| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 1. 前言 | 第14-16页 |
| 2. 材料与方法 | 第16-31页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-31页 |
| 2.2.1 星形胶质细胞的培养和Mettl9基因的克隆 | 第17-19页 |
| 2.2.2 RT-PCR | 第19-20页 |
| 2.2.3 pGEM~(?)-T-Mettl9 Vector的构建 | 第20-24页 |
| 2.2.4 pLenti6.3-Mettl9-IRES-EGFP慢病毒过表达载体的构建与包装 | 第24-27页 |
| 2.2.5 Mettl9-RNAi干扰载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.6 Mettl9慢病毒过表达质粒感染和RNAi干扰质粒转染U251细胞 | 第28-30页 |
| 2.2.7 统计分析 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-41页 |
| 3.1 细胞培养和Mettl9基因的克隆 | 第31-34页 |
| 3.1.1 星形胶质细胞培养和鉴定 | 第31页 |
| 3.1.2 总RNA抽提结果 | 第31-32页 |
| 3.1.3 Mettl9基因的PCR扩增 | 第32页 |
| 3.1.4 重组质粒pGEM~(?)-T-Mettl9的双酶切鉴定结果 | 第32-33页 |
| 3.1.5 重组质粒pGEM~(?)-T-Mettl9的序列测定 | 第33-34页 |
| 3.2. 慢病毒过表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 3.2.1 慢病毒过表达载体的包装结果 | 第34页 |
| 3.2.2 慢病毒载体活性滴度测定结果 | 第34-35页 |
| 3.2.3 慢病毒载体pLenti6.3-Mettl9-IRES-EGFP的双酶切鉴定 | 第35页 |
| 3.2.4 慢病毒过表达载体pLenti6.3-Mettl9-IRES-EGFP的测序鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3 Mettl9-RNAi干扰载体的构建结果 | 第36-37页 |
| 3.3.1 干扰载体pGCSIL-GFP的酶切鉴定 | 第36页 |
| 3.3.2 Mettl9-RNAi干扰质粒菌落PCR鉴定 | 第36页 |
| 3.3.3 Mettl9-RNAi干扰质粒测序鉴定 | 第36-37页 |
| 3.4 慢病毒过表达质粒感染和干扰质粒转染U251细胞 | 第37-41页 |
| 3.4.1 慢病毒表达质粒感染U251细胞的表达效率 | 第37页 |
| 3.4.2 U251细胞转染Mettl9-RNAi干扰质粒表达效率 | 第37-38页 |
| 3.4.3 Mettl9在U251细胞的表达 | 第38页 |
| 3.4.4 不同表达水平Mettl9对Bcl-2、BAX表达的影响 | 第38-40页 |
| 3.4.5 MTT法检测细胞活力 | 第40页 |
| 3.4.6 细胞凋亡的检测 | 第40-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 综述 p53与miRNA相互作用的研究进展 | 第47-58页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第59页 |
