摘要 | 第3-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
前言 | 第17-28页 |
材料 | 第28-30页 |
1.1 主要仪器设备 | 第28页 |
1.2 细胞系 | 第28-29页 |
1.3 质粒 | 第29页 |
1.4 试剂及耗材 | 第29-30页 |
实验方法 | 第30-39页 |
2.1 主要溶液配制 | 第30-32页 |
2.2 细胞培养 | 第32页 |
2.3 siRNA转染细胞敲低IKKα/β及mTOR相关蛋白水平 | 第32-34页 |
2.4 Western blot检测Bay、siRNA、质粒等处理后对mTORC2活性的影响 | 第34-36页 |
2.5 免疫共沉淀与体外蛋白激酶活性检测 | 第36-37页 |
2.6 GST pull down | 第37-38页 |
2.7 细胞骨架染色 | 第38-39页 |
实验结果 | 第39-53页 |
3.1 IKK可与Rictor相互作用,且具有直接相互作用 | 第39-41页 |
3.2 IKK的抑制剂Bay11-7082可引起Akt(S473)磷酸化下调——时间与剂量效应 | 第41-43页 |
3.3 siRNA干扰敲低IKKα和IKKβ可引起Akt(S473)快速去磷酸化 | 第43-45页 |
3.4 IKK影响mTORC2的细胞骨架重组功能及其可能的机制 | 第45-47页 |
3.5 胰岛素激活mTORC2依赖于IKK | 第47-48页 |
3.6 IKK可调节Rictor与mTOR的相互作用 | 第48-50页 |
3.7 抑制IKK也可使IKK与Raptor的相互作用减弱 | 第50-51页 |
3.8 IKK除了可抑制P-Akt(S473)的磷酸化外,还可以引起Rictor与mTOR的快速去磷酸化——时间与剂量 | 第51-53页 |
讨论 | 第53-55页 |
全文主要结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
中英文缩略词对照表 | 第62-64页 |
成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |