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应用基因芯片(Microarray)和实时监测聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测他莫昔芬和雌二醇对人类乳腺癌细胞基因表达的调控

第一部分第9-41页
    第一章 前言第9-11页
    第二章 材料和方法第11-14页
        2-1. 细胞培养及药物处理第11-12页
        2-2. RNA 提取第12页
        2-3. cDNA 芯片分析第12-14页
            2-3-1. Aminoallyl 标记第12-13页
            2-3-2. aa-cDNA 染色(与Cy Dye Ester 联结)第13页
            2-3-3. 标记反应分析第13页
            2-3-4. 杂交探针标记第13-14页
            2-3-5. 数据分析第14页
    第三章 结果和结论第14-34页
        3-1. 他莫昔芬(TAM)和雌二醇(E2)对于乳腺癌细胞基因表达影响-----cDNA 芯片图谱第14-15页
        3-2. 在ZR-75-1 细胞系中,受他莫昔芬调控的基因第15-24页
        3-3. 在MDA-MB-231 细胞系中,他莫昔芬对基因表达的调控第24-26页
        3-4. 在ZR-75-1 细胞系中,雌二醇对基因表达的调控第26-29页
        3-5. 在MDA-MB-231 细胞系中,雌二醇对基因表达的调控第29-34页
    第四章 讨 论第34-36页
    参考文献第36-41页
第二部分:通过实时监测PCR 技术定量和定性检测他莫昔芬和雌激素对人类乳腺癌细胞系基因表达的调节第41-123页
    第一章 前言第41-55页
        1-1. 乳腺癌的流行病学第41-42页
        1-2. 乳腺癌发生的危险因素第42-44页
        1-3. 乳腺癌发生的分子基础第44-45页
        1-4. 雌激素作用的分子机制第45-46页
        1-5. 抗雌激素的作用机制第46页
        1-6. 他莫昔芬作为抗雌激素的作用第46-47页
        1-7. 雌激素受体以及受体介导的表皮生长因子受体第47-48页
        1-8. 雌激素受体以及对内分泌治疗的反应第48-49页
        1-9. 乳腺肿瘤的前癌基因和癌基因第49-52页
        1-10. 乳腺癌的抑癌基因第52-53页
        1-11. 反应性氧自由基(Reactive oxygen species ,ROS) 和氧化压力在肿瘤病因学中的位置第53-54页
        1-12. 抗氧化剂作为药物治疗乳腺癌第54-55页
    第二章 材料和方法第55-59页
        2-1. 实验设计第55-56页
        2-2. 细胞培养第56页
        2-3. 冷冻细胞的处理过程第56页
        2-4. 细胞传代培养第56页
        2-5. 他莫昔芬和雌二醇处理细胞第56-57页
        2-6. RNA 提取第57页
        2-7. cDNA 合成(Reverse Transcription )第57页
        2-8. Real-time PCR 扩增第57页
        2-9. 细胞存活率的测定第57-58页
        2-10. 统计学分析第58-59页
    第三章 结果第59-93页
        3-1. 他莫昔芬和雌二醇对雌激素受体阳性(ZR-75-1)和雌激素阴性第59-60页
        3-2. 基因分类研究结果第60-63页
        3-3. 基因表达在ER 阳性(ZR-75-1)和ER 阴性(MDA-MB-231)的人类乳腺癌细胞系中的不同表达第63-64页
        3-4. 他莫昔芬和雌激素诱导的雌激素受体阳性的人类乳腺癌细胞系(ZR-75-1)基因表达的变化第64-65页
        3-5. 他莫昔芬和雌激素诱导的雌激素受体阴性的人类乳腺癌细胞系(MDA-MB-231)基因表达的变化第65-66页
        3-6. 单独应用他莫昔芬、雌二醇、以及联合应用二者对MDA-MB-231 和 ZR-75-1 细胞形态学的影响第66-93页
    第四章 结论和讨论第93-95页
    参考文献第95-123页
致谢第123-125页
简 历第125页
博士期间发表文章第125-126页
论文摘要(中文)第126-129页
论文摘要(英文)第129页

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