摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-15页 |
1.1 AGOUTI 的涵义 | 第10页 |
1.2 AGOUTI 基因研究现状 | 第10-13页 |
1.2.1 AGOUTI 信号蛋白与 AGOUTI 基因一因多效 | 第10-11页 |
1.2.2 AGOUTI 基因作用机理 | 第11页 |
1.2.3 AGOUTI 基因的研究现状 | 第11-13页 |
1.2.4 本课题组对山羊 AGOUTI 基因研究进展 | 第13页 |
1.3 本研究的目的、意义及主要内容 | 第13-15页 |
1.3.1 研究的目的和意义 | 第13页 |
1.3.2 研究的主要内容 | 第13-15页 |
2 材料与方法 | 第15-31页 |
2.1 主要试验材料及设备 | 第15-19页 |
2.1.1 样本采集 | 第15页 |
2.1.2 主要试剂和药品 | 第15-16页 |
2.1.2.1 荧光定量 PCR (RT‐QRCR)所用药品及试剂 | 第15-16页 |
2.1.2.2 WESTERN BLOTTING 所用药品及试剂 | 第16页 |
2.1.3 主要试验仪器与设备 | 第16-17页 |
2.1.3.1 RT‐qRCR所使用的主要试验仪器与设备 | 第16-17页 |
2.1.3.2 Western blotting所用主要试验仪器与设备 | 第17页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第17-18页 |
2.1.4.1 RT‐qRCR主要试剂的配制 | 第17页 |
2.1.4.2 Western blotting主要试剂的配制 | 第17-18页 |
2.1.5 结果分析软件 | 第18-19页 |
2.1.5.1 RT‐qPCR试验主要分析软件 | 第18页 |
2.1.5.2 Western blotting 试验主要分析软件 | 第18-19页 |
2.2 试验方法和步骤 | 第19-31页 |
2.2.1 山羊内脏器官总 RNA 提取、纯化、检测和反转录 | 第19-20页 |
2.2.2 实时荧光定量 PCR(RT-QPCR)试验 | 第20-24页 |
2.2.3 山羊内脏器官总蛋白的提取与检测 | 第24-25页 |
2.2.4 蛋白免疫印迹(WESTERN BLOTTING)试验 | 第25-31页 |
3 结果与分析 | 第31-43页 |
3.1 不同毛色山羊不同内脏器官 AGOUTI 基因 MRNA 差异表达研究 | 第31-39页 |
3.1.1 不同毛色山羊内脏器官总 RNA 提取 | 第31页 |
3.1.2 反转录产物保真性检测结果及最佳 PCR 反应条件建立 | 第31-32页 |
3.1.3 切胶回收纯化 PCR 扩增产物和重组子构建结果 | 第32页 |
3.1.4 标准品质粒的提取 | 第32-34页 |
3.1.5 标准曲线建立结果 | 第34页 |
3.1.6 扩增曲线建立结果 | 第34-35页 |
3.1.7 熔解曲线的建立及样本 RT-QPCR 检测结果 | 第35页 |
3.1.8 样本 MRNA 相对表达量比较分析 | 第35-39页 |
3.2 不同毛色山羊不同内脏器官 AGOUTI 信号蛋白(ASIP)差异表达研究 | 第39-43页 |
3.2.1 山羊内脏器官总蛋白的提取 | 第39页 |
3.2.2 蛋白浓度的测定 | 第39-40页 |
3.2.3 免疫反应抗体浓度的优化 | 第40页 |
3.2.4 印迹膜化学发光检测结果 | 第40-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
4.1 山羊脏器组织块的处理 | 第43页 |
4.2 总 RNA 的提取 | 第43页 |
4.3 PCR 扩增反应 | 第43-44页 |
4.4 不同毛色山羊不同内脏器官 AGOUTI 基因 MRNA 差异表达 | 第44-45页 |
4.5 总蛋白的提取与含量测定 | 第45页 |
4.6 WESTERN BLOTTING 试验与不同毛色山羊不同内脏器官 ASIP 蛋白差异表达 | 第45-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
在读期间发表的论文 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |