| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·橡胶树及橡胶树棒孢霉落叶病 | 第10-12页 |
| ·橡胶树棒孢霉落叶病 | 第10页 |
| ·橡胶树棒孢霉落叶病的发生与危害 | 第10-12页 |
| ·橡胶树抗病性研究进展 | 第12-16页 |
| ·植物抗病性 | 第12-13页 |
| ·橡胶树主要病害抗病性研究进展 | 第13-16页 |
| ·植物基因差异表达的分子生物学研究方法 | 第16-24页 |
| ·基因差异表达的分子生物学常用研究方法 | 第16-20页 |
| ·cDNA-AFLP技术的原理及其应用 | 第20-24页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 2. 材料与方法 | 第26-39页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·主要仪器设备和试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-39页 |
| ·橡胶树叶片组织受多主棒孢侵染及其总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·多主棒孢侵染处理 | 第27页 |
| ·总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·cDNA合成 | 第28-29页 |
| ·全长cDNA第一链合成 | 第28页 |
| ·全长cDNA第二链合成 | 第28-29页 |
| ·限制性酶切及接头连接 | 第29-30页 |
| ·接头和引物的合成 | 第29-30页 |
| ·cDNA酶切 | 第30页 |
| ·接头准备 | 第30页 |
| ·接头连接 | 第30页 |
| ·预扩增 | 第30-31页 |
| ·选择性扩增 | 第31页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第31-33页 |
| ·差异片段的克隆与序列分析 | 第33-35页 |
| ·差异片段的回收 | 第33页 |
| ·差异片段的二次扩增 | 第33-34页 |
| ·二次扩增产物的回收 | 第34页 |
| ·差异片段的克隆 | 第34-35页 |
| ·差异表达基因的Blastx分析 | 第35页 |
| ·荧光定量PCR验证差异表达基因 | 第35-37页 |
| ·模板准备 | 第36页 |
| ·反应及操作 | 第36-37页 |
| ·不同寄主多主棒孢侵染橡胶树叶片组织后几种防御酶活性变化测定 | 第37-39页 |
| ·接种处理 | 第37页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶活性测定 | 第37-38页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定 | 第38页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性测定 | 第38页 |
| ·多酚氧化酶(PPO)活性测定 | 第38-39页 |
| 3. 结果与分析 | 第39-52页 |
| ·多主棒孢侵染处理 | 第39页 |
| ·RNA提取 | 第39-40页 |
| ·cDNA-AFLP分析 | 第40-42页 |
| ·cDNA合成 | 第40页 |
| ·预扩增 | 第40-41页 |
| ·选择性扩增及聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-42页 |
| ·差异片段的二次扩增 | 第42-43页 |
| ·差异表达基因的同源性及功能分析 | 第43-47页 |
| ·差异表达谱带荧光定量PCR验证分析 | 第47-49页 |
| ·几种防御酶活性变化的测定 | 第49-52页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶活性变化 | 第49-50页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化 | 第50页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性变化 | 第50-51页 |
| ·多酚氧化酶(PPO)活性变化 | 第51-52页 |
| 4. 讨论 | 第52-56页 |
| ·利用cDNA-AFLP技术分析橡胶树叶片组织受多主棒孢病菌侵染后差异表达基因的可行性 | 第52页 |
| ·研究材料及接种方法的选择 | 第52-53页 |
| ·cDNA-AFLP体系优化及应用 | 第53-54页 |
| ·总RNA质量及cDNA合成 | 第53页 |
| ·选择性扩增中常见问题及解决方案 | 第53页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测及银染技术 | 第53-54页 |
| ·橡胶树叶片组织受多主棒孢侵染后差异表达序列的分析 | 第54-55页 |
| ·橡胶树叶片组织受多主棒孢侵染后差异表达谱带荧光定量PCR验证分析 | 第55页 |
| ·不同寄主的多主棒孢对橡胶树防御酶活性的影响 | 第55-56页 |
| 5. 结论 | 第56-57页 |
| 6. 下一步研究计划 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
