摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第12-23页 |
1.1 流感病毒的研究进展 | 第12-19页 |
1.1.1 流感病毒流行现状 | 第12-13页 |
1.1.2 流感病毒的生物学特性 | 第13-15页 |
1.1.3 流感病毒致病机制 | 第15-16页 |
1.1.4 流感病毒感染免疫机制 | 第16-18页 |
1.1.5 主要抗流感病毒药物研究进展 | 第18-19页 |
1.2 热休克蛋白 | 第19-21页 |
1.2.1 热休克蛋白 90 | 第19-20页 |
1.2.2 热休克蛋白 90 抑制剂 | 第20-21页 |
1.2.3 热休克蛋白 90 抑制剂抑制单股、负链 RNA 病毒的增殖 | 第21页 |
1.2.4 热休克蛋白 90 抑制剂调控病毒感染介导的炎性反应 | 第21页 |
1.3 本实验研究的目的和意义 | 第21-23页 |
2 实验一格尔德霉素显著提高流感病毒 H5N1 感染小鼠存活率 | 第23-31页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 病毒株、细胞、鸡胚及实验动物 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-26页 |
2.2.1 流感病毒 A/环境/青海/1/2008(H5N1)培养与扩繁 | 第24页 |
2.2.2 血凝(HA)效价的测定 | 第24页 |
2.2.3 流感病毒 TCID50测定 | 第24-25页 |
2.2.4 流感病毒 PFU 测定 | 第25页 |
2.2.5 流感病毒感染小鼠 LD50测定 | 第25页 |
2.2.6 小鼠死亡保护率监测 | 第25-26页 |
2.2.7 统计学分析 | 第26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-29页 |
2.3.1 流感病毒 A/环境/青海/1/2008(H5N1)毒株制备 | 第26页 |
2.3.2 流感病毒 H5N1 血凝(HA)效价的测定 | 第26-27页 |
2.3.3 流感病毒 A/环境/青海/1/2008(H5N1)毒株 TCID50测定 | 第27页 |
2.3.4 流感病毒 H5N1 PFU 测定 | 第27-28页 |
2.3.5 流感病毒感染小鼠半数致死量(LD50)测定 | 第28-29页 |
2.3.6 格尔德霉素显著提高流感病毒 H5N1 感染小鼠的生存保护率 | 第29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
3 实验二格尔德霉素降低流感病毒 H5N1 感染小鼠的急性肺部损伤及病毒负载量 | 第31-42页 |
3.1 材料 | 第31-32页 |
3.1.1 主要试剂 | 第31页 |
3.1.2 主要仪器 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-36页 |
3.2.1 肺部组织病理学切片 | 第32-33页 |
3.2.2 显微镜观察 | 第33页 |
3.2.3 肺组织总 RNA 提取 | 第33页 |
3.2.4 肺组织总 RNA 琼脂糖电泳凝胶检测 | 第33-34页 |
3.2.5 肺组织总 RNA 第一链 cDNA 合成 | 第34页 |
3.2.6 常规 PCR 检测引物及产物特异性 | 第34-35页 |
3.2.7 PCR 产物琼脂糖电泳凝胶检测 | 第35页 |
3.2.8 荧光定量 PCR 检测肺组织病毒负载量 | 第35-36页 |
3.2.9 数据分析 | 第36页 |
3.3 结果 | 第36-39页 |
3.3.1 格尔德霉素降低流感病毒 H5N1 感染小鼠的急性肺部损伤(ALI) | 第36-37页 |
3.3.2 肺组织总 RNA 琼脂糖电泳检测 | 第37页 |
3.3.3 流感病毒 NP 基因及 β-actin 基因常规 PCR 扩增 | 第37-38页 |
3.3.4 格尔德霉素降低流感病毒 H5N1 感染小鼠的肺部病毒负载量 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-40页 |
3.5 小结 | 第40-42页 |
4 实验三格尔德霉素显著降低流感病毒 H5N1 感染小鼠介导的免疫炎性反应 | 第42-48页 |
4.1 材料 | 第42-43页 |
4.1.1 主要试剂 | 第42页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第42-43页 |
4.2 实验方法 | 第43-45页 |
4.2.1 支气管肺泡灌洗液收集 | 第43页 |
4.2.2 ELISA 方法检测肺泡灌洗液中炎性细胞因子 | 第43-44页 |
4.2.3 肺组织单细胞悬液制备 | 第44页 |
4.2.4 流式细胞抗体染色 | 第44-45页 |
4.2.5 流式细胞仪检测 T 细胞 | 第45页 |
4.3 结果 | 第45-46页 |
4.3.1 格尔德霉素显著抑制流感病毒 H5N1 感染小鼠介导的细胞因子反应 | 第45-46页 |
4.3.2 格尔德霉素抑制流感病毒 H5N1 感染小鼠介导的 T 细胞免疫反应 | 第46页 |
4.4 讨论 | 第46-47页 |
4.5 小结 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录 | 第56-58页 |
在读期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |