| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 霍乱弧菌主要毒力基因 | 第10-11页 |
| 1.2 毒力基因的转移与检测 | 第11-13页 |
| 1.3 zot基因 | 第13-14页 |
| 1.4 本论文研究思路及意义 | 第14-15页 |
| 第2章 材料和方法 | 第15-31页 |
| 2.1 材料 | 第15-20页 |
| 2.1.1 细胞株、菌株、质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 抗体 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15-17页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.1.5 主要的溶液成分和试剂的配制 | 第17-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-31页 |
| 2.2.1 霍乱弧菌zot和ctxAB毒力基因检测 | 第20页 |
| 2.2.2 质粒pET-32(a+)-zot的构建 | 第20-25页 |
| 2.2.3 重组克隆质粒pET-32 a(+)-zot的原核表达 | 第25-28页 |
| 2.2.4 Western blot鉴定表达蛋白 | 第28-29页 |
| 2.2.5 表达蛋白对人小肠上皮细胞的凋亡作用 | 第29-31页 |
| 第3章 结果 | 第31-42页 |
| 3.1 霍乱弧菌zot和ctxAB毒力基因检测 | 第31-32页 |
| 3.2 质粒pET-32(a+)-zot的构建 | 第32-34页 |
| 3.2.1 zot全基因PCR扩增 | 第32页 |
| 3.2.2 重组质粒的酶切分析 | 第32-33页 |
| 3.2.3 pET-32(a+)-zot基因测序 | 第33-34页 |
| 3.3 重组蛋白的表达与鉴定 | 第34-38页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE分析鉴定诱导表达结果 | 第34-35页 |
| 3.3.2 His-tag亲和层析柱纯化表达蛋白 | 第35-37页 |
| 3.3.3 蛋白浓度测定 | 第37页 |
| 3.3.4 Western blot分析重组蛋白 | 第37-38页 |
| 3.4 重组蛋白对人小肠上皮细胞的凋亡作用 | 第38-42页 |
| 第4章 讨论 | 第42-51页 |
| 4.1 霍乱弧菌ctxAB、zot毒力基因携带情况 | 第42-43页 |
| 4.2 MaxCodonTM Optimization Program (V13)对cep、ace、zot目标蛋白氨基酸序列的分析 | 第43-47页 |
| 4.3 病原菌毒力因子诱导细胞凋亡的作用机制 | 第47-49页 |
| 4.3.1 外毒素诱导细胞凋亡的作用机制 | 第47-48页 |
| 4.3.2 内毒素诱导细胞凋亡的作用机制 | 第48-49页 |
| 4.4 zot对细胞间紧密连接（Tj）的作用机制 | 第49-51页 |
| 第5章 结论与展望 | 第51-52页 |
| 5.1 结论 | 第51页 |
| 5.2 展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第59-60页 |
| 综述 | 第60-63页 |
