| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 引言 | 第18-20页 |
| 第2章 综述 | 第20-48页 |
| 2.1 视神经保护的研究进展 | 第20-29页 |
| 2.1.1 对抗谷氨酸的毒性作用 | 第21-23页 |
| 2.1.2 神经营养因子治疗 | 第23-24页 |
| 2.1.3 抗NO活性 | 第24页 |
| 2.1.4 钙通道阻断药 | 第24-25页 |
| 2.1.5 RGCs凋亡的基因调控 | 第25-26页 |
| 2.1.6 其他治疗 | 第26-29页 |
| 2.1.7 结束语 | 第29页 |
| 2.2 ClC氯离子通道的研究现状 | 第29-39页 |
| 2.2.1 ClC通道的组织分布 | 第30页 |
| 2.2.2 ClC通道的分类 | 第30页 |
| 2.2.3 ClC氯离子通道的结构特点 | 第30-31页 |
| 2.2.4 ClC氯通道的特性 | 第31页 |
| 2.2.5 氯离子通道的生物学特点 | 第31-36页 |
| 2.2.6 各种ClC氯通道简介 | 第36-39页 |
| 2.3 TGF-β/Smads信号转导机制的研究进展 | 第39-48页 |
| 2.3.1 TGF-β信号 | 第39-45页 |
| 2.3.2 TGF-β及TGF-β/Smad在眼科中的研究进展 | 第45-48页 |
| 第3章 ClC氯离子通道及转化生长因子β在RGC-5细胞的表达 | 第48-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第48-50页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第48-49页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第49页 |
| 3.1.3 细胞株 | 第49页 |
| 3.1.4 ClC-3 RT-PCR引物 | 第49-50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第50页 |
| 3.2.2 RT-PCR方法检测ClC氯离子通道mRNA在RGC-5细胞上的表达 | 第50-52页 |
| 3.2.3 免疫组织化学方法检测ClC-3氯离子通道蛋白在RGC-5细胞上的表达 | 第52页 |
| 3.3 实验结果 | 第52-55页 |
| 3.3.1 RT-PCR检测氯离子通道mRNA在RGC-5细胞上的表达 | 第52-53页 |
| 3.3.2 RT-PCR检测转化生长因子(TGF-β)mRNA在RGC-5细胞上的表达 | 第53-54页 |
| 3.3.3 免疫组织化学染色检测ClC-3蛋白在RGC-5细胞上的表达 | 第54-55页 |
| 3.4 小结 | 第55-56页 |
| 第4章 谷氨酸诱导RGC-5细胞的凋亡 | 第56-61页 |
| 4.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第56页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第56-57页 |
| 4.1.3 实验分组 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-58页 |
| 4.2.1 谷氨酸诱导的RGC-5细胞调亡 | 第57页 |
| 4.2.2 MTT法检测谷氨酸对RGC-5细胞调亡的影响 | 第57页 |
| 4.2.3 DNA ladder检测谷氨酸对RGC-5细胞调亡的影响 | 第57-58页 |
| 4.2.4 流式细胞仪检测谷氨酸对RGC-5细胞调亡的影响 | 第58页 |
| 4.2.5 统计学分析 | 第58页 |
| 4.3 实验结果 | 第58-60页 |
| 4.3.1 MTT法检测谷氨酸对RGC-5细胞调亡的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.2 DNA ladder检测谷氨酸对RGC-5细胞调亡的影响 | 第59页 |
| 4.3.3 流式细胞仪检测谷氨酸对RGC-5细胞调亡的影响 | 第59-60页 |
| 4.4 小结 | 第60-61页 |
| 第5章 ClC-3的过表达对RGC-5细胞凋亡的影响 | 第61-67页 |
| 5.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第61页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第61页 |
| 5.1.3 实验分组 | 第61-62页 |
| 5.2 实验方法 | 第62-63页 |
| 5.2.1 cDNA转染 | 第62页 |
| 5.2.2 RT-PCR方法检测各组细胞ClC-3 mRNA的表达 | 第62页 |
| 5.2.3 Western blot方法检测各组细胞ClC-3蛋白的表达 | 第62-63页 |
| 5.2.4 MTT法检测各组细胞的存活率 | 第63页 |
| 5.2.5 DNA ladder检测各组细胞的凋亡率 | 第63页 |
| 5.2.6 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第63页 |
| 5.2.7 统计学分析 | 第63页 |
| 5.3 实验结果 | 第63-66页 |
| 5.3.1 RT-PCR方法检测各组细胞ClC-3 mRNA的表达 | 第63-64页 |
| 5.3.2 Western blot方法检测各组细胞ClC-3蛋白的表达 | 第64-65页 |
| 5.3.3 MTT法检测各组细胞的存活率 | 第65页 |
| 5.3.4 DNA ladder检测各组细胞的凋亡率 | 第65-66页 |
| 5.3.5 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第66页 |
| 5.4 小结 | 第66-67页 |
| 第6章 抑制ClC-3的表达对RGC-5凋亡的影响及TGF-β/Smads信号转导通路的作用 | 第67-74页 |
| 6.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第67页 |
| 6.1.2 主要仪器设备 | 第67页 |
| 6.1.3 实验分组 | 第67-68页 |
| 6.1.4 stealth siRNA引物的设计 | 第68页 |
| 6.2 实验方法 | 第68-69页 |
| 6.2.1 RNAi抑制RGC-5内ClC-3的表达 | 第68页 |
| 6.2.2 RT-PCR方法检测各组细胞ClC-3 mRNA的表达 | 第68页 |
| 6.2.3 Western blot方法检测各组细胞ClC-3蛋白的表达 | 第68页 |
| 6.2.4 MTT法检测各组细胞的存活率 | 第68页 |
| 6.2.5 DNA ladder检测各组细胞的凋亡率 | 第68页 |
| 6.2.6 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第68-69页 |
| 6.2.7 用RT-PCR及Western blot方法检测各组细胞TGF-β2、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7的表达 | 第69页 |
| 6.2.8 统计学分析 | 第69页 |
| 6.3 实验结果 | 第69-73页 |
| 6.3.1 RT-PCR方法检测各组细胞ClC-3 mRNA的表达 | 第69-70页 |
| 6.3.2 Western blot方法检测各组细胞ClC-3蛋白的表达 | 第70页 |
| 6.3.3 MTT法检测各组细胞的存活率 | 第70-71页 |
| 6.3.4 DNA ladder检测各组细胞的凋亡率 | 第71-72页 |
| 6.3.5 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第72页 |
| 6.3.6 RT-PCR及Western blot方法检测各组细胞TGF-β2、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7的表达 | 第72-73页 |
| 6.4 小结 | 第73-74页 |
| 第7章 讨论 | 第74-81页 |
| 第8章 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-102页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
