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树莓荧光原位杂交体系的建立及优化

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
1 前言第12-13页
2 树莓遗传标记和荧光原位杂交(FISH)技术研究进展第13-18页
   ·树莓植物遗传标记的研究进展第13-15页
     ·外观形态分类鉴定第13页
     ·染色体分类鉴定第13-14页
     ·花粉形态分类鉴定第14页
     ·分子标记鉴定第14-15页
   ·FISH技术应用进展第15-18页
     ·用于异源染色质的鉴定第15-16页
     ·用于构建染色体物理图谱第16页
     ·用于基因组进化的研究第16-17页
     ·FISH用于高度或中度重复DNA序列的鉴定第17页
     ·用于低拷贝或单拷贝DNA序列的鉴定第17-18页
3 目的与意义第18页
4 材料与方法第18-28页
   ·实验材料第18页
   ·主要仪器第18-19页
   ·主要试剂第19-20页
     ·试剂来源第19页
     ·主要试剂及配制第19-20页
   ·方法第20-28页
       ·解离过程相关因子的筛选第20-21页
     ·压片染色液的筛选第21页
     ·染色体固定方法的筛选第21页
     ·染色体标本变性温度和时间的筛选第21页
     ·蛋白酶K处理时间的筛选第21-22页
     ·杂交液探针浓度的筛选第22页
     ·杂交后洗脱强度的筛选第22页
     ·DAPI浓度的筛选第22页
     ·45S rDNA探针扩增体系的筛选第22-23页
     ·荧光原位杂交技术路线第23页
     ·树莓基因组DNA的提取(核DNA法)第23-24页
     ·45S rDNA探针的PCR扩增第24-25页
     ·45S rDNA探针的纯化与标记第25-26页
     ·45S rDNA探针标记效果的检测(点印渍检测法)第26-27页
     ·栽秧泡根尖中期染色体的制备第27页
     ·栽秧泡根尖中期染色体装片的前处理第27页
     ·染色体荧光原位杂交第27-28页
     ·信号检测第28页
5 结果与分析第28-32页
   ·树莓中期染色体制片体系的建立第28页
     ·解离过程相关因子的筛选结果第28页
     ·压片方法的比较结果第28页
   ·树莓荧光原位杂交体系的建立第28-32页
     ·栽秧泡基因组DNA提取结果第28-29页
     ·45S rDNA探针扩增体系筛选结果第29-30页
     ·45S rDNA纯化和点印渍检测结果第30-31页
     ·染色体标本的固定第31页
     ·染色体变性条件的筛选结果第31页
     ·杂交探针用量的筛选结果第31页
     ·杂交后洗脱强度的筛选结果第31页
     ·DAPI的用量筛选结果第31页
     ·45S rDNA在栽秧泡上的初定位第31-32页
6 讨论第32-36页
   ·栽秧泡中期染色体制片技术第32页
   ·荧光原位杂交的影响因素第32-36页
     ·染色体标本的固定和预处理方法第32-33页
     ·染色体装片变性方法第33-34页
     ·探针标记方法及用量第34-35页
     ·洗脱强度第35页
     ·DAPI的用量第35-36页
     ·45S rDNA探针在栽秧泡中期染色体上的初步定位第36页
7 进一步研究的内容第36-37页
参考文献第37-43页
附图第43-44页
致谢第44-45页
在学期间参与发表的论文第45页

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