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大肠杆菌麦芽糖结合蛋白联合卡介苗通过TLR2/TLR4/TLR9间的cross-talk协同诱导Th1活化

提 要第4-6页
中文摘要第6-12页
Abstract第12-17页
英文词表第18-23页
第1章 文献回顾第23-39页
    1.1 MBP 作为免疫增强剂的研究第23-24页
    1.2 卡介苗(BCG)研究现状第24-26页
    1.3 Toll 样受体家族研究现状第26-35页
        1.3.1 TLR 在细胞中的分布第26-27页
        1.3.2 TLRs 识别的配体第27页
        1.3.3 TLRs 的信号转导第27-33页
        1.3.4 TLRs 之间的相互作用对免疫系统功能的调节第33-35页
    1.4 本课题设计思路及主要研究内容第35-39页
        1.4.1 本课题的设计思路第35页
        1.4.2 本课题研究的具体内容第35-37页
        1.4.3 本课题的特色第37-39页
第2章 MBP 联合 BCG 对小鼠淋巴细胞的作用第39-59页
    2.1 实验材料第39-41页
        2.1.1 实验动物第39页
        2.1.2 实验试剂第39页
        2.1.3 主要试剂的配制第39-41页
        2.1.4 主要实验仪器第41页
    2.2 主要实验方法第41-46页
        2.2.1 MBP 的分离纯化第41-42页
        2.2.2 小鼠脾脏单个核细胞的分离与培养第42页
        2.2.3 实验体系建立第42-43页
        2.2.4 CFSE 实验检测淋巴细胞增殖第43页
        2.2.5 流式细胞术检测淋巴细胞亚群第43-44页
        2.2.6 ELISA 实验检测细胞培养上清中 IFN-γ和 IL-4 的分泌第44-45页
        2.2.7 流式细胞术检测细胞因子释放第45页
        2.2.8 流式细胞术检测 CD4~+T,CD8~+T 细胞上 TLR2/TLR4 的表达第45-46页
        2.2.9 统计学处理第46页
    2.3 实验结果第46-56页
        2.3.1 MBP 联合 BCG 协同促进脾脏淋巴细胞增殖第46-49页
        2.3.2 MBP 联合 BCG 协同增加 CD4~+T 细胞亚群的比例第49-50页
        2.3.3 MBP 联合 BCG 协同诱导小鼠脾脏淋巴细胞分泌 IFN-γ28第50-52页
        2.3.4 MBP 联合 BCG 协同诱导 CD4~+T 淋巴细胞胞发生 Th1 极化第52-54页
        2.3.5 MBP 联合 BCG 增加 TLR2 以及 TLR4 在 CD4~+T 细胞上的表达第54-56页
    2.4 讨论第56-57页
    2.5 小结第57-59页
第3章 MBP 联合 BCG 诱导 Th1 活化的机制研究第59-99页
    3.1 实验材料第59-62页
        3.1.1 实验动物第59页
        3.1.2 实验试剂第59-60页
        3.1.3 主要试剂的配制第60-61页
        3.1.4 主要实验仪器第61-62页
    3.2 主要实验方法第62-67页
        3.2.1 CD4~+T 细胞的纯化第62页
        3.2.2 CD4~+ T 细胞的活化第62页
        3.2.3 WST1 实验检测 CD4~+ T 细胞增殖第62-63页
        3.2.4 ELISA 实验检测 IFN-γ和 IL-4 分泌第63页
        3.2.5 qRT-PCR 检测 IFN-γ和 IL-4 mRNA 表达第63-64页
        3.2.6 qRT-PCR 检测 TLRs 信号通路相关分子 mRNA 表达第64-65页
        3.2.7 Western blot 检测 TLRs 信号通路相关分子蛋白表达第65-66页
        3.2.8 ELISA 实验检测 TLR2、TLR4、TLR9 封闭后 IFN-γ和IL-4 分泌第66页
        3.2.9 qRT-PCR 检测 TLR2、TLR4、TLR9 封闭后 IFN-γ和 IL-4 mRNA 表达第66页
        3.2.10 Western blot 检测 TLR2、TLR4、TLR9 封闭后 TLRs 信号 通路相关分子蛋白表达第66页
        3.2.11 qRT-PCR 检测 TLR2 封闭后 TLR4、TLR9 mRNA 表达.44第66页
        3.2.12 qRT-PCR 检测 TLR4 封闭后 TLR2、TLR9 mRNA 表达第66-67页
        3.2.13 qRT-PCR 检测 TLR9 封闭后 TLR2、TLR4 mRNA 表达第67页
        3.2.14 qRT-PCR 检测 Pam3CSK4,LPS,CPG-ODN 对 IFN-γ, TLR2、TLR4、TLR9 mRNA 表达第67页
        3.2.15 统计学处理第67页
    3.3 实验结果第67-91页
        3.3.1 CD4~+T 细胞的纯化与活化第67-69页
        3.3.2 MBP 联合 BCG 协同促进 CD4~+T 细胞增殖第69-70页
        3.3.3 MBP 联合 BCG 协同诱导 Th1 活化第70-73页
        3.3.4 MBP 联合 BCG 协同上调 TLR2、TLR4、TLR9 的表达第73-74页
        3.3.5 MBP 联合 BCG 协同活化 TLR2、TLR4 及 TLR9 介导的MyD88 依赖途径和 TRIF 依赖途径第74-76页
        3.3.6 TLR2 介导的 MyD88 依赖途径部分促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化第76-79页
        3.3.7 TLR4 介导的 TRIF 依赖途径通过上调 TRAF6,下调TRAF3 表达部分促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化57第79-82页
        3.3.8 TLR9 通过促进 MyD88 依赖途径及 TRIF/TRAF6 途径,抑制 TRIF/ TRAF3 途径显著促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 60活化第82-85页
        3.3.9 TLR2/TLR4/TLR9 在 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化中的相互作用第85-88页
        3.3.10 TLR2、TLR4、TLR9 信号传导在 TLR2、TLR4、TLR9激动剂诱导的 Th1 活化中的 crosstalk第88-91页
    3.4 讨论第91-96页
        3.4.1 TLR2/TLR4/TLR9 促进 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化第91-94页
        3.4.2 TRAF6 和 TRAF3 在 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化中的作用第94-95页
        3.4.3 TLR2/TLR4/TLR9 在 MBP 联合 BCG 诱导的 Th1 活化中的cross-talk第95-96页
    3.5 小结第96-99页
第4章 结论第99-101页
参考文献第101-111页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第111-113页
致谢第113页

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