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格尔德霉素抗致死性流感病毒H5N1机理研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
1 引言第12-23页
    1.1 流感病毒的研究进展第12-19页
        1.1.1 流感病毒流行现状第12-13页
        1.1.2 流感病毒的生物学特性第13-15页
        1.1.3 流感病毒致病机制第15-16页
        1.1.4 流感病毒感染免疫机制第16-18页
        1.1.5 主要抗流感病毒药物研究进展第18-19页
    1.2 热休克蛋白第19-21页
        1.2.1 热休克蛋白 90第19-20页
        1.2.2 热休克蛋白 90 抑制剂第20-21页
        1.2.3 热休克蛋白 90 抑制剂抑制单股、负链 RNA 病毒的增殖第21页
        1.2.4 热休克蛋白 90 抑制剂调控病毒感染介导的炎性反应第21页
    1.3 本实验研究的目的和意义第21-23页
2 实验一格尔德霉素显著提高流感病毒 H5N1 感染小鼠存活率第23-31页
    2.1 材料第23-24页
        2.1.1 病毒株、细胞、鸡胚及实验动物第23页
        2.1.2 主要试剂第23页
        2.1.3 主要仪器设备第23-24页
    2.2 方法第24-26页
        2.2.1 流感病毒 A/环境/青海/1/2008(H5N1)培养与扩繁第24页
        2.2.2 血凝(HA)效价的测定第24页
        2.2.3 流感病毒 TCID50测定第24-25页
        2.2.4 流感病毒 PFU 测定第25页
        2.2.5 流感病毒感染小鼠 LD50测定第25页
        2.2.6 小鼠死亡保护率监测第25-26页
        2.2.7 统计学分析第26页
    2.3 结果与分析第26-29页
        2.3.1 流感病毒 A/环境/青海/1/2008(H5N1)毒株制备第26页
        2.3.2 流感病毒 H5N1 血凝(HA)效价的测定第26-27页
        2.3.3 流感病毒 A/环境/青海/1/2008(H5N1)毒株 TCID50测定第27页
        2.3.4 流感病毒 H5N1 PFU 测定第27-28页
        2.3.5 流感病毒感染小鼠半数致死量(LD50)测定第28-29页
        2.3.6 格尔德霉素显著提高流感病毒 H5N1 感染小鼠的生存保护率第29页
    2.4 讨论第29-30页
    2.5 小结第30-31页
3 实验二格尔德霉素降低流感病毒 H5N1 感染小鼠的急性肺部损伤及病毒负载量第31-42页
    3.1 材料第31-32页
        3.1.1 主要试剂第31页
        3.1.2 主要仪器第31-32页
    3.2 实验方法第32-36页
        3.2.1 肺部组织病理学切片第32-33页
        3.2.2 显微镜观察第33页
        3.2.3 肺组织总 RNA 提取第33页
        3.2.4 肺组织总 RNA 琼脂糖电泳凝胶检测第33-34页
        3.2.5 肺组织总 RNA 第一链 cDNA 合成第34页
        3.2.6 常规 PCR 检测引物及产物特异性第34-35页
        3.2.7 PCR 产物琼脂糖电泳凝胶检测第35页
        3.2.8 荧光定量 PCR 检测肺组织病毒负载量第35-36页
        3.2.9 数据分析第36页
    3.3 结果第36-39页
        3.3.1 格尔德霉素降低流感病毒 H5N1 感染小鼠的急性肺部损伤(ALI)第36-37页
        3.3.2 肺组织总 RNA 琼脂糖电泳检测第37页
        3.3.3 流感病毒 NP 基因及 β-actin 基因常规 PCR 扩增第37-38页
        3.3.4 格尔德霉素降低流感病毒 H5N1 感染小鼠的肺部病毒负载量第38-39页
    3.4 讨论第39-40页
    3.5 小结第40-42页
4 实验三格尔德霉素显著降低流感病毒 H5N1 感染小鼠介导的免疫炎性反应第42-48页
    4.1 材料第42-43页
        4.1.1 主要试剂第42页
        4.1.2 主要仪器设备第42-43页
    4.2 实验方法第43-45页
        4.2.1 支气管肺泡灌洗液收集第43页
        4.2.2 ELISA 方法检测肺泡灌洗液中炎性细胞因子第43-44页
        4.2.3 肺组织单细胞悬液制备第44页
        4.2.4 流式细胞抗体染色第44-45页
        4.2.5 流式细胞仪检测 T 细胞第45页
    4.3 结果第45-46页
        4.3.1 格尔德霉素显著抑制流感病毒 H5N1 感染小鼠介导的细胞因子反应第45-46页
        4.3.2 格尔德霉素抑制流感病毒 H5N1 感染小鼠介导的 T 细胞免疫反应第46页
    4.4 讨论第46-47页
    4.5 小结第47-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-56页
附录第56-58页
在读期间发表的学术论文第58-59页
作者简介第59-60页
致谢第60-61页

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