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不同环境条件下水稻土硝酸盐还原过程及其功能微生物特征

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
1 前言第12-25页
    1.1 水稻土中氮素循环及硝酸盐还原过程第12-14页
    1.2 水稻土中的反硝化作用第14-18页
        1.2.1 反硝化作用第14页
        1.2.2 反硝化微生物及关键酶第14-17页
        1.2.3 氨氧化古菌的反硝化作用第17-18页
    1.3 水稻土中的厌氧铵氧化作用第18-23页
        1.3.1 厌氧铵氧化作用第18-19页
        1.3.2 厌氧铵氧化微生物及关键酶第19-22页
        1.3.3 影响厌氧铵氧化的环境因子第22-23页
    1.4 本研究主要目的意义及技术路线第23-25页
        1.4.1 研究目的及意义第23-24页
        1.4.2 研究技术路线第24-25页
2 不同水稻土中厌氧铵氧化过程活性及其功能微生物特征第25-38页
    2.1 实验材料与方法第25-29页
        2.1.1 供试土壤第25-26页
        2.1.2 基本理化测定第26页
        2.1.3 土壤DNA提取第26页
        2.1.4 厌氧铵氧化细菌 16S rRNA及hzsB基因克隆文库的构建及测序第26-27页
        2.1.5 hzsB基因的荧光定量PCR第27页
        2.1.6 添加~(15)NO_3~-标记的稳定同位素示踪实验第27-28页
        2.1.7 气体同位素的测定及厌氧铵氧化速率的计算第28页
        2.1.8 数据处理第28-29页
    2.2 结果与分析第29-35页
        2.2.1 土壤基本理化性质第29-30页
        2.2.2 厌氧铵氧化及反硝化作用速率第30-31页
        2.2.3 hzsB基因定量结果第31-32页
        2.2.4 Spearman相关性分析第32页
        2.2.5 Anammox细菌的群落结构及其与环境因子之间的关系第32-35页
    2.3 讨论第35-37页
        2.3.1 厌氧铵氧化活性及功能基因的丰度第35-36页
        2.3.2 厌氧铵氧化细菌的群落结构特征第36页
        2.3.3 环境因子对Anammox细菌群落结构的影响第36-37页
    2.4 小结第37-38页
3 不同水稻土中反硝化作用活性及其功能微生物特征第38-56页
    3.1 实验材料与方法第38-41页
        3.1.1 实验材料第38页
        3.1.2 土壤理化性质和活性指标的测定第38页
        3.1.3 土壤DNA的提取第38页
        3.1.4 定量PCR第38-39页
        3.1.5 AnirK基因克隆文库第39-40页
        3.1.6 nirK基因的Illumina Miseq测序第40页
        3.1.7 数据处理及统计分析第40-41页
    3.2 结果与分析第41-52页
        3.2.1 土壤样品的基本理化性质第41页
        3.2.2 土壤氨氧化潜势和反硝化活性变化第41-42页
        3.2.3 土壤微生物功能基因丰度的变化第42-44页
        3.2.4 AnirK基因克隆文库结果第44-46页
        3.2.5 nirK基因Miseq测序结果第46-52页
    3.3 讨论第52-54页
        3.3.1 硝化、反硝化潜势及其功能基因第52-53页
        3.3.2 奇古菌门-nirK基因的群落结构及其环境影响因子第53-54页
        3.3.3 反硝化微生物特征及其环境影响因子第54页
    3.4 小结第54-56页
4 三种代表性水稻土反硝化作用及氨氧化古菌群落结构第56-65页
    4.1 实验材料与方法第56-57页
        4.1.1 供试土壤第56页
        4.1.2 反硝化活性培养实验第56页
        4.1.3 土壤基本理化第56页
        4.1.4 反硝化基因定量第56-57页
        4.1.5 AnirK基因克隆文库第57页
        4.1.6 数据处理与统计分析第57页
    4.2 结果与分析第57-62页
        4.2.1 基本理化性质第57-58页
        4.2.2 反硝化活性变化第58-59页
        4.2.3 反硝化功能基因变化第59页
        4.2.4 奇古菌门-nirK基因群落结构组成及与环境的关系第59-62页
    4.3 讨论第62-64页
        4.3.1 理化性质变化及反硝化活性第62-63页
        4.3.2 反硝化功能基因变化第63页
        4.3.3 培养实验奇古菌门-nirK群落特征及与环境因子的关系第63-64页
    4.4 小结第64-65页
5 结论与展望第65-67页
    5.1 结论第65页
    5.2 展望第65-67页
参考文献第67-79页
致谢第79-80页

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