| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第7-13页 |
| 1 引言 | 第13-21页 |
| 1.1 大叶落地生根胎生苗形成研究概况 | 第13-16页 |
| 1.1.1 胎生苗的形成发育过程 | 第13-14页 |
| 1.1.2 胎生苗的形成发育过程中相关基因与功能研究 | 第14-15页 |
| 1.1.3 无性繁殖演变 | 第15-16页 |
| 1.2 大叶落地生根遗传转化的研究进展 | 第16页 |
| 1.3 SOC1基因的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 SOC1基因的发现与结构特征 | 第17页 |
| 1.3.2 SOC1基因的表达调控 | 第17-18页 |
| 1.3.3 SOC1基因的功能 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究目的内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 1.4.1 研究背景 | 第19页 |
| 1.4.2 研究目的 | 第19页 |
| 1.4.3 研究内容 | 第19-20页 |
| 1.4.4 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 大叶落地生根KdSOC1基因cDNA的获得及生物信息分析 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要酶与试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.4 常用培养基 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 大叶落地生根叶片总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.2 大叶落地生根cDNA的合成 | 第21-22页 |
| 2.2.3 KdSOC1基因全长的获得 | 第22-26页 |
| 2.2.4 KdSOC1基因序列的生物学分析 | 第26-27页 |
| 2.2.5 多重序列比对与系统进化分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-32页 |
| 2.3.1 KdSOC1基因的克隆与序列分析 | 第27-28页 |
| 2.3.2 KdSOC1蛋白序列分析及三级结构预测 | 第28-30页 |
| 2.3.3 同源性比较及系统进化分析 | 第30-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 3 大叶落地生根KdSOC1基因启动子的克隆与分析 | 第33-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 3.1.2 主要酶与试剂 | 第33页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第33页 |
| 3.1.4 常用培养基 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 大叶落地生根DNA的提取 | 第33页 |
| 3.2.2 KdSOC1基因启动子的克隆 | 第33-36页 |
| 3.2.3 生物信息学分析 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-39页 |
| 3.3.1 大叶落地生根KdSOC1基因启动子的克隆 | 第37页 |
| 3.3.2 大叶落地生根KdSOC1基因启动子序列分析 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-40页 |
| 4 大叶落地生根KdSOC1基因的表达分析 | 第40-48页 |
| 4.1 实验材料与处理 | 第40-41页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第40页 |
| 4.1.2 材料处理 | 第40-41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-42页 |
| 4.2.1 不同处理下落地生根总RNA的提取及cDNA的合成 | 第41页 |
| 4.2.2 实时荧光定量PCR | 第41-42页 |
| 4.2.3 半定量RT-PCR | 第42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 4.3.1 KdSOC1基因在不同激素诱导下的表达分析 | 第42-43页 |
| 4.3.2 KdSOC1基因在不同光周期下的表达分析 | 第43-44页 |
| 4.3.3 干旱胁迫下KdSOC1基因的表达分析 | 第44-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.4.1 不同激素诱导下KdSOC1基因的表达分析 | 第45-46页 |
| 4.4.2 不同光周期下KdSOC1基因的表达分析 | 第46页 |
| 4.4.3 自然干旱处理下KdSOC1基因的表达分析 | 第46-48页 |
| 5 大叶落地生根遗传转化体系的构建 | 第48-61页 |
| 5.1 实验材料 | 第48页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 5.1.2 载体与菌株 | 第48页 |
| 5.1.3 主要酶与试剂 | 第48页 |
| 5.1.4 主要仪器设备 | 第48页 |
| 5.1.5 主要培养基 | 第48页 |
| 5.2 实验方法 | 第48-53页 |
| 5.2.1 RNA的提取及cDNA的合成 | 第48-49页 |
| 5.2.2 引物设计 | 第49页 |
| 5.2.3 过表达载体pBIN438-ORF_(KdSOC1)的构建 | 第49-51页 |
| 5.2.4 干扰载体pZH01-AS ORF_(KdSOC1)-GUS-S ORF _(KdSOC1)的构建 | 第51-52页 |
| 5.2.5 启动子载体pBI121-Promoter_(KdSOC1)-GUS的构建 | 第52页 |
| 5.2.6 农杆菌感受态细胞的转化及鉴定 | 第52页 |
| 5.2.7 植物表达载体转化大叶落地生根 | 第52-53页 |
| 5.2.8 主要仪器设备 | 第53页 |
| 5.2.9 主要培养基 | 第53页 |
| 5.3 结果与分析 | 第53-59页 |
| 5.3.1 过表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 5.3.2 干扰载体的构建 | 第54页 |
| 5.3.3 启动子载体的构建 | 第54-55页 |
| 5.3.4 落地生根不同外植体的瞬时转化效率 | 第55-56页 |
| 5.3.5 参考Truesdale MR等建立的落地生根转化体系 | 第56-57页 |
| 5.3.6 类似于拟南芥花粉转化法 | 第57页 |
| 5.3.7 参考Garces等人建立的落地生根转化体系 | 第57-59页 |
| 5.4 讨论 | 第59-61页 |
| 5.4.1 落地生根转化效率 | 第59页 |
| 5.4.2 落地生根遗传转化体系 | 第59-61页 |
| 6 大叶落地生根愈伤组织诱导体系的优化 | 第61-73页 |
| 6.1 实验材料 | 第61页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第61页 |
| 6.1.2 菌株与质粒 | 第61页 |
| 6.1.3 主要试剂 | 第61页 |
| 6.1.4 主要仪器设备 | 第61页 |
| 6.2 方法 | 第61-62页 |
| 6.2.1 外植体处理 | 第61页 |
| 6.2.2 培养基及培养条件 | 第61-62页 |
| 6.2.3 愈伤组织诱导 | 第62页 |
| 6.2.4 数据统计分析 | 第62页 |
| 6.2.5 落地生根愈伤组织的瞬时转化 | 第62页 |
| 6.3 结果与分析 | 第62-71页 |
| 6.3.1 不同外植体愈伤诱导效率 | 第62-64页 |
| 6.3.2 植物激素配比对不同外植体愈伤组织诱导的影响 | 第64-69页 |
| 6.3.3 不同外植体最佳愈伤诱导激素比例 | 第69-70页 |
| 6.3.4 侵染时间对落地生根愈伤组织瞬时转化的影响 | 第70-71页 |
| 6.4 讨论 | 第71-73页 |
| 6.4.1 大叶落地生根愈伤组织诱导 | 第71页 |
| 6.4.2 大叶落地生根愈伤组织瞬时转化 | 第71-73页 |
| 7 总结与展望 | 第73-75页 |
| 7.1 总结 | 第73页 |
| 7.2 展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 个人简介 | 第81-82页 |
| 导师简介 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
