摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-10页 |
材料与方法 | 第10-19页 |
1 材料 | 第10页 |
2 主要设备及仪器 | 第10-11页 |
3 免疫组织化学方法 | 第11-12页 |
3.1 组织标本来源 | 第11页 |
3.2 免疫组织化学染色法 | 第11-12页 |
3.3 结果判断 | 第12页 |
4 人宫颈癌SiHa细胞培养 | 第12-13页 |
4.1 细胞复苏 | 第12页 |
4.2 细胞传代 | 第12-13页 |
5 细胞转染 | 第13页 |
5.1 转染步骤 | 第13页 |
6 Trizon法提取细胞RNA | 第13-14页 |
7 RT-PCR半定量检测目的基因m RNA | 第14-16页 |
7.1 RNA逆转录为cDNA | 第14-15页 |
7.2 以cDNA为模板进行PCR扩增 | 第15-16页 |
8 SiHa细胞总蛋白的提取 | 第16页 |
8.1 提取总蛋白 | 第16页 |
8.2 BCA法测蛋白浓度 | 第16页 |
9 Western blot检测目的蛋白 | 第16-18页 |
9.1 SDS-PAGE电泳 | 第16-17页 |
9.2 电转移 | 第17页 |
9.3 免疫检测 | 第17-18页 |
9.4 化学发光 | 第18页 |
10 细胞增殖实验 | 第18页 |
11 统计学分析 | 第18-19页 |
结果 | 第19-28页 |
1 免疫组织化学技术检测宫颈组织中SIRT1及E7的表达 | 第19-23页 |
2 宫颈癌组织中SIRT1及E7的相关性分析 | 第23-24页 |
3 RT-PCR半定量检测SiHa细胞中E7 mRNA水平 | 第24-25页 |
4 Western blot检测E7蛋白 | 第25-26页 |
5 Western blot检测SiHa细胞中肿瘤微环境相关蛋白的表达水平 | 第26-27页 |
6 细胞增殖实验结果 | 第27-28页 |
讨论 | 第28-32页 |
结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-37页 |
综述 HPV与宫颈癌研究进展 | 第37-51页 |
综述参考文献 | 第45-51页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |