| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1 微生物杀虫剂研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1 微生物杀虫剂定义 | 第13-14页 |
| 1.2 微生物杀虫剂种类 | 第14-17页 |
| 1.2.1 细菌杀虫剂 | 第14-15页 |
| 1.2.2 真菌杀虫剂 | 第15-16页 |
| 1.2.3 病毒杀虫剂 | 第16页 |
| 1.2.4 农用抗生素 | 第16-17页 |
| 1.3 Bt研究进展 | 第17-20页 |
| 1.3.1 Bt的性状 | 第17页 |
| 1.3.2 Bt的杀虫机理和杀虫谱 | 第17-18页 |
| 1.3.3 Bt及其制剂在国内外的研究开发 | 第18-20页 |
| 2 微生物杀虫剂在土壤中的环境行为 | 第20-22页 |
| 2.1 微生物杀虫剂土壤环境行为及其检测方法 | 第20-22页 |
| 2.1.1 微生物杀虫剂土壤环境行为 | 第20-21页 |
| 2.1.2 环境行为检测方法 | 第21-22页 |
| 2.2 Bt在土壤中的环境行为 | 第22页 |
| 3. 微生物杀虫剂在土壤环境中的生态效应 | 第22-25页 |
| 3.1 微生物杀虫剂在土壤中的生态效应及其研究方法 | 第22-25页 |
| 3.1.1 微生物杀虫剂在土壤中的生态效应 | 第22-23页 |
| 3.1.2 生态效应研究方法 | 第23-25页 |
| 3.2 Bt在土壤中的生态效应 | 第25页 |
| 4. 本研究的目的与意义 | 第25-27页 |
| 第二章 Bt在土壤中的环境行为研究 | 第27-43页 |
| 1. 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 原始菌株 | 第27页 |
| 1.2 测试菌株 | 第27页 |
| 1.3 试剂 | 第27-28页 |
| 1.4 培养基 | 第28页 |
| 1.5 仪器 | 第28页 |
| 2. 方法 | 第28-33页 |
| 2.1 抗性菌株筛选 | 第28页 |
| 2.2 Bt菌悬液的制备 | 第28-29页 |
| 2.3 检测土壤中Bt方法的比较 | 第29-30页 |
| 2.3.1 绿色荧光蛋白基因标记cry1基因荧光检测法 | 第29页 |
| 2.3.2 Cry1蛋白的ELISA检测法 | 第29页 |
| 2.3.3 抗利福平突变菌株平板筛选法 | 第29-30页 |
| 2.4 土著微生物对Bt消长规律的影响 | 第30-31页 |
| 2.4.1 土壤材料采集 | 第30页 |
| 2.4.2 菌悬液喷施处理 | 第30页 |
| 2.4.3 培养与采样 | 第30-31页 |
| 2.4.4 Bt计数 | 第31页 |
| 2.5 Bt在不同种类土壤中的环境行为 | 第31-32页 |
| 2.5.1 土壤材料 | 第31页 |
| 2.5.2 菌悬液喷施处理 | 第31-32页 |
| 2.5.3 培养、采样与Bt计数 | 第32页 |
| 2.6 Bt在田间土壤中的环境行为 | 第32-33页 |
| 2.6.1 田间试验设计 | 第32页 |
| 2.6.2 菌悬液喷施处理 | 第32-33页 |
| 2.6.3 田间管理与采样 | 第33页 |
| 2.6.4 Bt计数 | 第33页 |
| 3. 试验结果 | 第33-40页 |
| 3.1 检测土壤中Bt方法的比较 | 第33-34页 |
| 3.2 土著微生物对Bt消长规律的影响 | 第34-36页 |
| 3.3 Bt在不同种类土壤中的环境行为 | 第36-40页 |
| 3.4 Bt在田间土壤中的环境行为 | 第40页 |
| 4. 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 Bt在土壤环境中的生态效应 | 第43-57页 |
| 1 材料 | 第43-44页 |
| 1.1 测试菌株 | 第43页 |
| 1.2 试剂 | 第43-44页 |
| 1.3 培养基 | 第44页 |
| 1.3.1 土壤细菌检测培养基 | 第44页 |
| 1.3.2 土壤真菌检测培养基 | 第44页 |
| 1.3.3 土壤放线菌检测培养基 | 第44页 |
| 1.4 仪器 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-49页 |
| 2.1 Bt菌悬液准备、田间实验设计、喷施处理和采样方法 | 第44-45页 |
| 2.2 可培养微生物总数量测定 | 第45页 |
| 2.2.1 细菌总数量测定 | 第45页 |
| 2.2.2 真菌数量测定 | 第45页 |
| 2.2.3 放线菌数量测定 | 第45页 |
| 2.3 土壤酶活测定 | 第45-46页 |
| 2.3.1 土壤脲酶活性 | 第45-46页 |
| 2.3.2 土壤碱性磷酸酶活性 | 第46页 |
| 2.3.3 土壤蔗糖酶活性 | 第46页 |
| 2.4 PCR-DGGE | 第46-47页 |
| 2.4.1 土壤微生物总DNA提取 | 第46页 |
| 2.4.2 16S rDNA保守序列区域片段扩增 | 第46-47页 |
| 2.4.3 DGGE过程 | 第47页 |
| 2.5 DGGE图谱解析 | 第47-48页 |
| 2.6 DGGE条带回收及测序 | 第48-49页 |
| 2.6.1 条带回收 | 第48页 |
| 2.6.2 目标片段纯化及克隆测序 | 第48页 |
| 2.6.3 序列分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-55页 |
| 3.1 Bt对可培养微生物总数的影响 | 第49-50页 |
| 3.1.1 细菌 | 第49页 |
| 3.1.2 真菌 | 第49-50页 |
| 3.1.3 放线菌 | 第50页 |
| 3.2 Bt对土壤酶活的影响 | 第50-52页 |
| 3.2.1 脲酶活性 | 第50-51页 |
| 3.2.2 碱性磷酸酶活性 | 第51页 |
| 3.2.3 蔗糖酶活性 | 第51-52页 |
| 3.3 Bt对土壤细菌群落遗传多样性的影响 | 第52-55页 |
| 3.3.1 PCR-DGGE图谱 | 第52-53页 |
| 3.3.2 相似性聚类分析 | 第53-54页 |
| 3.3.3 多样性指数分析 | 第54页 |
| 3.3.4 条带序列分析 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 全文总结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
