| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 细胞凋亡概述 | 第13页 |
| 1.2 细胞凋亡机制 | 第13-14页 |
| 1.3 CASPASE家族研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 Caspase家族的命名与种类 | 第14-15页 |
| 1.3.2 Caspase家族的结构与功能 | 第15-16页 |
| 1.4 脂肪组织与脂肪细胞 | 第16-20页 |
| 1.4.1 脂肪细胞的发育过程 | 第17-18页 |
| 1.4.2 鱼类脂肪组织与脂肪细胞 | 第18-19页 |
| 1.4.3 脂肪细胞的凋亡与抗凋亡 | 第19-20页 |
| 1.5 肝脏脂质代谢研究进展 | 第20-22页 |
| 1.5.1 肝细胞与脂质沉积 | 第20-21页 |
| 1.5.2 肝细胞凋亡研究进展 | 第21-22页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 草鱼凋亡相关基因的克隆及生物信息学分析 | 第23-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-27页 |
| 2.1.1 试验草鱼 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.3 总RNA提取及反转录 | 第24页 |
| 2.1.4 引物的设计与合成 | 第24-25页 |
| 2.1.5 PCR扩增ORF框 | 第25-26页 |
| 2.1.6 PCR电泳产物回收与DNA纯化 | 第26页 |
| 2.1.7 目的片段与载体连接 | 第26页 |
| 2.1.8 目的基因的转化 | 第26页 |
| 2.1.9 目的基因的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.1.10 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2 结果 | 第27-32页 |
| 2.2.1 草鱼脂肪组织总RNA浓度和质量检测 | 第27-28页 |
| 2.2.2 草鱼caspase家族基因的克隆与鉴定 | 第28页 |
| 2.2.3 草鱼caspase家族基因及其编码氨基酸的序列结构分析 | 第28-29页 |
| 2.2.4 草鱼caspase家族蛋白结构域分析 | 第29-30页 |
| 2.2.5 草鱼caspase家族成员基因结构分析 | 第30-31页 |
| 2.2.6 草鱼caspase家族成员基因序列的同源性比较 | 第31页 |
| 2.2.7 草鱼caspase家族成员基因序列的进化树分析 | 第31-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-35页 |
| 第三章 脂肪细胞分化过程中凋亡特性的研究 | 第35-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第35-39页 |
| 3.1.1 试验草鱼 | 第35页 |
| 3.1.2 主要试剂及仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.3 草鱼前体脂肪细胞获得及培养 | 第36页 |
| 3.1.4 细胞分化检测 | 第36-37页 |
| 3.1.5 流式细胞术检测脂肪细胞分化过程中凋亡率变化 | 第37页 |
| 3.1.6 Real-time PCR检测相关基因的m RNA的表达 | 第37-38页 |
| 3.1.7 Western Blot检测分化过程中相关蛋白变化 | 第38-39页 |
| 3.1.8 分化过程中凋亡相关蛋白酶活性的变化 | 第39页 |
| 3.1.9 数据分析 | 第39页 |
| 3.2 结果 | 第39-45页 |
| 3.2.1 草鱼脂肪细胞分化过程中形态学变化 | 第39-42页 |
| 3.2.2 脂肪细胞分化过程中凋亡率的变化 | 第42页 |
| 3.2.3 脂肪细胞分化过程中分化标志基因的表达 | 第42-43页 |
| 3.2.4 脂肪细胞分化过程中凋亡相关基因的表达 | 第43-44页 |
| 3.2.5 脂肪细胞分化过程中分化和凋亡相关蛋白的表达 | 第44页 |
| 3.2.6 脂肪细胞分化过程中凋亡蛋白酶的活性变化 | 第44-45页 |
| 3.3 讨论 | 第45-47页 |
| 3.4 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 草鱼肝细胞充脂过程中凋亡特性的研究 | 第48-58页 |
| 4.1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第48页 |
| 4.1.2 草鱼肝细胞的培养 | 第48-49页 |
| 4.1.3 MTT检测不同浓度油酸对肝细胞活力影响 | 第49页 |
| 4.1.4 油红O染色提取法测定脂质含量 | 第49页 |
| 4.1.5 BODIPY染色法和DAPI染色法观察肝细胞内脂滴和细胞核变化 | 第49页 |
| 4.1.6 流式细胞术检测不同浓度油酸对肝细胞凋亡的影响 | 第49页 |
| 4.1.7 Real-time PCR检测相关基因的m RNA的表达 | 第49-50页 |
| 4.1.8 统计分析 | 第50页 |
| 4.2 结果与分析 | 第50-55页 |
| 4.2.1 油酸处理对草鱼肝细胞活力的影响 | 第50页 |
| 4.2.2 油酸处理对草鱼肝细胞脂质蓄积的影响 | 第50-52页 |
| 4.2.3 油酸处理对草鱼肝细胞凋亡率的影响 | 第52-53页 |
| 4.2.4 油酸处理对草鱼肝细胞脂质生成基因和凋亡相关基因表达的影响 | 第53-55页 |
| 4.3 讨论 | 第55-57页 |
| 4.4 小结 | 第57-58页 |
| 第五章 综合讨论与结论 | 第58-62页 |
| 5.1 综合讨论 | 第58-60页 |
| 5.2 结论 | 第60-61页 |
| 5.3 创新点 | 第61页 |
| 5.4 下一步研究内容 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 附录 | 第72-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
