摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 绪论 | 第8-23页 |
1 亲本的年龄会对后代的寿命有影响 | 第8页 |
2 秀丽隐杆线虫(C.elegans)中参与调控衰老的信号通路 | 第8-15页 |
2.1 秀丽隐杆线虫简介 | 第8-10页 |
2.2 秀丽隐杆线虫中与衰老有关的调控信号途径 | 第10-15页 |
3 C.elegans中表观遗传的研究 | 第15-17页 |
3.1 表观遗传学 | 第15页 |
3.2 组蛋白修饰 | 第15-16页 |
3.3 C.elegans中的表观修饰 | 第16-17页 |
4 miRNAs在秀丽隐杆线虫衰老中的研究 | 第17-23页 |
4.1 miRNAs的发现和形成机制 | 第17-19页 |
4.2 miRNAs的调控方式 | 第19-20页 |
4.3 miRNAs在C.elegans衰老中的研究 | 第20-23页 |
第二章 实验材料和方法 | 第23-40页 |
1 实验仪器、试剂和培养基 | 第23-28页 |
1.1 主要实验仪器 | 第23页 |
1.2 主要生化试剂和试剂盒 | 第23-24页 |
1.3 主要培养基的配制 | 第24-25页 |
1.4 实验用主要溶液的配制 | 第25-28页 |
2 实验材料 | 第28页 |
2.1 研究对象 | 第28页 |
2.2 实验用菌株 | 第28页 |
3 实验方法 | 第28-40页 |
3.1 固体培养基培养线虫 | 第28-29页 |
3.2 C.elegans的同步化 | 第29页 |
3.3 线虫侵染实验 | 第29-30页 |
3.4 线虫RNA干扰(RNAi) | 第30页 |
3.5 C.elegans中总RNA的提取、逆转录和real time qPCR | 第30-33页 |
3.6 线虫基因组提取 | 第33-34页 |
3.7 CGC购买线虫突变株后的处理方法 | 第34页 |
3.8 线虫的荧光照 | 第34-35页 |
3.9 Western Blotting实验 | 第35-38页 |
3.10 线虫寿命实验 | 第38页 |
3.11 线虫热激存活率实验 | 第38-39页 |
3.12 本研究中线虫的培养方法 | 第39-40页 |
第三章 实验结果 | 第40-58页 |
1 衰老线虫后代的寿命和抵抗热激的能力都会降低 | 第40-41页 |
2 线虫年龄对后代寿命的影响没有从F1代传递到F2代 | 第41-43页 |
3 组蛋白H3K36me3水平可能是导致这一现象产生的分子机制 | 第43-48页 |
3.1 老化线虫中组蛋白H3K36me2/3甲基转移酶mRNA水平降低 | 第43-44页 |
3.2 老化线虫的后代H3K36me3蛋白表达量降低 | 第44-45页 |
3.3 H3K36me2/3甲基转移酶met-1可能参与调控线虫衰老对后代的影响 | 第45-48页 |
4 RNA-Seq确定miRNA表达变化 | 第48-55页 |
4.1 差异表达miRNAs | 第49-51页 |
4.2 差异miRNAs维恩图(Venn diagram)和热图(Hotmap) | 第51-52页 |
4.3 差异miRNAs靶基因富集分析 | 第52-55页 |
5 let-7可能以met-1为靶基因参与调控线虫衰老对后代的影响 | 第55-58页 |
第四章 讨论 | 第58-61页 |
附录 | 第61-67页 |
附表1:6d P vs 1d P下调miRNAs | 第61页 |
附表2:6d F1 vs 1d F1下调microRNAs | 第61-63页 |
附表3:差异microRNAs维恩图作图数据 | 第63-65页 |
附表4:Hotmap作图数据 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
致谢 | 第77页 |