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橡胶草HMGR基因的克隆及表达分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 前言第9-29页
    1.1 橡胶草的生物学研究现状第9-13页
        1.1.1 橡胶草的形态研究第9-10页
        1.1.2 橡胶草的栽培研究第10页
        1.1.3 橡胶草的染色体研究第10页
        1.1.4 橡胶草乳管系统的研究第10-11页
        1.1.5 橡胶草的生理及产胶机制研究第11-12页
        1.1.6 橡胶草的分子生物学研究现状第12-13页
    1.2 高等植物3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)的研究进展第13-26页
        1.2.1 HMG-CoA还原酶的重要作用第13-15页
        1.2.2 HMG-CoA还原酶的结构特征第15-17页
        1.2.3 HMG-CoA还原酶的克隆研究第17-19页
        1.2.4 植物HMGR基因的差别表达及其与植物类异戊二烯代谢途径的关系第19-21页
        1.2.5 HMG-CoA还原酶的调控第21-26页
    1.3 基因表达的定量分析方法第26-27页
        1.3.1 RNA印迹第26页
        1.3.2 核糖核酸酶保护分析第26页
        1.3.3 实时荧光定量PCR第26-27页
        1.3.4 cDNA微阵列技术第27页
        1.3.5 蛋白质印迹第27页
    1.4 定量分析中内参基因的选用第27-28页
    1.5 本项研究的目的和意义第28页
    1.6 本项研究的技术路线第28-29页
2 材料和方法第29-45页
    2.1 材料与试剂第29页
        2.1.1 植物材料第29页
        2.1.2 质粒与菌种第29页
        2.1.3 生化试剂第29页
    2.2 方法与步骤第29-41页
        2.2.1 RNA的提取第29-31页
        2.2.2 总RNA中微量DNA的去除第31页
        2.2.3 cDNA第一链的合成第31-32页
        2.2.4 HMGR保守区域的扩增第32-35页
        2.2.5 3' -cDNA末端扩增第35-37页
        2.2.6 5' -cDNA末端扩增第37-40页
        2.2.7 HMGR全长的克隆第40-41页
    2.3 橡胶草HMGR基因生物信息学分析第41-43页
        2.3.1 HMGR基因全长cDNA序列分析第41-42页
        2.3.2 HMGR蛋白质生物信息学分析第42-43页
    2.4 橡胶草HMGR基因组织表达分析第43-45页
        2.4.1 根、叶、花梗、花、种子的RNA提取及浓度测定第43页
        2.4.2 18S基因及HMGR基因标准曲线制作第43-45页
3 结果与分析第45-69页
    3.1 RNA的提取第45-46页
    3.2 HMGR基因的克隆第46-49页
        3.2.1 HMGR基因的保守区扩增及分析第46-47页
        3.2.2 HMGR基因3' RACE扩增第47-48页
        3.2.3 HMGR基因5' RACE扩增第48页
        3.2.4 HMGR基因全长的克隆第48-49页
    3.3 HMGR基因的生物信息学分析第49-64页
        3.3.1 HMGR基因全长序列分析第49-56页
        3.3.2 HMGR蛋白质生物信息学分析第56-64页
    3.4 橡胶草HMGR基因的组织表达分析第64-69页
        3.4.1 橡胶草组织RNA提取及含量测定第64-65页
        3.4.2 18S及HMGR基因标准曲线的制作第65-67页
        3.4.3 HMGR基因组织表达实时定量PCR分析第67-69页
4 讨论第69-71页
    4.1 关于橡胶草的研究第69页
    4.2 关于HMGR的功能第69-70页
    4.3 橡胶草今后的研究展望第70-71页
5 结论第71-72页
参考文献第72-80页
附录第80-83页
致谢第83页

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