摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第12-15页 |
1 材料和方法 | 第15-26页 |
1.1 材料和试剂 | 第15页 |
1.1.1 供试植物材料 | 第15页 |
1.1.2 生化试剂 | 第15页 |
1.1.3 载体和菌株 | 第15页 |
1.2 试验方法 | 第15-26页 |
1.2.1 拟南芥、棉花的培育 | 第15-16页 |
1.2.2 菌系培养与接种方法 | 第16-17页 |
1.2.3 拟南芥根系观察 | 第17页 |
1.2.4 Vd-GFP 黄萎病菌入侵拟南芥显微观察及拟南芥抗病性鉴定 | 第17页 |
1.2.5 拟南芥茎中木质素的显微观测 | 第17页 |
1.2.6 拟南芥中 H2O2及 POD 含量的测定 | 第17-18页 |
1.2.7 RNA 分离和纯化 | 第18-20页 |
1.2.8 拟南芥中 GbVe、EDS1、NDR1、BAK1、PR4、PR5 的时空表达模式分析 | 第20-21页 |
1.2.9 质粒的提取 | 第21-22页 |
1.2.10 DNA 的提取 | 第22页 |
1.2.11 不同抗感棉花中 Ve 基因的克隆及序列分析 | 第22-24页 |
1.2.12 不同抗感棉花中 Ve 基因启动子的克隆 | 第24-25页 |
1.2.13 基因的生物信息学分析 | 第25页 |
1.2.14 GbVe 基因在棉花上的遗传转化 | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-42页 |
2.1 转 GbVe 拟南芥抗黄萎病机制 | 第26-31页 |
2.1.1 Vd-GFP 黄萎病菌侵入拟南芥的显微观察 | 第26页 |
2.1.2 转基因拟南芥黄萎病抗性 | 第26-28页 |
2.1.3 转基因拟南芥与野生型根生长情况的差异 | 第28页 |
2.1.4 转基因拟南芥和野生型茎的横切片木质素染色 | 第28-29页 |
2.1.5 转基因拟南芥和野生型 H2O2含量的差异 | 第29页 |
2.1.6 转基因拟南芥和野生型的 POD 活性的差异 | 第29-30页 |
2.1.7 拟南芥中 GbVe、EDS1、NDR1、BAK1 及 PR4、PR5 的时空表达 | 第30-31页 |
2.2 不同抗感棉花品种 Ve 基因的序列差异及生物信息学分析 | 第31-35页 |
2.2.1 不同棉花品种中 Ve 基因的获得 | 第31-32页 |
2.2.2 不同棉花品种 Ve 基因序列的差异 | 第32-33页 |
2.2.3 海岛棉和陆地棉 Ve 基因的生物信息学分析 | 第33-35页 |
2.3 不同抗感棉花品种 Ve 基因启动子的克隆及序列分析 | 第35-40页 |
2.3.1 Ve 基因启动子的克隆 | 第35-36页 |
2.3.2 启动子序列分析 | 第36-37页 |
2.3.3 启动子序列的生物信息学分析 | 第37-40页 |
2.4 转 GbVe 棉花材料的获得 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-45页 |
3.1 转 GbVe 拟南芥接种黄萎病菌后表型与生理生化方面的变化 | 第42页 |
3.2 关于 GbVe 介导的抗病反应与激素 SA 或 JA 介导的抗病信号转导途径的关系 | 第42-43页 |
3.3 不同抗感棉花品种 Ve 序列及其启动子序列与黄萎病抗性的关系 | 第43-45页 |
4 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
附录 A 试验中所用载体结构示意图 | 第50-52页 |
附录 B 试验所用试剂配方 | 第52-55页 |
在读期间发表论文 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |