| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 材料与方法 | 第10-23页 |
| 1 材料 | 第10-12页 |
| 1.1 菌株 | 第10页 |
| 1.2 载体 | 第10页 |
| 1.3 试剂及试剂盒 | 第10页 |
| 1.4 主要培养基及溶液的配制 | 第10-12页 |
| 1.5 主要仪器 | 第12页 |
| 1.6 生物信息途径及计算机程序 | 第12页 |
| 2 方法 | 第12-23页 |
| 2.1 目的基因的合成及引物设计 | 第12-13页 |
| 2.2 生物信息学分析 | 第13页 |
| 2.3 重组表达质粒的构建 | 第13-18页 |
| 2.4 转化毕赤酵母 | 第18-19页 |
| 2.5 含目的基因的高拷贝毕赤酵母转化子的筛选 | 第19-20页 |
| 2.6 酵母转化子的PCR鉴定 | 第20页 |
| 2.7 目的蛋白的摇瓶表达 | 第20-21页 |
| 2.8 重组表达蛋白的质谱鉴定 | 第21-23页 |
| 结果 | 第23-44页 |
| 1 LYG2和LYC5基因的合成及引物设计 | 第23-24页 |
| 2 LYG2和LYC5的生物信息学分析 | 第24-28页 |
| 3 pPIC9K-LYG2和pPIC9K-LYC5重组表达质粒的构建 | 第28-31页 |
| 4 线性化质粒转化毕赤酵母GS115 | 第31页 |
| 5 含目的基因的高拷贝毕赤酵母转化子的筛选 | 第31-34页 |
| 6 LYG2和LYC5重组酵母菌株的PCR鉴定 | 第34-36页 |
| 7 LYG2和LYC5表达上清的SDS-PAGE电泳分析及活性分析 | 第36-40页 |
| 8 LYG2和LYC5重组蛋白的质谱鉴定 | 第40-44页 |
| 讨论 | 第44-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 综述（一） | 第49-56页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 综述（二） | 第56-68页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |