摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第12-21页 |
1.1 珙桐的研究背景 | 第12-13页 |
1.1.1 珙桐概述 | 第12页 |
1.1.2 珙桐种子的特点及研究背景 | 第12-13页 |
1.2 植物种子败育研究现状 | 第13-17页 |
1.3 植物纤维素合酶及纤维素合酶基因的研究进展 | 第17-19页 |
1.4 本实验研究内容 | 第19-20页 |
1.5 技术路线 | 第20-21页 |
第2章 珙桐种子败育相关基因的表达分析 | 第21-33页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-24页 |
2.2.1 总RNA的提取及反转录 | 第22页 |
2.2.2 引物设计 | 第22-23页 |
2.2.3 不同发育阶段的珙桐种子总纤维素含量测定 | 第23页 |
2.2.4 基因表达分析 | 第23-24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-30页 |
2.3.1 珙桐种子CesA基因家族的表达模式分析 | 第24-26页 |
2.3.2 珙桐中CesA与拟南芥中CesA的聚类分析 | 第26页 |
2.3.3 珙桐CesA基因的qRT-PCR分析 | 第26-27页 |
2.3.4 不同发育阶段种子中的总纤维素含量分析 | 第27-29页 |
2.3.5 候选基因在不同发育阶段的正常种子中的表达分析 | 第29页 |
2.3.6 c43681.graph_c0在珙桐不同组织中的表达分析 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-33页 |
第3章 珙桐c43681.graph_c0基因的克隆 | 第33-46页 |
3.1 材料 | 第33-34页 |
3.1.1 实验材料 | 第33页 |
3.1.2 实验试剂 | 第33页 |
3.1.3 实验溶液 | 第33页 |
3.1.4 实验仪器 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-37页 |
3.2.1 总RNA的提取 | 第34页 |
3.2.2 珙桐c43681.graph_c0基因片段的扩增 | 第34-37页 |
3.2.3 珙桐c43681.graph_c0基因的序列分析 | 第37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-44页 |
3.3.1 珙桐c43681.graph_c0基因的克隆及分析 | 第37-38页 |
3.3.2 珙桐c43681.graph_c0基因的cDNA序列分析 | 第38-42页 |
3.3.3 珙桐c43681.graph_c0基因编码蛋白质的氨基酸序列分析 | 第42-43页 |
3.3.4 珙桐c43681.graph_c0基因编码蛋白质产物的二级结构、三级结构、亲疏水性分析及信号肽位置预测 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-46页 |
第4章 c43681.graph_c0基因的原核表达 | 第46-56页 |
4.1 材料和方法 | 第46页 |
4.1.1 质粒及菌株 | 第46页 |
4.1.2 实验试剂 | 第46页 |
4.1.3 实验仪器 | 第46页 |
4.1.4 引物设计 | 第46页 |
4.2 实验方法 | 第46-51页 |
4.2.1 克隆载体的构建 | 第46-47页 |
4.2.2 原核表达载体的构建与鉴定 | 第47-49页 |
4.2.3 纤维素合酶基因的原核表达及表达条件的优化 | 第49-51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-54页 |
4.3.1 表达载体的构建与鉴定 | 第51-52页 |
4.3.2 纤维素合酶诱导表达及表达条件的优化 | 第52-54页 |
4.4 讨论 | 第54-56页 |
第5章 目标基因转化拟南芥 | 第56-63页 |
5.1 实验材料 | 第56页 |
5.2 实验试剂 | 第56页 |
5.3 实验方法 | 第56-59页 |
5.3.1 植物表达载体的构建 | 第56-58页 |
5.3.2 转化拟南芥 | 第58-59页 |
5.3.3 转基因拟南芥的筛选 | 第59页 |
5.4 结果与分析 | 第59-62页 |
5.4.1 植物表达载体的构建 | 第59-60页 |
5.4.2 转CesA基因拟南芥的筛选和鉴定 | 第60-62页 |
5.5 讨论 | 第62-63页 |
第6章 结论与展望 | 第63-66页 |
6.1 结论 | 第63-64页 |
6.2 展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-78页 |
附录A | 第78-79页 |
附录B | 第79-80页 |
附录C | 第80-81页 |
附录D | 第81-82页 |
附录E | 第82-83页 |
附录F | 第83-84页 |
附录G | 第84-87页 |
附录H | 第87-88页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |