中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 嗜盐微生物的研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 嗜盐微生物的定义及分布 | 第10页 |
1.1.2 嗜盐微生物的分类 | 第10-11页 |
1.1.3 嗜盐微生物的嗜盐机理 | 第11-13页 |
1.2 26S蛋白酶调节亚基7的研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 26S蛋白酶体的结构 | 第13-15页 |
1.2.2 泛素-26S蛋白酶体途径 | 第15-16页 |
1.2.3 26S蛋白酶调节亚基 7 | 第16-18页 |
1.3 溶血素蛋白家族的研究概况 | 第18页 |
1.4 嗜盐微生物的应用 | 第18-19页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
第2章 实验材料和方法 | 第20-43页 |
2.1 材料 | 第20-27页 |
2.1.1 实验菌株 | 第20页 |
2.1.2 实验载体 | 第20页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第20页 |
2.1.4 主要培养基的配制 | 第20-26页 |
2.1.5 本实验所需引物 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-43页 |
2.2.1 基因序列的获取 | 第27页 |
2.2.2 核酸的提取方法 | 第27-31页 |
2.2.3 分子生物学基础实验 | 第31-34页 |
2.2.4 感受态细胞的制备与转化 | 第34-37页 |
2.2.5 PEG介导的原生质体转化 | 第37-38页 |
2.2.6 农杆菌介导的真菌遗传转化 | 第38-39页 |
2.2.7 表达载体的构建 | 第39-40页 |
2.2.8 酵母转化子的逆境胁迫 | 第40-41页 |
2.2.9 转AgS7嗜热菌转化子逆境胁迫处理 | 第41-43页 |
第3章 结果与分析 | 第43-62页 |
3.1 嗜盐曲霉AgS7基因的克隆与序列分析 | 第43-47页 |
3.1.1 酵母初级文库转化子NaCl胁迫的重复验证 | 第43-44页 |
3.1.2 AgS7序列分析及其编码蛋白特性分析 | 第44-45页 |
3.1.3 AgS7基因序列同源性比对及系统进化分析 | 第45-47页 |
3.1.4 基因的克隆 | 第47页 |
3.2 酵母表达载体的构建及酵母转化子的筛选 | 第47-51页 |
3.2.1 酵母表达载体的构建 | 第47-48页 |
3.2.2 酵母表达载体的转化及酵母转化子的筛选 | 第48-49页 |
3.2.3 酵母转化子逆境胁迫处理结果 | 第49-51页 |
3.3 真菌表达载体的构建及转化子的筛选 | 第51-55页 |
3.3.1 表达载体的构建 | 第51-52页 |
3.3.2 表达载体pGFPGUSPlus-AgS7的转化 | 第52-53页 |
3.3.3 AgS7转嗜热菌转化子的鉴定 | 第53-54页 |
3.3.4 AgS7转嗜热菌转化子逆境胁迫处理结果 | 第54-55页 |
3.4 对AgS7非全长序列的克隆及验证 | 第55-58页 |
3.4.1 AgS7(非全长)序列的扩增及酵母表达载体的构建 | 第55页 |
3.4.2 酵母转化子的筛选及胁迫逆境功能验证 | 第55-57页 |
3.4.3 对酵母文库转化子Ag894菌株的验证 | 第57-58页 |
3.5 溶血蛋白AgAegS基因的克隆与耐盐性验证 | 第58-62页 |
3.5.1 AgAegS基因的克隆及表达载体的构建 | 第58-59页 |
3.5.2 转化子盐胁迫逆境功能验证 | 第59-62页 |
第4章 讨论与结论 | 第62-64页 |
4.1 讨论 | 第62-63页 |
4.2 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
作者简介 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |