| 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 华北大黑鳃金龟的概论 | 第14-16页 |
| 1.1.1 华北大黑鳃金龟的分布与危害 | 第14页 |
| 1.1.2 华北大黑鳃金龟的形态特征 | 第14-15页 |
| 1.1.3 华北大黑鳃金龟的世代规律 | 第15页 |
| 1.1.4 华北大黑鳃金龟的防治方法 | 第15-16页 |
| 1.2 信息素在昆虫行为中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.1 寄主植物挥发物对昆虫行为的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.2 昆虫信息素的研究 | 第17页 |
| 1.3 昆虫OBPS的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.3.1 昆虫OBPs三维结构与功能特性的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.2 昆虫OBPs与气味分子结合机制研究 | 第18-19页 |
| 1.3.3 昆虫OBPs互作机制 | 第19-20页 |
| 1.4 荧光原位杂交技术在昆虫嗅觉受体和OBPS的中的应用 | 第20-21页 |
| 1.5 研究的内容及目的和意义 | 第21-23页 |
| 1.5.1 研究的目的和意义 | 第21页 |
| 1.5.2 研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 1.5.3 研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 华北大黑鳃金龟气味结合蛋白在触角中共表达的研究 | 第23-29页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-27页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.3 探针序列信息 | 第24页 |
| 2.1.4 试剂制备 | 第24页 |
| 2.1.5 工作液的配制 | 第24-25页 |
| 2.1.6 冰冻切片的制备 | 第25-26页 |
| 2.1.7 实验操作步骤 | 第26-27页 |
| 2.2 结果与分析 | 第27-28页 |
| 2.3 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 华北大黑鳃金龟OBPS复合物模拟及分子对接的研究 | 第29-37页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-30页 |
| 3.1.1 HoblOBP1和HoblOBP2的三维结构模型 | 第29页 |
| 3.1.2 蛋白质-蛋白质复合物的结构模拟 | 第29页 |
| 3.1.3 蛋白复合物与配体的对接模拟 | 第29-30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-35页 |
| 3.2.1 HoblOBP1和HoblOBP2蛋白复合物结构模拟分析 | 第30-33页 |
| 3.2.2 HoblOBP1/OBP2复合物与配体对接的关键氨基酸位点预测 | 第33-35页 |
| 3.3 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 华北大黑鳃金龟OBP1/OBP2功能位点突变及蛋白表达纯化 | 第37-55页 |
| 4.1 材料与方法 | 第37-45页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第37-38页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 4.1.3 定点突变 | 第38-40页 |
| 4.1.4 突变质粒的获得 | 第40-41页 |
| 4.1.5 突变蛋白及原蛋白的原核表达 | 第41页 |
| 4.1.6 SDS-PAGE垂直电泳检测突变蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 4.1.7 蛋白的表达与纯化 | 第42-44页 |
| 4.1.8 蛋白浓度的测定 | 第44页 |
| 4.1.9 透析与超滤 | 第44-45页 |
| 4.1.10 纯化蛋白的获得 | 第45页 |
| 4.2 结果与分析 | 第45-53页 |
| 4.2.1 HoblOBP1/OBP2复合物功能位点的突变 | 第45-48页 |
| 4.2.2 突变蛋白的纯化分析 | 第48-53页 |
| 4.3 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 华北大黑鳃金龟OBP1/OBP2与配体结合机制的研究 | 第55-68页 |
| 5.1 材料与方法 | 第55-56页 |
| 5.1.1 主要试剂与设备 | 第55页 |
| 5.1.2 荧光结合的分析 | 第55-56页 |
| 5.1.3 混合蛋白的荧光结合分析 | 第56页 |
| 5.2 结果与分析 | 第56-65页 |
| 5.2.1 原蛋白互作及突变蛋白互作的结合特征分析 | 第56-59页 |
| 5.2.2 单一原蛋白和原蛋白复合物的竞争结合特性 | 第59-60页 |
| 5.2.3 突变蛋白复合物的竞争结合分析 | 第60-65页 |
| 5.2.3.1 HoblOBP1/OBP2间3对氢键对蛋白与配体的竞争结合的影响 | 第60-62页 |
| 5.2.3.2 不同氨基酸单点突变的HoblOBP1/OBP2与配体的竞争结合分析 | 第62-64页 |
| 5.2.3.3 不同氨基酸双点突变的HoblOBP1/OBP2与配体的竞争结合分析 | 第64-65页 |
| 5.3 讨论 | 第65-68页 |
| 第六章 全文结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
