摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第14-25页 |
1.1 乳腺癌概述 | 第14-15页 |
1.2 上皮间质转化——EMT过程 | 第15-19页 |
1.2.1 上皮间质转化概述 | 第15-16页 |
1.2.2 上皮间质转化相关功能 | 第16-17页 |
1.2.3 上皮间质转化相关调节机制 | 第17-19页 |
1.2.4 上皮间质转化与表观遗传学 | 第19页 |
1.3 真核生物mRNA的选择性剪切与连接 | 第19-21页 |
1.3.1 选择性剪接的机制和模式 | 第19-20页 |
1.3.2 选择性剪接内部外显子的选择调控 | 第20页 |
1.3.3 选择性剪接与肿瘤 | 第20-21页 |
1.4 转录因子 | 第21-23页 |
1.4.1 转录因子概述 | 第21页 |
1.4.2 转录因子FOXM1概述 | 第21-22页 |
1.4.3 转录因子FOXM1的生物学功能 | 第22-23页 |
1.4.4 转录因子FOXM1与肿瘤 | 第23页 |
1.5 本论文的工作设想 | 第23-25页 |
第2章 内源性FOXM1B/C表达与乳腺癌细胞迁移能力 | 第25-39页 |
2.1 前言 | 第25页 |
2.2 实验材料和仪器 | 第25-28页 |
2.2.1 细胞 | 第25页 |
2.2.2 其他材料和试剂 | 第25-27页 |
2.2.3 主要实验仪器 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-36页 |
2.3.1 细胞株培养、冻存和复苏 | 第28-29页 |
2.3.2 细胞计数 | 第29页 |
2.3.3 Transwell实验 | 第29-30页 |
2.3.4 总RNA提取、逆转录以及RT-PCR | 第30-33页 |
2.3.5 Western Blotting(WB) | 第33-36页 |
2.3.6 统计分析 | 第36页 |
2.4 结果与讨论 | 第36-39页 |
2.4.1 研究体系的确定 | 第36-38页 |
2.4.2 讨论 | 第38-39页 |
第3章 FOXM1B/C-EGFP真核表达质粒的构建与胞内表达 | 第39-51页 |
3.1 前言 | 第39-40页 |
3.2 实验材料和仪器 | 第40-42页 |
3.2.1 细胞和质粒模板 | 第40页 |
3.2.2 其他材料和试剂 | 第40-41页 |
3.2.3 主要实验仪器 | 第41-42页 |
3.3 实验方法 | 第42-46页 |
3.3.1 FOXM1融合蛋白表达质粒的构建 | 第42-45页 |
3.3.2 质粒转染 | 第45-46页 |
3.3.3 Western Blotting | 第46页 |
3.3.4 荧光观测 | 第46页 |
3.3.5 统计分析 | 第46页 |
3.4 结果与讨论 | 第46-51页 |
3.4.1 质粒构建 | 第46-47页 |
3.4.2 重组质粒在真核细胞MCF-7 和MDA-MB-231细胞内的表达 | 第47页 |
3.4.3 FOXM1B/C在细胞内的定位 | 第47-49页 |
3.4.4 讨论 | 第49-51页 |
第4章 高表达FOXM1B促进上皮间质转化过程 | 第51-56页 |
4.1 前言 | 第51页 |
4.2 实验材料和仪器 | 第51-53页 |
4.2.1 细胞 | 第51页 |
4.2.2 其他材料和试剂 | 第51-52页 |
4.2.3 主要实验仪器 | 第52-53页 |
4.3 实验方法 | 第53-54页 |
4.3.1 细胞株培养 | 第53页 |
4.3.2 质粒转染 | 第53页 |
4.3.3 总RNA提取、逆转录以及RT-PCR | 第53页 |
4.3.4 Western Blotting(WB) | 第53页 |
4.3.5 Transwell实验 | 第53页 |
4.3.6 统计分析 | 第53-54页 |
4.4 结果与讨论 | 第54-56页 |
4.4.1 MCF-7细胞中高表达FOXM1B各基因的表达情况 | 第54页 |
4.4.2 MCF-7细胞中高表达FOXM1B迁移能力的变化 | 第54-55页 |
4.4.3 讨论 | 第55-56页 |
第5章 高表达FOXM1C抑制上皮间质转化过程 | 第56-61页 |
5.1 前言 | 第56页 |
5.2 实验材料和仪器 | 第56-58页 |
5.2.1 细胞 | 第56页 |
5.2.2 其他材料和试剂 | 第56-57页 |
5.2.3 主要实验仪器 | 第57-58页 |
5.3 实验方法 | 第58-59页 |
5.3.1 细胞株培养 | 第58页 |
5.3.2 质粒转染 | 第58页 |
5.3.3 总RNA提取、逆转录以及RT-PCR | 第58页 |
5.3.4 Western Blotting(WB) | 第58页 |
5.3.5 Transwell实验 | 第58页 |
5.3.6 统计分析 | 第58-59页 |
5.4 结果与讨论 | 第59-61页 |
5.4.1 MDA-MB-231细胞中高表达FOXM1C各基因的表达情况 | 第59页 |
5.4.2 MDA-MB细胞中高表达FOXM1C迁移能力的变化 | 第59-60页 |
5.4.3 讨论 | 第60-61页 |
总结与展望 | 第61-63页 |
1 结论 | 第61页 |
2 展望 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录A 英文缩写 | 第69-70页 |
附录B 常用缓冲液和试剂配方 | 第70-72页 |
附录C 攻读学位期间发表的论文 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |