第27页 |
1.4 定量分析中内参基因的选用 | 第27-28页 |
1.5 本项研究的目的和意义 | 第28页 |
1.6 本项研究的技术路线 | 第28-29页 |
2 材料和方法 | 第29-45页 |
2.1 材料与试剂 | 第29页 |
2.1.1 植物材料 | 第29页 |
2.1.2 质粒与菌种 | 第29页 |
2.1.3 生化试剂 | 第29页 |
2.2 方法与步骤 | 第29-41页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第29-31页 |
2.2.2 总RNA中微量DNA的去除 | 第31页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第31-32页 |
2.2.4 HMGR保守区域的扩增 | 第32-35页 |
2.2.5 3' -cDNA末端扩增 | 第35-37页 |
2.2.6 5' -cDNA末端扩增 | 第37-40页 |
2.2.7 HMGR全长的克隆 | 第40-41页 |
2.3 橡胶草HMGR基因生物信息学分析 | 第41-43页 |
2.3.1 HMGR基因全长cDNA序列分析 | 第41-42页 |
2.3.2 HMGR蛋白质生物信息学分析 | 第42-43页 |
2.4 橡胶草HMGR基因组织表达分析 | 第43-45页 |
2.4.1 根、叶、花梗、花、种子的RNA提取及浓度测定 | 第43页 |
2.4.2 18S基因及HMGR基因标准曲线制作 | 第43-45页 |
3 结果与分析 | 第45-69页 |
3.1 RNA的提取 | 第45-46页 |
3.2 HMGR基因的克隆 | 第46-49页 |
3.2.1 HMGR基因的保守区扩增及分析 | 第46-47页 |
3.2.2 HMGR基因3' RACE扩增 | 第47-48页 |
3.2.3 HMGR基因5' RACE扩增 | 第48页 |
3.2.4 HMGR基因全长的克隆 | 第48-49页 |
3.3 HMGR基因的生物信息学分析 | 第49-64页 |
3.3.1 HMGR基因全长序列分析 | 第49-56页 |
3.3.2 HMGR蛋白质生物信息学分析 | 第56-64页 |
3.4 橡胶草HMGR基因的组织表达分析 | 第64-69页 |
3.4.1 橡胶草组织RNA提取及含量测定 | 第64-65页 |
3.4.2 18S及HMGR基因标准曲线的制作 | 第65-67页 |
3.4.3 HMGR基因组织表达实时定量PCR分析 | 第67-69页 |
4 讨论 | 第69-71页 |
4.1 关于橡胶草的研究 | 第69页 |
4.2 关于HMGR的功能 | 第69-70页 |
4.3 橡胶草今后的研究展望 | 第70-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
附录 | 第80-83页 |
致谢 | 第83页 |