| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 前言 | 第10-15页 |
| 1.1 短管赤眼蜂与Wolbachia | 第10-12页 |
| 1.1.1 Wolbachia研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.2 Wolbachia对短管赤眼蜂（Trichogramma pretiosum）的影响 | 第11-12页 |
| 1.2 实时荧光定量PCR技术 | 第12-13页 |
| 1.2.1 实时荧光定量PCR的原理 | 第12页 |
| 1.2.2 实时荧光定量PCR的应用 | 第12-13页 |
| 1.3 转录组测序技术 | 第13-14页 |
| 1.3.1 转录组的概述 | 第13页 |
| 1.3.2 转录组的应用 | 第13-14页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第14-15页 |
| 2 30℃高温胁迫和抗生素对短管赤眼蜂生殖力的影响 | 第15-36页 |
| 2.1 材料与方法 | 第15-19页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第15页 |
| 2.1.2 主要仪器与试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 短管赤眼蜂和米蛾体内Wolbachia的鉴定 | 第15-17页 |
| 2.1.3.1 总DNA的提取 | 第15-16页 |
| 2.1.3.2 PCR检测短管赤眼蜂和米蛾体内的Wolbachia | 第16-17页 |
| 2.1.3.3 测序分析 | 第17页 |
| 2.1.3.4 构建系统发育树 | 第17页 |
| 2.1.4 高温 30℃处理方法 | 第17-18页 |
| 2.1.5 不同抗生素的处理方法 | 第18页 |
| 2.1.6 统计方法 | 第18-19页 |
| 2.2 结果与分析 | 第19-32页 |
| 2.2.1 短管赤眼蜂和米蛾体内Wolbachia鉴定结果 | 第19-21页 |
| 2.2.1.1 电泳结果 | 第19页 |
| 2.2.1.2 测序结果 | 第19页 |
| 2.2.1.3 遗传进化树的建立 | 第19-21页 |
| 2.2.2 30℃高温胁迫和抗生素对短管赤眼蜂形态的影响 | 第21-24页 |
| 2.2.2.1 30℃高温胁迫和抗生素对短管赤眼蜂外部形态的影响 | 第21-23页 |
| 2.2.2.2 抗生素对短管赤眼蜂卵巢管的影响 | 第23-24页 |
| 2.2.3 抗生素对Wolbachia及短管赤眼蜂的药效作用 | 第24-25页 |
| 2.2.4 抗生素对短管赤眼蜂后代性比的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.5 抗生素处理对短管赤眼蜂 24 h产卵量的影响 | 第26-30页 |
| 2.2.6 30℃高温胁迫对短管赤眼蜂出蜂量的影响 | 第30-32页 |
| 2.2.7 30℃高温胁迫和抗生素处理对短管赤眼蜂后代性比影响的比较 | 第32页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第32-36页 |
| 2.3.1 Wolbachia的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.2 30℃高温胁迫和抗生素对Wolbachia及短管赤眼蜂形态的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.2.1 30℃高温胁迫对Wolbachia的影响 | 第33页 |
| 2.3.2.2 抗生素对短管赤眼蜂生殖的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.3 抗生素对寄主短管赤眼蜂的药效作用 | 第34-35页 |
| 2.3.4 抗生素对短管赤眼蜂后代性比的影响 | 第35页 |
| 2.3.5 抗生素对短管赤眼蜂 24 h产卵量的影响 | 第35页 |
| 2.3.6 30℃高温胁迫对短管赤眼蜂出蜂量的影响 | 第35-36页 |
| 3 利用荧光定量PCR检测高温处理的雌雄嵌合体和盐酸四环素处理不同世代的短管赤眼蜂wsp基因表达差异 | 第36-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-41页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第36页 |
| 3.1.2 主要仪器与试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.2.1 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.2.2 主要培养基 | 第36-37页 |
| 3.1.2.3 主要试剂配制 | 第37页 |
| 3.1.3 短管赤眼蜂体内wsp基因检测 | 第37页 |
| 3.1.4 定量PCR标准曲线的制定 | 第37-39页 |
| 3.1.4.1 PCR产物的纯化 | 第37页 |
| 3.1.4.2 质粒载体连接反应 | 第37-38页 |
| 3.1.4.3 转化反应 | 第38页 |
| 3.1.4.4 挑斑和细菌培养 | 第38页 |
| 3.1.4.5 PCR检测和测序分析 | 第38页 |
| 3.1.4.6 质粒的提取 | 第38-39页 |
| 3.1.4.7 质粒的紫外分光光度计检测 | 第39页 |
| 3.1.5 实时荧光定量PCR检测短管赤眼蜂体内wsp基因表达量 | 第39-40页 |
| 3.1.5.1 特异引物设计 | 第39-40页 |
| 3.1.5.2 反应体系 | 第40页 |
| 3.1.5.3 荧光定量PCR程序的设定 | 第40页 |
| 3.1.5.4 标准曲线和融解曲线的建立 | 第40页 |
| 3.1.6 数据整理与分析 | 第40-41页 |
| 3.2 结果与分析 | 第41-45页 |
| 3.2.1 wsp基因标准曲线和融解曲线的建立 | 第41-42页 |
| 3.2.2 wsp基因在高温处理后短管赤眼蜂不同表现型个体的表达差异 | 第42-44页 |
| 3.2.3 wsp基因在 10 mg/mL盐酸四环素蜂蜜水处理后短管赤眼蜂不同世代雌蜂中的表达差异 | 第44-45页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第45-46页 |
| 3.3.1 高温 30℃处理对短管赤眼蜂雌蜂体内wsp的影响 | 第45页 |
| 3.3.2 10 mg/mL盐酸四环素蜂蜜水处理对短管赤眼蜂雌蜂体内wsp的影响 | 第45-46页 |
| 4 转录组测序分析 | 第46-58页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-47页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第46页 |
| 4.1.2 总RNA的提取 | 第46页 |
| 4.1.3 RNA质量检测 | 第46-47页 |
| 4.1.3.1 总RNA完整性检测 | 第46页 |
| 4.1.3.2 总RNA的紫外分光光度计检测 | 第46-47页 |
| 4.1.4 转录组测序及数据组装 | 第47页 |
| 4.1.4.1 cDNA文库的构建及测序 | 第47页 |
| 4.1.4.2 序列组装 | 第47页 |
| 4.1.5 短管赤眼蜂转录组的功能注释 | 第47页 |
| 4.2 结果与分析 | 第47-57页 |
| 4.2.1 短管赤眼蜂RNA样品抽提结果检测 | 第47-48页 |
| 4.2.2 短管赤眼蜂转录组序列特征 | 第48-49页 |
| 4.2.3 短管赤眼蜂转录组序列注释结果 | 第49-54页 |
| 4.2.3.1 短管赤眼蜂转录组Nr功能注释 | 第49-51页 |
| 4.2.3.2 短管赤眼蜂转录组的KOG功能注释 | 第51-52页 |
| 4.2.3.3 短管赤眼蜂转录组GO的功能注释 | 第52-53页 |
| 4.2.3.4 短管赤眼蜂转录组KEGG的功能注释 | 第53-54页 |
| 4.2.4 SSR重复序列注释 | 第54-57页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第57-58页 |
| 5 全文总结 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
