摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
本文常用英文缩略词表 | 第16-17页 |
第1章 绪论 | 第17-40页 |
1.1 激酶的概述 | 第17-22页 |
1.1.1 激酶的生物学意义 | 第17-19页 |
1.1.2 激酶的传统生物传感检测方法 | 第19-22页 |
1.2 电化学生物传感器 | 第22-29页 |
1.2.1 电化学生物传感器的原理 | 第22-23页 |
1.2.2 电化学生物传感器的分类 | 第23-26页 |
1.2.3 电化学生物传感器在激酶检测中的应用 | 第26-29页 |
1.3 基于信号放大技术构建的电化学生物传感器 | 第29-37页 |
1.3.1 酶的信号放大技术 | 第30-31页 |
1.3.2 纳米材料的信号放大技术 | 第31-34页 |
1.3.3 核酸的信号放大技术 | 第34-37页 |
1.4 本文构思 | 第37-40页 |
第2章 基于正电荷金纳米颗粒/碳纳米管纳米复合物信号放大电化学检测蛋白激酶A活性 | 第40-51页 |
2.1 前言 | 第40-41页 |
2.2 实验部分 | 第41-44页 |
2.2.1 试剂和仪器 | 第41-42页 |
2.2.2 正电荷AuNPs的制备 | 第42页 |
2.2.3 AuNP/MWNTs纳米复合物的制备 | 第42-43页 |
2.2.4 底物肽在工作电极上的修饰 | 第43页 |
2.2.5 基于PKA催化的磷酸化反应及抑制剂考察 | 第43页 |
2.2.6 电化学检测 | 第43-44页 |
2.3 结果与讨论 | 第44-50页 |
2.3.1 实验原理 | 第44页 |
2.3.2 AuNPs/MWNTs纳米复合物的表征 | 第44-45页 |
2.3.3 电极表面修饰表征 | 第45-46页 |
2.3.4 实验可行性研究 | 第46-47页 |
2.3.5 实验条件的优化 | 第47-48页 |
2.3.6 PKA活性的检测 | 第48-49页 |
2.3.7 抑制剂的考察 | 第49页 |
2.3.8 选择性和重现性的考察 | 第49-50页 |
2.4 小结 | 第50-51页 |
第3章 基于DNA酶和金纳米颗粒双猝灭石墨烯量子点电化学发光检测蛋白激酶A活性 | 第51-64页 |
3.1 前言 | 第51-52页 |
3.2 实验部分 | 第52-55页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第52-54页 |
3.2.2 GQDs的制备 | 第54页 |
3.2.3 AuNPs的制备及表面DNA修饰 | 第54页 |
3.2.4 工作电极的修饰 | 第54-55页 |
3.2.5 电化学发光和电化学检测PKA活性 | 第55页 |
3.2.6 细胞提取液的制备 | 第55页 |
3.3 结果与讨论 | 第55-63页 |
3.3.1 实验原理 | 第55-56页 |
3.3.2 GQDs的表征 | 第56-57页 |
3.3.3 电极表面修饰表征 | 第57-59页 |
3.3.4 实验可行性研究 | 第59页 |
3.3.5 实验条件的优化 | 第59-60页 |
3.3.6 PKA的活性检测 | 第60-61页 |
3.3.7 抑制剂的考察 | 第61-62页 |
3.3.8 选择性和重现性的考察 | 第62页 |
3.3.9 PKA在复杂生物样中的检测 | 第62-63页 |
3.4 小结 | 第63-64页 |
第4章 基于核酸动态自组装构建的均相电化学传感策略用于T4多核苷酸激酶放大检测 | 第64-77页 |
4.1 前言 | 第64-65页 |
4.2 实验部分 | 第65-68页 |
4.2.1 试剂与仪器 | 第65-67页 |
4.2.2 工作电极的处理与制备 | 第67页 |
4.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第67页 |
4.2.4 圆二色谱表征 | 第67页 |
4.2.5 T4 PNA和抑制剂的检测分析 | 第67-68页 |
4.2.6 细胞提取液的制备 | 第68页 |
4.3 结果和讨论 | 第68-75页 |
4.3.1 基本原理 | 第68-69页 |
4.3.2 DNA自组装结构的表征 | 第69-71页 |
4.3.3 实验可行性研究 | 第71-72页 |
4.3.4 实验条件的优化 | 第72-73页 |
4.3.5 T4 PNK的活性检测 | 第73-74页 |
4.3.6 抑制剂的考察 | 第74页 |
4.3.7 选择性的考察 | 第74-75页 |
4.3.8 T4 PNK在细胞提取液中的检测 | 第75页 |
4.4 小结 | 第75-77页 |
第5章 基于介孔硅膜和羧肽酶选择切割多肽构建免标记均相电化学传感平台用于蛋白激酶的检测 | 第77-90页 |
5.1 前言 | 第77-79页 |
5.2 实验部分 | 第79-81页 |
5.2.1 实验试剂和仪器 | 第79-80页 |
5.2.2 MSFs功能化电极的制备 | 第80页 |
5.2.3 蛋白激酶活性及其抑制剂考察 | 第80页 |
5.2.4 电化学测定 | 第80-81页 |
5.2.5 蛋白激酶在细胞提取液中的检测 | 第81页 |
5.3 结果与讨论 | 第81-89页 |
5.3.1 实验原理 | 第81-82页 |
5.3.2 MSFs的表征 | 第82-84页 |
5.3.3 实验可行性研究 | 第84页 |
5.3.4 实验条件的优化 | 第84-85页 |
5.3.5 PKA活性及其抑制剂的检测 | 第85-87页 |
5.3.6 CK2活性及其抑制剂的检测 | 第87-88页 |
5.3.7 复杂生物样中蛋白激酶活性分析 | 第88-89页 |
5.4 小结 | 第89-90页 |
第6章 基于介孔硅膜构建的免标记和通用型电化学发光核酸适配体传感平台 | 第90-103页 |
6.1 前言 | 第90-91页 |
6.2 实验部分 | 第91-94页 |
6.2.1 试剂与仪器 | 第92-93页 |
6.2.2. MSFs功能化电极的制备与修饰 | 第93页 |
6.2.3 电化学发光核酸适配体生物传感器制备 | 第93-94页 |
6.2.4 电化学和电化学发光测定 | 第94页 |
6.3 结果与讨论 | 第94-102页 |
6.3.1 实验原理 | 第94页 |
6.3.2 MSFs的表征 | 第94-97页 |
6.3.3 实验可行性研究 | 第97-98页 |
6.3.4 溶菌酶的检测 | 第98-100页 |
6.3.5 腺苷的检测 | 第100-101页 |
6.3.6 K~+的检测 | 第101页 |
6.3.7 重现性的考察 | 第101-102页 |
6.3.8 复杂生物样中的检测 | 第102页 |
6.4 小结 | 第102-103页 |
结论 | 第103-105页 |
参考文献 | 第105-124页 |
附录 攻读博士学位期间已完成的学术论文 | 第124-126页 |
致谢 | 第126-127页 |