摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1.1 辽宁绒山羊 | 第11-12页 |
1.1.1 辽宁绒山羊的特性 | 第12页 |
1.1.2 辽宁绒山羊繁育的意义及前景 | 第12页 |
1.2 国内外的肌肉生长发育的研究现状 | 第12-14页 |
1.2.1 肌肉生长发育的主要机制 | 第13-14页 |
1.2.2 调节肌肉生长发育的基因 | 第14页 |
1.3 IGF2基因研究现状 | 第14-16页 |
1.3.1 IGF2基因的发现 | 第15页 |
1.3.2 IGF2基因的功能 | 第15页 |
1.3.3 IGF2基因在哺乳动物中的研究 | 第15-16页 |
1.4 ZBED6基因的研究现状 | 第16-17页 |
1.4.1 ZBED6基因的发现 | 第16页 |
1.4.2 ZBED6基因的功能 | 第16-17页 |
1.4.3 ZBED6基因在哺乳动物中的研究 | 第17页 |
1.5 DNA甲基化研究现状 | 第17-20页 |
1.5.1 DNA甲基化主要机制 | 第17-18页 |
1.5.2 DNA甲基化的作用 | 第18-19页 |
1.5.3 IGF和ZBED6的甲基化研究 | 第19-20页 |
1.6 研究目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 IGF2和ZBED6基因克隆、分子特征分析 | 第21-53页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验动物 | 第21页 |
2.1.2 实验样品的采集 | 第21页 |
2.1.3 药品与试剂 | 第21-22页 |
2.1.4 仪器与设备 | 第22页 |
2.1.5 溶液及试剂的配制 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-27页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.2 总RNA浓度的测定 | 第24页 |
2.2.3 总RNA的反转录反应 | 第24-25页 |
2.2.4 PCR反应 | 第25-27页 |
2.2.5 不同物种序列信息 | 第27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-52页 |
2.3.1 IGF2基因的分子特征 | 第27-38页 |
2.3.2 ZBED6基因编码区的分子特征 | 第38-52页 |
2.4 讨论 | 第52页 |
2.5 小结 | 第52-53页 |
第三章 IGF2和ZBED6基因表达的研究 | 第53-63页 |
3.1 材料与方法 | 第53-54页 |
3.1.1 总RNA的提取 | 第53页 |
3.1.2 总RNA浓度的检测 | 第53页 |
3.1.3 RNA的反转录反应 | 第53页 |
3.1.4 荧光定量PCR | 第53页 |
3.1.5 实时荧光相对定量PCR反应的条件和操作步骤 | 第53-54页 |
3.2 结果与分析 | 第54-61页 |
3.2.1 辽宁绒山羊组织样本内β-actin、IGF2基因荧光定量PCR引物的标准曲线和特异性曲线 | 第54-56页 |
3.2.2 辽宁绒山羊体内各组织器官内IGF2基因的相对表达水平 | 第56-58页 |
3.2.3 辽宁绒山羊组织样本内β-actin、ZBED6基因荧光定量PCR引物的标准曲线和特异性曲线 | 第58-59页 |
3.2.4. 辽宁绒山羊体内各组织器官内ZEBD6基因的相对表达水平 | 第59-61页 |
3.3 讨论 | 第61-62页 |
3.4 小结 | 第62-63页 |
第四章 IGF2和ZBED6基因甲基化水平的研究 | 第63-75页 |
4.1 材料与方法 | 第63-69页 |
4.1.1 药品及试剂 | 第63-64页 |
4.1.2 基因组DNA的提取 | 第64页 |
4.1.3 基因组DNA的检测 | 第64-65页 |
4.1.4 亚硫酸氢钠对基因组DNA进行处理 | 第65-66页 |
4.1.5 PCR扩增反应 | 第66-67页 |
4.1.6 PCR产物连接转化 | 第67-68页 |
4.1.7 质粒提取 | 第68-69页 |
4.1.8 质粒测序 | 第69页 |
4.2 结果与分析 | 第69-72页 |
4.3 讨论 | 第72-74页 |
4.4 小结 | 第74-75页 |
第五章 结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读硕士期间发表的文章 | 第83页 |