| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 研究背景综述 | 第9-26页 |
| 1.1 DNA损伤应答 | 第9-19页 |
| 1.1.1 DNA损伤的类型 | 第9-10页 |
| 1.1.2 DNA损伤修复的类型 | 第10-17页 |
| 1.1.2.1 直接修复 | 第10页 |
| 1.1.2.2 碱基切除修复 | 第10-11页 |
| 1.1.2.3 核苷酸切除修复 | 第11-13页 |
| 1.1.2.4 错配修复 | 第13-14页 |
| 1.1.2.5 同源重组修复 | 第14页 |
| 1.1.2.6 非同源末端连接 | 第14-15页 |
| 1.1.2.7 DNA交联损伤修复 | 第15-17页 |
| 1.1.3 丝裂霉素C | 第17-19页 |
| 1.1.3.1 丝裂霉素C的概述 | 第18页 |
| 1.1.3.2 MMC抗肿瘤作用机制 | 第18-19页 |
| 1.2 血影蛋白 | 第19-22页 |
| 1.2.1 血影蛋白简介 | 第19-20页 |
| 1.2.2 血影蛋白功能和DDR的关系 | 第20-22页 |
| 1.3 microRNA 和 DDR | 第22-26页 |
| 1.3.1 microRNA概述 | 第22-24页 |
| 1.3.2 miRNA在DDR中的作用 | 第24-26页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第26-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.3 实验中所使用的主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 实验中涉及的引物 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-38页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第28页 |
| 2.2.2 细胞转染实验及丝裂霉素C刺激实验 | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞RNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.4 细胞蛋白提取及免疫印记 | 第30页 |
| 2.2.5 荧光实时定量PCR | 第30-33页 |
| 2.2.5.1 miRNA表达水平检测 | 第30-31页 |
| 2.2.5.2 mRNA表达水平检测 | 第31-33页 |
| 2.2.6 生物信息学预测并筛选靶位点 | 第33页 |
| 2.2.7 miR-128靶点生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.2.8 PI法检测细胞周期 | 第33页 |
| 2.2.9 细胞中期染色分析实验 | 第33-34页 |
| 2.2.10 免疫荧光共定位 | 第34页 |
| 2.2.11 Annexin V/PI法检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 2.2.12 荧光素酶活性检测 | 第35-36页 |
| 2.2.13 EdU细胞增殖实验 | 第36-37页 |
| 2.2.14 细胞克隆形成实验 | 第37-38页 |
| 2.3 实验数据的统计分析 | 第38-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-63页 |
| 3.1 不同浓度MMC刺激对细胞活力的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 MMC刺激细胞导致染色体结构异常和DNA损伤 | 第40-41页 |
| 3.3 MMC对αⅡ Sp mRNA和蛋白水平的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 MMC刺激后miR-128表达水平上调 | 第42-43页 |
| 3.5 生物信息软件预测miR-128靶向SPTAN1的3’UTR | 第43页 |
| 3.6 荧光素酶报告实验验证miR-128靶向SPTAN1的3’-UTR | 第43-44页 |
| 3.7 过表达或下调miR-128影响αⅡ Sp的表达水平 | 第44-46页 |
| 3.8 miR-128抑制细胞分裂增殖能力 | 第46-47页 |
| 3.9 miR-128对细胞细胞周期的影响 | 第47-48页 |
| 3.10 miR-128对细胞凋亡的影响 | 第48-49页 |
| 3.11 miR-128导致细胞染色体异常 | 第49-50页 |
| 3.12 miR-128破坏αⅡ Sp/FANCA/XPF形成的复合物 | 第50-52页 |
| 3.13 miR-128靶点生物信息学分析 | 第52-63页 |
| 讨论与展望 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
