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GRP78在卵巢癌顺铂耐药中的作用及其调控机制的体外研究

中文摘要第4-8页
Abstract第8-11页
缩略语第15-16页
前言第16-18页
对象与方法第18-33页
    1.1 实验对象第18-20页
        1.1.1 细胞系第18页
        1.1.2 相关试剂及耗材第18-20页
        1.1.3 主要仪器第20页
    1.2 实验方法第20-22页
        1.2.1 细胞培养第20页
        1.2.2 药物配置第20-22页
    1.3 RT-PCR检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中GRP78 mRNA表达第22-25页
        1.3.1 细胞总RNA提取第22页
        1.3.2 紫外分光光度计测定RNA浓度和纯度第22-23页
        1.3.3 RNA逆转录合成cDNA第23页
        1.3.4 PCR第23-24页
        1.3.5 琼脂糖凝胶电泳第24-25页
        1.3.6 结果分析第25页
    1.4 Western Blot法检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞中GRP78蛋白表达第25-28页
        1.4.1 细胞总蛋白的提取第25页
        1.4.2 蛋白总浓度测定第25-26页
        1.4.3 蛋白质变性第26页
        1.4.4 SDS-PAGE电泳、电转移、封闭第26-28页
        1.4.5 蛋白质的免疫检测第28页
        1.4.6 辣根过氧化物酶(ECL)法显影第28页
        1.4.7 结果判定第28页
    1.5 RT-PCR检测SKOV3、SKOV3/DDP细胞中GRP78、PI3K、AKT mRNA表达第28-29页
        1.5.1 实验分组及处理第28-29页
        1.5.2 细胞总RNA的提取及RT-PCR步骤及结果处理第29页
    1.6 Western Blot法检测SKOV3、SKOV3/DDP细胞GRP78、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达第29页
        1.6.1. 实验分组及处理第29页
        1.6.2. 细胞总蛋白的提取及Western blot实验步骤及结果处理第29页
    1.7 MTT法测定顺铂、A23187及BAPTA-AM联合顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP细胞生长的影响第29-31页
        1.7.1 细胞培养及分组加药第30页
        1.7.2 顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP细胞生长抑制作用第30页
        1.7.3 A23187联合顺铂及BAPTA-AM联合顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP细胞生长的影响第30-31页
    1.8 流式细胞术检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡第31-32页
        1.8.1 原理第31页
        1.8.2 步骤第31-32页
    1.9. 流式细胞术检测SKOV3和SKOV3/DDP细胞周期第32页
        1.9.1 步骤第32页
    1.10 统计学方法第32-33页
结果第33-42页
    2.1 SKOV3和SKOV3/DDP细胞中GRP78 mRNA表达第33页
    2.2 SKOV3和SKOV3/DDP细胞中GRP78蛋白表达第33-34页
    2.3 BAPTA-AM、A23187对SKOV3和SKOV3/DDP细胞GRP78表达水平的影响第34-35页
    2.4 BAPTA-AM、A23187对SKOV3和SKOV3/DDP细胞DDP敏感性的影响第35-36页
    2.5 GRP78对SKOV3及SKOV3/DDP细胞PI3K、AKT mRNA表达的影响第36-37页
    2.6 GRP78对SKOV3及SKOV3/DDP细胞PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达的影响第37-39页
    2.7 流式细胞术检测GRP78对SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡影响第39-40页
    2.8 GRP78对SKOV3和SKOV3/DDP细胞周期的影响第40-42页
讨论第42-49页
    3.1 内质网应激与GRP78在肿瘤发生中的作用第42-44页
        3.1.1 内质网应激第42页
        3.1.2 GRP78的结构与功能第42-43页
        3.1.3 内质网应激与GRP78在肿瘤发生中的作用第43-44页
    3.2 GRP78在卵巢癌中的表达及其对顺铂敏感性的影响第44-45页
    3.3 GRP78影响卵巢癌顺铂敏感性的作用机制第45-49页
        3.3.1 GRP78对卵巢癌细胞PI3K/AKT信号转导通路的影响第45-46页
        3.3.2 GRP78对卵巢癌细胞凋亡与细胞周期的影响第46-49页
结论第49-50页
参考文献第50-56页
发表论文和参加科研情况说明第56-57页
综述第57-65页
    综述参考文献第62-65页
致谢第65页

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