| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 研究背景 | 第9页 |
| 1.2 盐碱胁迫对植物的影响 | 第9-11页 |
| 1.2.1 对种子萌发的影响 | 第9-10页 |
| 1.2.2 对植物生长发育的影响 | 第10页 |
| 1.2.3 对生物膜的影响 | 第10-11页 |
| 1.3 玉米耐盐碱胁迫研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3.1 作物耐盐胁迫研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3.2 植物抗盐相关基因 | 第12-13页 |
| 1.3.3 耐碱胁迫研究进展 | 第13页 |
| 1.4 DNA甲基化概况 | 第13-17页 |
| 1.4.1 表观遗传学与DNA甲基化 | 第13-14页 |
| 1.4.2 DNA甲基化原理及机制 | 第14页 |
| 1.4.3 DNA甲基化的生物学功能 | 第14-16页 |
| 1.4.3.1 DNA甲基化与植物生长发育 | 第14-15页 |
| 1.4.3.2 DNA甲基化与植物非生物胁迫 | 第15-16页 |
| 1.4.3.3 DNA甲基化与基因组防御 | 第16页 |
| 1.4.3.4 DNA甲基化与基因组印记 | 第16页 |
| 1.4.4 DNA去甲基化 | 第16-17页 |
| 1.4.5 去甲基化酶ROS1基因家族 | 第17页 |
| 1.5 DNA甲基化的研究方法 | 第17-19页 |
| 1.5.1 MSAP技术 | 第17-18页 |
| 1.5.2 重亚硫酸氢盐修饰法 | 第18-19页 |
| 1.5.3 免疫共沉淀技术 | 第19页 |
| 1.5.4 高效液相色谱法 | 第19页 |
| 1.6 研究目的 | 第19-20页 |
| 1.7 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 玉米去甲基化酶ROS1家族生物信息学分析 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
| 2.2 主要仪器 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.3.1 玉米去甲基化酶ROS1家族的生物信息学预测 | 第21-22页 |
| 2.3.1.1 玉米去甲基化酶基因ROS1家族的获取与定位 | 第22页 |
| 2.3.1.2 玉米去甲基化酶ROS1家族的理化特性、信号序列及亚细胞定位 | 第22页 |
| 2.3.1.3 玉米去甲基化酶ROS1家族的二级结构及氨基酸序列分析 | 第22页 |
| 2.3.1.4 玉米去甲基化酶ROS1家族的分子进化分析 | 第22页 |
| 2.3.2 qRT-PCR表达验证 | 第22-25页 |
| 2.3.2.1 玉米幼苗培养 | 第22-23页 |
| 2.3.2.2 总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.3.2.3 cDNA合成 | 第24页 |
| 2.3.2.4 Real-time PCR分析 | 第24-25页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.4.1 玉米去甲基化酶基因ROS1的生物信息学分析 | 第25-29页 |
| 2.4.1.1 玉米去甲基化酶基因ROS1的获取 | 第25页 |
| 2.4.1.2 玉米去甲基化酶ROS1的理化特性、信号序列及亚细胞定位分析 | 第25-26页 |
| 2.4.1.3 玉米去甲基化酶ROS1的二级结构及结构域分析 | 第26-27页 |
| 2.4.1.4 玉米去甲基化酶ROS1家族的分子进化分析 | 第27-29页 |
| 2.4.2 qRT-PCR表达验证分析 | 第29-30页 |
| 2.4.2.1 RNA提取及cDNA一链合成 | 第29-30页 |
| 2.4.2.2 基因表达分析 | 第30页 |
| 2.5 结论与讨论 | 第30-33页 |
| 2.5.1 结论 | 第30页 |
| 2.5.2 讨论 | 第30-33页 |
| 2.5.2.1 ROS1参与DNA去甲基化的作用机制 | 第30-31页 |
| 2.5.2.2 ROS1的生物信息学预测 | 第31-33页 |
| 第三章 盐胁迫下玉米DNA甲基化变异的研究 | 第33-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第33页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第33页 |
| 3.2 主要仪器 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-44页 |
| 3.3.1 玉米幼苗培养 | 第33页 |
| 3.3.2 玉米基因组DNA提取 | 第33-35页 |
| 3.3.3 DNA酶切及人工接头连接 | 第35-36页 |
| 3.3.4 预扩增 | 第36页 |
| 3.3.5 选择性扩增 | 第36-37页 |
| 3.3.6 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） | 第37-39页 |
| 3.3.7 PAGE银染 | 第39页 |
| 3.3.8 目的条带的回收 | 第39-40页 |
| 3.3.9 目的片段琼脂糖回收测序 | 第40页 |
| 3.3.10 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| 3.3.11 质粒转化验证 | 第41页 |
| 3.3.12 与T载体连接 | 第41-42页 |
| 3.3.13 平板转化 | 第42-43页 |
| 3.3.14 测序结果分析 | 第43页 |
| 3.3.15 荧光定量PCR验证 | 第43-44页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第44-51页 |
| 3.4.1 苗期长势 | 第44页 |
| 3.4.2 基因组DNA的提取、纯化、酶切及连接 | 第44-45页 |
| 3.4.3 预扩增 | 第45页 |
| 3.4.4 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45-46页 |
| 3.4.5 不同浓度盐处理下基因组DNA甲基化水平分析 | 第46-47页 |
| 3.4.6 基因组DNA甲基化类型的变化分析 | 第47-48页 |
| 3.4.7 差异片段的回收测序 | 第48-49页 |
| 3.4.8 测序结果同源性分析 | 第49-51页 |
| 3.4.9 候选基因qRT-PCR | 第51页 |
| 3.5 结论与讨论 | 第51-55页 |
| 3.5.1 结论 | 第51-52页 |
| 3.5.2 讨论 | 第52-55页 |
| 3.5.2.1 MSAP技术应用探讨 | 第52页 |
| 3.5.2.2 DNA去甲基化在植物研究中的意义 | 第52页 |
| 3.5.2.3 植物甲基化变化与耐盐性关系 | 第52-55页 |
| 第四章 结论 | 第55-57页 |
| 4.1 玉米ROS1基因家族的生物信息学分析 | 第55页 |
| 4.2 盐胁迫下DNA甲基化变异的研究 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 个人简历 | 第69页 |
