| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 综述 | 第16-32页 |
| 1.1 喹烯酮 | 第16-23页 |
| 1.1.1 简介 | 第16页 |
| 1.1.2 毒性作用 | 第16-19页 |
| 1.1.3 毒理机制 | 第19-23页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第23-27页 |
| 1.2.1 简介 | 第23页 |
| 1.2.2 细胞凋亡的特征 | 第23-24页 |
| 1.2.3 细胞凋亡的分子机制 | 第24-27页 |
| 1.3 细胞自噬 | 第27-31页 |
| 1.3.1 简介 | 第27页 |
| 1.3.2 细胞自噬的分子机制 | 第27-31页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 喹烯酮引起肝癌细胞HepG2凋亡的信号通路研究 | 第32-56页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 材料 | 第32-34页 |
| 2.2.1 药物 | 第32-33页 |
| 2.2.2 细胞株 | 第33页 |
| 2.2.3 试剂盒 | 第33页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第33页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.3 试验方法 | 第34-41页 |
| 2.3.1 溶液配制 | 第34-35页 |
| 2.3.2 细胞培养与保存 | 第35-36页 |
| 2.3.3 细胞存活率检测(MTT法) | 第36-37页 |
| 2.3.4 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测 | 第37-38页 |
| 2.3.5 Western blot试验步骤 | 第38-40页 |
| 2.3.6 线粒体膜电位检测 | 第40-41页 |
| 2.3.7 数据分析 | 第41页 |
| 2.4 结果与分析 | 第41-51页 |
| 2.4.1 喹烯酮和ML-7对HepG2细胞活性的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.2 喹烯酮和ML-7对HepG2细胞凋亡的影响 | 第42-44页 |
| 2.4.3 喹烯酮和ML-7对内源性凋亡通路和外源性凋亡通路的影响 | 第44-47页 |
| 2.4.4 喹烯酮和ML-7对Akt信号通路的影响 | 第47-48页 |
| 2.4.5 喹烯酮和ML-7对MAPK信号通路的影响 | 第48页 |
| 2.4.6 Akt和MAPK通路对喹烯酮和ML-7引起的HepG2细胞凋亡的影响 | 第48-51页 |
| 2.5 讨论 | 第51-56页 |
| 2.5.1 HepG2细胞的选择 | 第51-52页 |
| 2.5.2 喹烯酮和ML-7引起的细胞毒理作用 | 第52页 |
| 2.5.3 喹烯酮和ML-7引起的细胞凋亡 | 第52页 |
| 2.5.4 喹烯酮和ML-7引起的凋亡中Akt和MAPK信号通路的作用 | 第52-53页 |
| 2.5.5 小结 | 第53-56页 |
| 第三章 喹烯酮引起肝癌细胞HepG2细胞自噬的机制研究 | 第56-78页 |
| 3.1 引言 | 第56页 |
| 3.2 材料 | 第56-58页 |
| 3.2.1 药物 | 第56页 |
| 3.2.2 细胞株 | 第56页 |
| 3.2.3 试剂盒 | 第56-57页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第57-58页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第58页 |
| 3.3 试验方法 | 第58-66页 |
| 3.3.1 溶液配制 | 第58-59页 |
| 3.3.2 细胞培养与保存 | 第59页 |
| 3.3.3 western blot试验步骤 | 第59页 |
| 3.3.4 Real-Time PCR试验步骤 | 第59-62页 |
| 3.3.5 稳定干扰细胞系制作 | 第62-65页 |
| 3.3.6 LC3-GFP质粒转染 | 第65-66页 |
| 3.3.7 数据分析 | 第66页 |
| 3.4 结果与分析 | 第66-75页 |
| 3.4.1 喹烯酮引起HepG2细胞产生自噬 | 第66-68页 |
| 3.4.2 喹烯酮引起HepG2细胞发生内质网应激 | 第68-70页 |
| 3.4.3 喹烯酮对HepG2细胞中ATF6和DAPK1的影响 | 第70-72页 |
| 3.4.4 喹烯酮对HepG2细胞中膜转运蛋白mAtg9a运输的影响 | 第72-73页 |
| 3.4.5 喹烯酮对ATF6和DAPK1稳定干扰HepG2细胞系中自噬的影响 | 第73-75页 |
| 3.5 讨论 | 第75-78页 |
| 3.5.1 喹烯酮能诱导HepG2细胞发生自噬 | 第75页 |
| 3.5.2 喹烯酮诱导HepG2细胞发生内质网应激 | 第75页 |
| 3.5.3 喹烯酮诱导HepG2细胞发生的内质网应激介导了自噬的激活 | 第75-76页 |
| 3.5.4 喹烯酮诱导HepG2细胞发生的自噬和凋亡之间可能的关系 | 第76页 |
| 3.5.5 小结 | 第76-78页 |
| 第四章 喹烯酮对HepG2细胞线粒体自噬的影响的研究 | 第78-96页 |
| 4.1 引言 | 第78页 |
| 4.2 材料 | 第78-79页 |
| 4.2.1 药物 | 第78页 |
| 4.2.2 细胞株 | 第78页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第78-79页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第79页 |
| 4.3 试验方法 | 第79-80页 |
| 4.3.1 溶液配制 | 第79-80页 |
| 4.3.2 细胞培养与保存 | 第80页 |
| 4.3.3 western blot试验步骤 | 第80页 |
| 4.3.4 tet on-Parkin-Flag质粒转染 | 第80页 |
| 4.3.5 线粒体膜电位检测 | 第80页 |
| 4.3.6 数据分析 | 第80页 |
| 4.4 结果与分析 | 第80-91页 |
| 4.4.1 HepG2细胞线粒体自噬过程中各相关蛋白的变化趋势 | 第80-82页 |
| 4.4.2 喹烯酮对HepG2细胞线粒体自噬的影响 | 第82-84页 |
| 4.4.3 喹烯酮对HepG2细胞线粒体自噬受体蛋白表达的影响 | 第84-85页 |
| 4.4.4 喹烯酮对HepG2细胞线粒体自噬过程中凋亡的影响 | 第85-86页 |
| 4.4.5 喹烯酮对SH-SY5Y细胞线粒体自噬的影响 | 第86-88页 |
| 4.4.6 parkin高表达对喹烯酮在HepG2细胞中引起的线粒体自噬的影响 | 第88-91页 |
| 4.5 讨论 | 第91-96页 |
| 4.5.1 HepG2细胞的线粒体自噬 | 第91-92页 |
| 4.5.2 喹烯酮对HepG2细胞中线粒体自噬的影响 | 第92页 |
| 4.5.3 喹烯酮对SH-SY-5Y细胞中线粒体自噬的影响 | 第92-93页 |
| 4.5.4 parkin高表达对喹烯酮在HepG2细胞中引起的线粒体自噬的影响 | 第93-94页 |
| 4.5.5 小结 | 第94-96页 |
| 第五章 结论与展望 | 第96-98页 |
| 5.1 结论 | 第96页 |
| 5.2 展望 | 第96-98页 |
| 第六章 创新点 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 个人简介 | 第114页 |
