| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4-5页 |
| 缩略词列表 | 第9-11页 |
| 1 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 病程相关蛋白 | 第12-13页 |
| 1.1.1 病程相关蛋白发现 | 第12页 |
| 1.1.2 病程相关蛋白的性质 | 第12-13页 |
| 1.1.3 病程相关蛋白分类 | 第13页 |
| 1.2 PR5家族 | 第13-15页 |
| 1.2.1 PR5蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2.2 类甜味蛋白TLPS | 第14页 |
| 1.2.3 TLPS的抗真菌活性及机制 | 第14-15页 |
| 1.2.4 TLP与植物抗逆 | 第15页 |
| 1.3 NP24基因 | 第15-17页 |
| 1.3.1 NP24性质 | 第15-16页 |
| 1.3.2 NP24抗真菌活力 | 第16页 |
| 1.3.3 NP24蛋白体外表达研究 | 第16页 |
| 1.3.4 NP24抑菌机制 | 第16-17页 |
| 1.4 研究目的和意义、内容及技术路线 | 第17-19页 |
| 2 NP24的克隆及功能研究 | 第19-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第19页 |
| 2.1.3 试剂和设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 实验用到的溶液和培养基 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-35页 |
| 2.2.1 TriZol法提取RNA并反转录 | 第22-23页 |
| 2.2.2 NP24的扩增 | 第23-25页 |
| 2.2.3 NP24基因的连接及转化 | 第25-27页 |
| 2.2.4 NP24的生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.5 NP24表达模式分析 | 第27-28页 |
| 2.2.6 NP24超表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.7 干扰载体的构建 | 第30-34页 |
| 2.2.8 番茄的遗传转化 | 第34-35页 |
| 2.2.9 转基因植株的筛选 | 第35页 |
| 2.2.10 NP24生物学功能分析 | 第35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-42页 |
| 2.3.1 NP24的克隆和生物信息学分析 | 第35-37页 |
| 2.3.2 NP24进化树分析 | 第37页 |
| 2.3.3 NP24表达模式分析 | 第37-38页 |
| 2.3.4 载体构建 | 第38-40页 |
| 2.3.5 转基因植株鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.6 NP24功能分析 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-43页 |
| 3 NP24真核表达、纯化及体外抑菌分析 | 第43-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第43-45页 |
| 3.1.1 菌株、质粒 | 第43页 |
| 3.1.2 培养基和试剂 | 第43-45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-55页 |
| 3.2.1 重组表达载体NP24-pPIC9K的构建 | 第45-52页 |
| 3.2.2 目的蛋白的Western blot检测 | 第52-53页 |
| 3.2.3 β-1,3-葡聚糖酶活测定 | 第53-54页 |
| 3.2.4 病原菌的活化扩繁 | 第54页 |
| 3.2.5 纯化蛋白体外抑菌实验 | 第54页 |
| 3.2.6 免疫染色 | 第54-55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-59页 |
| 3.3.1 NP24-pPIC9K重组表达载体的构建 | 第55页 |
| 3.3.2 高表达转化子PCR验证 | 第55-56页 |
| 3.3.3 蛋白的诱导表达及纯化 | 第56-57页 |
| 3.3.4 Western Blot检测结果 | 第57页 |
| 3.3.5 β-1,3-葡聚糖酶活性测定 | 第57-58页 |
| 3.3.6 免疫染色 | 第58页 |
| 3.3.7 纯化蛋白的抑菌试验 | 第58-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-60页 |
| 4 结论与展望 | 第60-61页 |
| 4.1 结论 | 第60页 |
| 4.2 本论文创新点 | 第60页 |
| 4.3 后续工作建议 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
