摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-19页 |
第一篇 鱼腥草注射液对SD大鼠致敏性反应的评价 | 第19-29页 |
1 材料及方法 | 第19-23页 |
1.1 实验动物及饲养管理 | 第19页 |
1.2 仪器与试剂 | 第19页 |
1.2.1 主要仪器 | 第19页 |
1.2.2 主要试剂 | 第19页 |
1.2.3 试剂的配制 | 第19页 |
1.3 引物的设计与合成 | 第19-20页 |
1.4 动物实验设计 | 第20-21页 |
1.4.1 实验动物分组 | 第20页 |
1.4.2 给药剂量 | 第20-21页 |
1.5 试验方法 | 第21-23页 |
1.5.1 主动过敏实验 | 第21页 |
1.5.2 行为学变化 | 第21页 |
1.5.3 大鼠血清中IgG、IgE、组胺的检测 | 第21-22页 |
1.5.4 大鼠体内IL-4、IL-10、IL-13及IFN-γmRNA水平的检测 | 第22-23页 |
2 实验结果 | 第23-27页 |
2.1 主动过敏实验结果 | 第23页 |
2.2 ELISA实验结果 | 第23-25页 |
2.3 SD大鼠体内IL-4、IL-10、IL-13及IFN-γ四种细胞因子mRNA相对表达量 | 第25-27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
第二篇 鱼腥草注射液对猕猴致敏反应的评价 | 第29-46页 |
第一章 鱼腥草注射液对猕猴致敏实验 | 第29-35页 |
1 材料及方法 | 第29-30页 |
1.1 实验动物及饲养管理 | 第29页 |
1.2 仪器与试剂 | 第29-30页 |
1.2.1 主要仪器试剂 | 第29页 |
1.2.2 试剂的配制 | 第29-30页 |
1.3 动物实验设计 | 第30页 |
1.3.1 实验动物分组 | 第30页 |
1.3.2 给药剂量 | 第30页 |
2 试验方法 | 第30-31页 |
2.1 主动过敏实验 | 第30页 |
2.2 行为学变化 | 第30-31页 |
2.3 猕猴血清中IgG、IgE、组胺的检测 | 第31页 |
2.3.1 血清的采集 | 第31页 |
2.3.2 ELISA操作方法 | 第31页 |
3 实验结果 | 第31-34页 |
3.1 全身主动过敏实验结果 | 第31-32页 |
3.2 ELISA实验结果 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
第二章 猕猴过敏相关细胞因子荧光定量PCR检测方法的建立 | 第35-43页 |
1 材料及方法 | 第35-36页 |
1.1 主要材料 | 第35页 |
1.2 主要仪器 | 第35页 |
1.3 试剂的配制 | 第35页 |
1.4 引物的设计与合成 | 第35-36页 |
2 实验方法 | 第36-39页 |
2.1 淋巴细胞的分离 | 第36页 |
2.2 总RNA的提取 | 第36-37页 |
2.3 cDNA的合成 | 第37页 |
2.4 猕猴细胞因子标准曲线的构建 | 第37-39页 |
2.4.1 利用特异性引物进行IL-4、IL-10、IL-13、IFN-7及内参基因β-actin进行扩增 | 第37页 |
2.4.2 DNA片段胶回收 | 第37-38页 |
2.4.3 标准品质粒的构建 | 第38页 |
2.4.4 反应体系的优化 | 第38页 |
2.4.5 特异性试验 | 第38页 |
2.4.6 制作标准曲线 | 第38-39页 |
2.4.7 敏感性试验 | 第39页 |
2.4.8 重复性试验 | 第39页 |
3 实验结果 | 第39-42页 |
3.1 荧光定量PCR特异性检测 | 第39页 |
3.2 反应体系的优化 | 第39页 |
3.3 特异性检测 | 第39页 |
3.4 标准曲线的建立 | 第39-40页 |
3.5 敏感性分析 | 第40-41页 |
3.6 重复性分析 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
第三章 应用所建立的荧光定量PCR检测方法对猕猴体内IL-4、IL-10、IL-13及IFN-γ细胞因子mRNA表达水平进行检测 | 第43-46页 |
1 材料及方法 | 第43页 |
1.1 主要材料 | 第43页 |
1.2 主要仪器 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-44页 |
2.1 淋巴细胞的分离 | 第43页 |
2.2 总RNA的提取 | 第43-44页 |
2.3 cDNA的合成 | 第44页 |
2.4 荧光定量PCR | 第44页 |
3 实验结果 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
致谢 | 第54页 |