| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 前列腺癌的研究概况和现状 | 第10-12页 |
| 1.1.1 前列腺癌的现状 | 第10页 |
| 1.1.2 前列腺癌的危险因素 | 第10-11页 |
| 1.1.3 三种常见的前列腺肿瘤病理细胞系 | 第11-12页 |
| 1.2 microRNA与前列腺癌 | 第12-13页 |
| 1.3 SUMO化修饰的相关研究 | 第13-18页 |
| 1.3.1 sumo化修饰的概念 | 第13-14页 |
| 1.3.2 SUMO化修饰的过程 | 第14-15页 |
| 1.3.3 SUMO化修饰的酶 | 第15-16页 |
| 1.3.4 SUMO化修饰的生物学功能 | 第16-17页 |
| 1.3.5 SUMO化与肿瘤的关系 | 第17-18页 |
| 1.4 SENP的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4.1 SENP-1 与雄激素受体AR | 第18-19页 |
| 1.4.2 SENP-1 与原癌基因c-Jun | 第19页 |
| 1.5 miR-218的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5.1 miR-218与髓母细胞瘤 | 第19页 |
| 1.5.2 miR-218与胃肠间质瘤 | 第19-20页 |
| 1.5.3 miR-218与恶性胶质瘤 | 第20页 |
| 1.6 研究意义与目的 | 第20-21页 |
| 第二章 靶向SENP1的microRNA筛选及相关质粒的构建 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验所用软件 | 第21页 |
| 2.1.2 细胞及质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂及仪器 | 第21页 |
| 2.1.4 主要实验试剂的配备 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.3 细胞传代培养 | 第23页 |
| 2.2.4 细胞冻存 | 第23页 |
| 2.2.5 RNA抽提及microRNA实时定量检测 | 第23-24页 |
| 2.2.6 质粒构建 | 第24-27页 |
| 2.3 结果及分析 | 第27-32页 |
| 2.3.1 软件Pic Tar、miRanda和Target Scan筛选miR-218 | 第27-29页 |
| 2.3.2 miR-218基因克隆 | 第29页 |
| 2.3.3 psl4-miR-218质粒的菌落PCR验证 | 第29-30页 |
| 2.3.4 psl4-miR-218质粒的酶切验证 | 第30页 |
| 2.3.5 psl4-miR-218质粒细胞学验证 | 第30-31页 |
| 2.3.6 psicheck-senp1菌落PCR | 第31页 |
| 2.3.7 psicheck-senp1双酶切实验 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 靶向SENP1基因的miR-218的验证 | 第33-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.1 细胞 | 第33页 |
| 3.1.2 试剂 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-39页 |
| 3.2.1 细胞转染实验 | 第33-34页 |
| 3.2.2 细胞活性检测 | 第34页 |
| 3.2.3 细胞增殖-毒性检测 | 第34页 |
| 3.2.4 senp13’UTR的克隆及突变 | 第34-35页 |
| 3.2.5 双荧光素酶报告基因检测miR-218对senp13’UTR序列的作用 | 第35-36页 |
| 3.2.6 细胞克隆实验 | 第36-37页 |
| 3.2.7 qPCR实验 | 第37-38页 |
| 3.2.8 Western blot检测miR-218对SENP1蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-43页 |
| 3.3.3 miR-218在PC-3 细胞中调节SENP1等相关基因的mRNA量 | 第41页 |
| 3.3.4 miR-218影响SUMO化修饰的相关蛋白 | 第41-42页 |
| 3.3.5 miR-218影响PC-3 细胞增殖 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 3.4.1 miR-218影响前列腺癌细胞PC-3 的细胞活性和增殖能力 | 第43-44页 |
| 3.4.2 miR-218通过调节基因SENP-1 的表达从而影响细胞的增殖能力 | 第44页 |
| 3.4.3 miR-218下调基因SENP-1 的表达 | 第44页 |
| 3.4.4 miR-218影响细胞中SUMO相关蛋白 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
