| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩写词(Abbreviations) | 第9-10页 |
| 实验仪器(Experimental apparatus) | 第10-14页 |
| 1 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 菊花育种 | 第14-15页 |
| 1.2 表观遗传学 | 第15-16页 |
| 1.2.1 DNA甲基化 | 第15页 |
| 1.2.2 植物DNA甲基转移酶 | 第15-16页 |
| 1.2.3 植物DNA甲基化的作用方式 | 第16页 |
| 1.2.4 植物DNA甲基化的研究实例 | 第16页 |
| 1.3 RNA干扰 | 第16-17页 |
| 1.3.1 RNAi作用机制 | 第17页 |
| 1.3.2 植物中RNAi的应用实例 | 第17页 |
| 1.4 转基因 | 第17-19页 |
| 1.4.1 转基因方法 | 第18-19页 |
| 1.4.2 转基因结果的评价标准 | 第19页 |
| 1.5 研究目的与意义及研究内容 | 第19-22页 |
| 2 菊花CmMET1基因部分序列的多样性分析 | 第22-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 质粒载体与菌株 | 第22页 |
| 2.2 实验药品及试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.2.1 实验药品 | 第22页 |
| 2.2.2 实验试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.3 培养基及平板的配制 | 第23页 |
| 2.4 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.4.1 引物的设计及合成 | 第23-24页 |
| 2.4.2 提取RNA所需枪头和离心管的处理 | 第24页 |
| 2.4.3 菊花基因组总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.4.4 菊花RNA第一条链的反转录 | 第25-26页 |
| 2.4.5 菊花同源序列的扩增 | 第26页 |
| 2.4.6 目的片段的检测及纯化 | 第26-27页 |
| 2.4.7 目的片段与T载体的连接 | 第27页 |
| 2.4.8 T载体热激转入大肠杆菌DH5α | 第27页 |
| 2.4.9 菌液PCR | 第27-28页 |
| 2.4.10 送样测序 | 第28页 |
| 2.4.11 测序结果的分析 | 第28页 |
| 2.5 结果与分析 | 第28-29页 |
| 2.6 小结和讨论 | 第29-30页 |
| 3 RNAi载体的构建 | 第30-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 质粒载体与菌株 | 第30页 |
| 3.2 实验药品及抗生素的配制 | 第30-31页 |
| 3.2.1 实验药品 | 第30页 |
| 3.2.2 抗生素的配制 | 第30-31页 |
| 3.3 培养基及平板的配制 | 第31页 |
| 3.4 实验方法 | 第31-35页 |
| 3.4.1 引物合成及目的片段的扩增 | 第31-32页 |
| 3.4.2 大肠杆菌的活化 | 第32页 |
| 3.4.3 质粒DNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.4.4 质粒DNA和RNAi空载体的酶切 | 第33页 |
| 3.4.5 酶切片段的检测及纯化 | 第33页 |
| 3.4.6 目的片段与载体连接转入大肠杆菌 | 第33页 |
| 3.4.7 RNAi载体转入农杆菌 | 第33-35页 |
| 3.5 结果与分析 | 第35-37页 |
| 3.5.1 菊花保守序列的获取 | 第35页 |
| 3.5.2 菊花保守序列的分析 | 第35-36页 |
| 3.5.3 RNAi载体的构建 | 第36页 |
| 3.5.4 双酶切验证RNAi载体 | 第36-37页 |
| 3.6 小结和讨论 | 第37-38页 |
| 4 菊花遗传再生体系的建立 | 第38-46页 |
| 4.1 植物材料 | 第38页 |
| 4.2 实验药品及试剂的配制 | 第38-39页 |
| 4.2.1 实验药品 | 第38页 |
| 4.2.2 试剂的配制 | 第38-39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 4.3.1 愈伤组织诱导培养基的配制 | 第39页 |
| 4.3.2 外植体材料的消毒 | 第39页 |
| 4.3.3 菊花茎段愈伤组织的诱导 | 第39-40页 |
| 4.3.4 愈伤组织分化培养基的配制 | 第40页 |
| 4.3.5 菊花茎段愈伤组织的分化 | 第40页 |
| 4.3.6 菊花分化植株的生根培养与移栽 | 第40-41页 |
| 4.4 结果与分析 | 第41-45页 |
| 4.4.1 菊花“紫精灵”茎段愈伤组织诱导与分化的分析 | 第41-43页 |
| 4.4.2 菊花“国庆红”茎段愈伤组织诱导与分化的分析 | 第43-45页 |
| 4.5 小结和讨论 | 第45-46页 |
| 5 农杆菌介导的菊花和青蒿遗传转化 | 第46-58页 |
| 5.1 实验材料 | 第46页 |
| 5.2 实验药品与抗生素的配制 | 第46页 |
| 5.2.1 实验药品 | 第46页 |
| 5.2.2 抗生素的配制 | 第46页 |
| 5.3 实验方法 | 第46-50页 |
| 5.3.1 愈伤组织的预培养 | 第46页 |
| 5.3.2 农杆菌的活化 | 第46-47页 |
| 5.3.3 农杆菌侵染愈伤组织进行共培养 | 第47页 |
| 5.3.4 愈伤组织脱菌处理进行延迟培养 | 第47页 |
| 5.3.5 愈伤组织进行选择培养 | 第47页 |
| 5.3.6 转化植株的检测 | 第47-50页 |
| 5.4 结果与分析 | 第50-55页 |
| 5.4.1 菊花和青蒿遗传转化体系的优化 | 第50-52页 |
| 5.4.2 菊花和青蒿的转化植株的检测 | 第52-55页 |
| 5.5 小结和讨论 | 第55-58页 |
| 6 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
