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珙桐CesA基因的克隆及在种子发育中的表达分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第1章 绪论第12-21页
    1.1 珙桐的研究背景第12-13页
        1.1.1 珙桐概述第12页
        1.1.2 珙桐种子的特点及研究背景第12-13页
    1.2 植物种子败育研究现状第13-17页
    1.3 植物纤维素合酶及纤维素合酶基因的研究进展第17-19页
    1.4 本实验研究内容第19-20页
    1.5 技术路线第20-21页
第2章 珙桐种子败育相关基因的表达分析第21-33页
    2.1 材料第21-22页
        2.1.1 实验材料第21页
        2.1.2 实验试剂第21页
        2.1.3 实验仪器第21-22页
    2.2 实验方法第22-24页
        2.2.1 总RNA的提取及反转录第22页
        2.2.2 引物设计第22-23页
        2.2.3 不同发育阶段的珙桐种子总纤维素含量测定第23页
        2.2.4 基因表达分析第23-24页
    2.3 结果与分析第24-30页
        2.3.1 珙桐种子CesA基因家族的表达模式分析第24-26页
        2.3.2 珙桐中CesA与拟南芥中CesA的聚类分析第26页
        2.3.3 珙桐CesA基因的qRT-PCR分析第26-27页
        2.3.4 不同发育阶段种子中的总纤维素含量分析第27-29页
        2.3.5 候选基因在不同发育阶段的正常种子中的表达分析第29页
        2.3.6 c43681.graph_c0在珙桐不同组织中的表达分析第29-30页
    2.4 讨论第30-33页
第3章 珙桐c43681.graph_c0基因的克隆第33-46页
    3.1 材料第33-34页
        3.1.1 实验材料第33页
        3.1.2 实验试剂第33页
        3.1.3 实验溶液第33页
        3.1.4 实验仪器第33-34页
    3.2 实验方法第34-37页
        3.2.1 总RNA的提取第34页
        3.2.2 珙桐c43681.graph_c0基因片段的扩增第34-37页
        3.2.3 珙桐c43681.graph_c0基因的序列分析第37页
    3.3 结果与分析第37-44页
        3.3.1 珙桐c43681.graph_c0基因的克隆及分析第37-38页
        3.3.2 珙桐c43681.graph_c0基因的cDNA序列分析第38-42页
        3.3.3 珙桐c43681.graph_c0基因编码蛋白质的氨基酸序列分析第42-43页
        3.3.4 珙桐c43681.graph_c0基因编码蛋白质产物的二级结构、三级结构、亲疏水性分析及信号肽位置预测第43-44页
    3.4 讨论第44-46页
第4章 c43681.graph_c0基因的原核表达第46-56页
    4.1 材料和方法第46页
        4.1.1 质粒及菌株第46页
        4.1.2 实验试剂第46页
        4.1.3 实验仪器第46页
        4.1.4 引物设计第46页
    4.2 实验方法第46-51页
        4.2.1 克隆载体的构建第46-47页
        4.2.2 原核表达载体的构建与鉴定第47-49页
        4.2.3 纤维素合酶基因的原核表达及表达条件的优化第49-51页
    4.3 结果与分析第51-54页
        4.3.1 表达载体的构建与鉴定第51-52页
        4.3.2 纤维素合酶诱导表达及表达条件的优化第52-54页
    4.4 讨论第54-56页
第5章 目标基因转化拟南芥第56-63页
    5.1 实验材料第56页
    5.2 实验试剂第56页
    5.3 实验方法第56-59页
        5.3.1 植物表达载体的构建第56-58页
        5.3.2 转化拟南芥第58-59页
        5.3.3 转基因拟南芥的筛选第59页
    5.4 结果与分析第59-62页
        5.4.1 植物表达载体的构建第59-60页
        5.4.2 转CesA基因拟南芥的筛选和鉴定第60-62页
    5.5 讨论第62-63页
第6章 结论与展望第63-66页
    6.1 结论第63-64页
    6.2 展望第64-66页
参考文献第66-78页
附录A第78-79页
附录B第79-80页
附录C第80-81页
附录D第81-82页
附录E第82-83页
附录F第83-84页
附录G第84-87页
附录H第87-88页
攻读硕士学位期间发表论文第88-90页
致谢第90页

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