摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩略词表 | 第11-15页 |
1 前言 | 第15-17页 |
2 材料、试剂与仪器 | 第17-23页 |
2.1 材料与试剂 | 第17-18页 |
2.2 仪器 | 第18-19页 |
2.3 试剂配制方法 | 第19-23页 |
3 实验方法 | 第23-33页 |
3.1 大鼠心肌梗死模型的建立 | 第23页 |
3.2 新生大鼠原代心肌细胞(NRVMS)的分离及缺氧模型的建立 | 第23-24页 |
3.3 大鼠心肌细胞系H9C2缺氧模型的建立 | 第24页 |
3.4 HE染色 | 第24-25页 |
3.5 TUNEL | 第25-26页 |
3.5.1 细胞 | 第25-26页 |
3.5.2 石蜡切片 | 第26页 |
3.6 免疫组化 | 第26-27页 |
3.7 蛋白质的提取及BCA法测定蛋白浓度 | 第27-28页 |
3.7.1 细胞蛋白质的提取 | 第27-28页 |
3.7.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第28页 |
3.8 WESTERN BLOT | 第28-29页 |
3.9 免疫荧光 | 第29-30页 |
3.10 流式细胞术 | 第30页 |
3.11 细胞增殖活力实验(MTT) | 第30页 |
3.12 乳酸脱氢酶检测(LDH) | 第30-31页 |
3.13 CASPASE 3/7 活性检测 | 第31页 |
3.14 SIRNA的转染 | 第31-32页 |
3.15 统计学分析 | 第32-33页 |
4 实验结果 | 第33-47页 |
4.1 大鼠心肌组织 | 第33-35页 |
4.1.1 心肌梗死后细胞形态学变化 | 第33页 |
4.1.2 心肌梗死可诱导心肌细胞发生凋亡 | 第33-34页 |
4.1.3 DNA损伤反应参与大鼠心肌缺血缺氧性损伤 | 第34-35页 |
4.2 大鼠心肌细胞系H9C2 | 第35-44页 |
4.2.1 成功建立H9C2缺氧模型 | 第35页 |
4.2.2 缺氧诱导H9C2细胞DNA损伤相关蛋白表达量增高 | 第35-36页 |
4.2.3 阻断ATR/Chk1通路对缺氧诱导的H9C2细胞损伤无影响 | 第36-38页 |
4.2.4 阻断ATM/Chk2通路对H9C2细胞缺氧性损伤有明显改善作用 | 第38-42页 |
4.2.5 干扰Chk2能够减轻H9C2细胞缺氧性损伤 | 第42-44页 |
4.3 大鼠原代心肌细胞(NRVMS) | 第44-47页 |
4.3.1 成功建立NRVMs缺氧模型 | 第44-45页 |
4.3.2 阻断ATM/Chk2通路对NRVMs缺氧性损伤有保护作用 | 第45-47页 |
讨论 | 第47-51页 |
结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
综述 | 第57-69页 |
参考文献 | 第64-69页 |
在读期间参加的学术会议及研究成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |