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不同毛色山羊内脏器官Agouti基因mRNA及其编码蛋白差异表达研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
1 引言第10-15页
    1.1 AGOUTI 的涵义第10页
    1.2 AGOUTI 基因研究现状第10-13页
        1.2.1 AGOUTI 信号蛋白与 AGOUTI 基因一因多效第10-11页
        1.2.2 AGOUTI 基因作用机理第11页
        1.2.3 AGOUTI 基因的研究现状第11-13页
        1.2.4 本课题组对山羊 AGOUTI 基因研究进展第13页
    1.3 本研究的目的、意义及主要内容第13-15页
        1.3.1 研究的目的和意义第13页
        1.3.2 研究的主要内容第13-15页
2 材料与方法第15-31页
    2.1 主要试验材料及设备第15-19页
        2.1.1 样本采集第15页
        2.1.2 主要试剂和药品第15-16页
            2.1.2.1 荧光定量 PCR (RT‐QRCR)所用药品及试剂第15-16页
            2.1.2.2 WESTERN BLOTTING 所用药品及试剂第16页
        2.1.3 主要试验仪器与设备第16-17页
            2.1.3.1 RT‐qRCR所使用的主要试验仪器与设备第16-17页
            2.1.3.2 Western blotting所用主要试验仪器与设备第17页
        2.1.4 主要试剂的配制第17-18页
            2.1.4.1 RT‐qRCR主要试剂的配制第17页
            2.1.4.2 Western blotting主要试剂的配制第17-18页
        2.1.5 结果分析软件第18-19页
            2.1.5.1 RT‐qPCR试验主要分析软件第18页
            2.1.5.2 Western blotting 试验主要分析软件第18-19页
    2.2 试验方法和步骤第19-31页
        2.2.1 山羊内脏器官总 RNA 提取、纯化、检测和反转录第19-20页
        2.2.2 实时荧光定量 PCR(RT-QPCR)试验第20-24页
        2.2.3 山羊内脏器官总蛋白的提取与检测第24-25页
        2.2.4 蛋白免疫印迹(WESTERN BLOTTING)试验第25-31页
3 结果与分析第31-43页
    3.1 不同毛色山羊不同内脏器官 AGOUTI 基因 MRNA 差异表达研究第31-39页
        3.1.1 不同毛色山羊内脏器官总 RNA 提取第31页
        3.1.2 反转录产物保真性检测结果及最佳 PCR 反应条件建立第31-32页
        3.1.3 切胶回收纯化 PCR 扩增产物和重组子构建结果第32页
        3.1.4 标准品质粒的提取第32-34页
        3.1.5 标准曲线建立结果第34页
        3.1.6 扩增曲线建立结果第34-35页
        3.1.7 熔解曲线的建立及样本 RT-QPCR 检测结果第35页
        3.1.8 样本 MRNA 相对表达量比较分析第35-39页
    3.2 不同毛色山羊不同内脏器官 AGOUTI 信号蛋白(ASIP)差异表达研究第39-43页
        3.2.1 山羊内脏器官总蛋白的提取第39页
        3.2.2 蛋白浓度的测定第39-40页
        3.2.3 免疫反应抗体浓度的优化第40页
        3.2.4 印迹膜化学发光检测结果第40-43页
4 讨论第43-47页
    4.1 山羊脏器组织块的处理第43页
    4.2 总 RNA 的提取第43页
    4.3 PCR 扩增反应第43-44页
    4.4 不同毛色山羊不同内脏器官 AGOUTI 基因 MRNA 差异表达第44-45页
    4.5 总蛋白的提取与含量测定第45页
    4.6 WESTERN BLOTTING 试验与不同毛色山羊不同内脏器官 ASIP 蛋白差异表达第45-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-51页
在读期间发表的论文第51-52页
作者简介第52-53页
致谢第53-54页

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